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1、食品安全快速检测技术的最新进展精品现在学习的是第1页，共33页老鼠肉冒充羊肉老鼠肉冒充羊肉 门门l曝光时间：2013.5.8 江苏无锡公安机关在无锡、上海两地统一行动，打掉一特大制售假羊肉犯罪团伙，抓获犯罪嫌疑人63名，捣毁黑窝点50余处，现场查扣制假原料、成品半成品10余吨。经查，2009年以来，犯罪嫌疑人卫某从山东购入狐狸、水貂、老鼠等未经检验检疫的动物肉制品，添加明胶、胭脂红、硝盐等冒充羊肉销售至苏、沪等地农贸市场。现在学习的是第2页，共33页肯德基等餐饮店冰块菌落总数被指超马桶水 l7月月20日，央视记者在崇文门的肯德基、真日，央视记者在崇文门的肯德基、真功夫和麦当劳功夫和麦当劳3家大
2、型快餐店中，取回可食家大型快餐店中，取回可食用冰块进行抽样检测。检测结果发现，肯德用冰块进行抽样检测。检测结果发现，肯德基崇文门店、真功夫崇文门店的冰块菌落数基崇文门店、真功夫崇文门店的冰块菌落数量高于国家标准，且高于马桶水数倍。量高于国家标准，且高于马桶水数倍。现在学习的是第3页，共33页恒天然集团部分产品可能含有肉毒杆菌毒素l2013年年8月月2日下午，乳业巨头恒天然集团向新西兰初级产业部通报旗下部分产品可日下午，乳业巨头恒天然集团向新西兰初级产业部通报旗下部分产品可能含有肉毒杆菌毒素，随后，初级产业部将情况通报主要海外市场的政府监管机构，能含有肉毒杆菌毒素，随后，初级产业部将情况通报主要
3、海外市场的政府监管机构，并加紧调查核实。并加紧调查核实。l2013年年8月月3日，新西兰初级产业部对外宣布该事件，声称受污染的产品可能日，新西兰初级产业部对外宣布该事件，声称受污染的产品可能被用于婴儿配方奶粉和运动饮料的生产。被用于婴儿配方奶粉和运动饮料的生产。l恒天然集团新西兰奶制品公司执行董事加里罗马诺说，有恒天然集团新西兰奶制品公司执行董事加里罗马诺说，有3批浓缩乳清蛋白批浓缩乳清蛋白出现质量问题，这些产品是去年出现质量问题，这些产品是去年5月在新西兰本地一家工厂生产的，涉嫌被污月在新西兰本地一家工厂生产的，涉嫌被污染的产品总量为染的产品总量为38吨。污染源是该公司在北岛怀卡托地区豪塔普
4、工厂的一根受吨。污染源是该公司在北岛怀卡托地区豪塔普工厂的一根受污染的管道。恒天然向其污染的管道。恒天然向其8家客户（包括中国家客户（包括中国3家）提醒产品肉毒杆菌问题家）提醒产品肉毒杆菌问题.现在学习的是第4页，共33页l皮革奶老酸奶 皮革奶，就是向牛奶中添加了皮革奶，就是向牛奶中添加了皮革水解蛋白，人为提高了牛奶有机皮革水解蛋白，人为提高了牛奶有机成分中的蛋白质含量检测指标的牛奶。成分中的蛋白质含量检测指标的牛奶。皮革水解蛋白就是利用动物已经废弃皮革水解蛋白就是利用动物已经废弃的皮革制品或者甚至是动物的毛发，的皮革制品或者甚至是动物的毛发，把它们进行水解之后制成粉状，然后把它们进行水解之后
5、制成粉状，然后再混入到牛奶当中，来提高其中的蛋再混入到牛奶当中，来提高其中的蛋白质的含量。由于这种皮革水解蛋白白质的含量。由于这种皮革水解蛋白中含有严重超标的重金属等有害物质，中含有严重超标的重金属等有害物质，致使牛奶有毒，严重危害消费者的身致使牛奶有毒，严重危害消费者的身体健康甚至生命。体健康甚至生命。现在学习的是第5页，共33页食品安全快速检测技术的最新进展食品安全快速检测技术的最新进展l 近年来，各种食品安全的现象和问题粉碎了品牌食品的形象，全球也在普遍的关注食品安全检测技术。这让我们开始反思食品安全检测过程中的许多不足，人类从温饱向小康迈进，对食品的功能要求日益复杂化，我国食品安全在制
6、度建设上也得到了高度的重视，但是立法缺乏可操作性，法律空白也在食品安全领域大量存在，比如说，国外普遍存在的食品召回事件以及制度。总体而言，食品安全便是人类所共同关注的话题，这也是推进我国在食品安全检测技术方面的研究的一个重要因素，以下就实验室中食品安全检测技术的发展现状进行分析。现在学习的是第6页，共33页生物芯片技术在实验室食品安全检测技术中的应用1、基因芯片可用于食品中致病病原体的检测。基因芯片技术可以对多指标并行检测，同时检测多种病毒以及病毒的多种类型。是目前病毒检测的热点研究方法，检测结果不仅敏感度高于传统方法，且操作简单，熏复性好，并节省了大量时间。另外，该方法通过多重PCR扩增每种
7、菌的16SDNA保守区域，在扩增的同时引入修饰基团，同时利用间接标记法对目核酸进行荧光标记，结果显示检测灵敏度高于传统的平板培养法。并且检测成本仅为原来的几十分之一。现在学习的是第7页，共33页生物芯片技术在实验室食品安全检测技术中的应用l2、基因芯片可用于食源性病毒方面的检测。食物源性病毒基因芯片检测技术可以在几个小时内检测出食品中的诸如甲肝病毒、轮状病毒、星状病毒和脊髓灰质炎病毒。研究人员根据病毒基因组中高度保守的区域如衣壳蛋白等设计特异性探针，通过氨基和芯片表面的磷酸基团结合将探针固定在芯片表面，结果显示其灵敏度与荧光定量PCR$目当”1。为食源性病毒的快速诊断和病原鉴定等提供了更有效的
8、手段。现在学习的是第8页，共33页低能量超声食品检测技术的应用l低能量超声技术被证明是具有精确、低价等特点的技术，另外，它能够进行非破坏性的检测，对高浓度的食品以及不透明的各类材料都可以进行检测，所以它在食品安全领域是非常有研究价值和应用潜力的。现在学习的是第9页，共33页低能量超声食品检测技术的应用l低能量超声技术被证明是具有精确、低价等特点的技术，另外，它能够进行非破坏性的检测，对高浓度的食品以及不透明的各类材料都可以进行检测，所以它在食品安全领域是非常有研究价值和应用潜力的。现在学习的是第10页，共33页低能量超声食品检测技术的应用l1、可以进行乳制品的品质检测工作。最初，低能超声技术是
9、用于乳制品成分以及含量检测的，目前，已经归纳、总结出了超声检测的数学模型。另外，利用这项技术对凝乳酶的作用对导致乳制品凝絮的全部过程进行了无损监测活动。现在学习的是第11页，共33页低能量超声食品检测技术的应用l2、可以进行肉制品的品质检测工作。近几年，我国内制品生产力n-rI业快速崛起，生产过程中需要一种快速、无损的方法来对肉制品的品质和质量进行严格控制。超声波可以在精肉与肥斑之间的传播中存在非常明显的差异，所以能够简单快捷的检测动物的脂肪厚度。现在学习的是第12页，共33页低能量超声食品检测技术的应用l3、可以进行面粉的品质检测工作。现代化面粉加工工业要求进行实时监控，对不同用途面粉进行研
10、究，面团中的超声波传播声速及其衰减程度相关，将所得测试数据进行分析之后，就可以得出面团品质的分析数据，可以进行面粉的品质研究。现在学习的是第13页，共33页低能量超声食品检测技术的应用l4、可以进行果蔬产品的品质检测工作。由于果蔬产品的含水量很高，所以髓存和运输都有难度，一定频率的超声波会在果蔬的细胞之间的空穴形成特殊的谐振效应，可以通过果蔬的杨氏模量及其共振频率检测果蔬的硬度、成熟度等，并且为果蔬产品的存储和运输提供依据。另外，在贮藏过程中果蔬内部组织结构和水分含量在发生变化，糖分或其它成分也在变化，可通过检测水分、糖分等成分的含量检测它们的成熟度。现在学习的是第14页，共33页生物学发光检
11、测技术在食品检测技术中的应用l生物学发光检测技术是利用细菌细胞裂解时会释放出三磷酸腺苷(ATP)的原理，使用荧光虫素和荧光虫素酶可使之释放出能量产生磷光，光的强度就代表ATP的量，根据监测光的强弱，从而推断出菌落总数现在学习的是第15页，共33页生物学发光检测技术在食品检测技术中的应用l 美国的NHD公司推出ATP食品细菌快速检测系统的Profile-13560是通过底部有筛孔的比色杯将非细菌细胞和细菌细胞分离，在这种比色杯中，细菌细胞无法通过，之后用细菌细胞释放液裂解细菌细胞，根据检测释放出的ATP量，这就是细菌的ATP量，从而得出细菌的总数。现在学习的是第16页，共33页高温水萃取方法l采
12、用高温水萃取方法对食品中农药残留、甲醛、亚硝酸盐、抗生素等成分进行快速萃取，结合分光光度法、液相色谱等分析方法进行了上述成分的快速检测研究。结果表明，蔬菜中甲胺磷的萃取条件为pH-&0的磷酸缓冲溶液、萃取温度120。c、萃取时间2-3rain；腐竹中甲醛的萃取条件为o1mLH，P04溶液10mL、萃取温度120。C、萃取时间5min；肉制品中亚硝酸盐的萃取条件为5mL硼砂饱和溶液10mL、萃取温度120、萃取时间5min；饲料中四环素的萃取条件为pH=20的盐酸溶液、萃取温度J00。C、萃取时间4rain。与现有的蒸馏、振荡萃取、超声萃取等预处理方法比较，高温水萃取法具有萃取效率高、精密度好、
13、快速、简便和不使用有机溶剂的优点，可以满足实际样品快速检测的需要。现在学习的是第17页，共33页纳米金技术l纳米金(nanogold)即指金的微小颗粒其直径在1 1 0 0 n m 具有高电子密度介电特性和催化作用能与多种生物大分子结合且不影响其生物活性由氯金酸通过还原法可以方便地制备各种不同粒径的纳米金其颜色依直径大小而呈红色至紫色。现在学习的是第18页，共33页纳米金技术l1、作为显微镜示终物l利用纳米金的高电子密度能在电镜下清晰的分辨颗粒作为在透射电镜(TEM)扫描电镜(SEM)和荧光显微镜的示终物在电镜免疫化学和组织化学中得到了广泛应用现在学习的是第19页，共33页纳米金技术l2、应用
14、于均相溶胶颗粒免疫测定技术l均相溶胶颗粒免疫测定法是利用免疫学反应时金颗粒凝聚导致颜色减退的原理将纳米金与抗体结合建立微量凝集试验检测相应的抗原如间接血凝一样用肉眼可直接观察到凝集颗粒已成功地应用于P C G 的检测直接应用分光光度计进行定量分析。现在学习的是第20页，共33页纳米金技术l3、应用于流式细胞仪lBoehmer 等研究发现纳米金可以明显改变红色激光的散射角利用纳米金标记的羊抗鼠Ig 抗体应用于流式细胞术分析不同类型细胞的表面抗原结果纳米金标记的细胞在波长6 3 2 n m时90 度散射角可放大10 倍以上同时不影响细胞活性现在学习的是第21页，共33页纳米金技术l4、应用于斑点免
15、疫金银染色技术l斑点免疫金银染色法(Dot-IGS/IGSS)是将斑点ELISA与免疫纳米金结合起来的一种方法将蛋白质抗原直接点样在硝酸纤维膜上与特异性抗体反应后再滴加纳米金标记的第二抗体结果在抗原抗体反应处发生金颗粒聚集形成肉眼可见的红色斑点此称为斑点免疫金染色法。现在学习的是第22页，共33页表面增强拉曼光谱技术1、辣椒粉中罗丹明B的检测2、饮料中食用合成色素的检测(选取赤藓红为检测对象)3、蔬菜中有机磷农药的检测(选取对硫磷作为检测对象)4、养殖用水中孔雀石绿的检测现在学习的是第23页，共33页生物传感器l生物传感器(Biosensor)是以固定化生物活性物质(酶、蛋白质、抗体或抗原、激
16、素或受体、微生物、DNA及生物膜等)作敏感元件与适当物理或化学换能器有机结合而组成一种先进分析检测装置。现在学习的是第24页，共33页生物传感器l1在食品品质指标分析中应用lWang等研究辣根过氧化物酶在有机相介质中活性及酶电极对不同有机过氧化物催化活性，并应用于测定植物油过氧化值。Marmino等利用Eastman AQ聚合物膜包埋辣根过氧化物酶，以二茂铁为电子介体，作为酶活性中心与电极表面电子介体，构建有机相酶电极，用于快速流动注射分析检测未经处理食用油样品中过氧化物(过氧化值)测定。现在学习的是第25页，共33页生物传感器l2、在农产品、食品中农药、兽药残留快速检测中应用l生物传感器研制
17、开发使在检测农药、兽药残留测定方法上更多样化，缩短响应时间，提高灵敏度和半自动化程度。朱玲等研制胆碱氧化酶生物传感器，检测氨基甲酸酯类农药西维因，其线性范围为25-80岭L，最低检测限为15ug/L现在学习的是第26页，共33页生物传感器l2、在农产品、食品中农药、兽药残留快速检测中应用l生物传感器研制开发使在检测农药、兽药残留测定方法上更多样化，缩短响应时间，提高灵敏度和半自动化程度。朱玲等研制胆碱氧化酶生物传感器，检测氨基甲酸酯类农药西维因，其线性范围为25-80岭L，最低检测限为15ug/L现在学习的是第27页，共33页生物传感器l3、在食品添加剂快速检测中应用l生物传感器可用于亚硝酸盐
18、、对羟基苯甲酸酯、二氧化硫等食品防腐剂，磷酸、乳酸等酸味剂，L_谷氨酸鲜味剂及色素、抗氧化剂等测定。现在学习的是第28页，共33页荧光分析l荧光分析结合免疫学技术和PCR 技术在沙门氏菌、大肠杆菌、李斯特氏菌等食源性病原菌快速检测中的应用进行介绍，以推广食品安全快速检测方法的研究和应用。现在学习的是第29页，共33页酶联免疫技术l该法是一种以酶作为标记物的免疫分析方法，也是目前应用最为广泛的免疫分析方法之一。将酶标记于抗原或抗体上，与底物作用后呈现颜色，通过肉眼或仪器进行辨识。此方法具有操作简便、单次检测样品量大且快速灵敏的优点，可直接检测尿液、血样、饲料等多种样品。国内外均已建立了许多兽药的
19、酶联免疫法，如青霉素、氯霉素、磺胺、盐酸克伦特罗等，但缺乏商品化的产品。现在学习的是第30页，共33页免疫层析法l 载体纤维的毛细管作用将被测物沿着膜表面运送至检测区与标记物结合显色，进而实现目标物的检出，可检出抗生素、生物毒素、重金属、农药兽药残留等。胶体金试纸是这类检测方法中应用最广泛的。常见的胶体金试纸结构包括底板、样品垫、吸水纸、硝酸纤维素膜、胶体金垫、检测线和控制线。样品中抗体随着层析方向运动，和特异性抗原结合后，再和带有颜色的特异抗原反应时，就形成了带有颜色的测试线（三明治结构），若没有抗原则没有颜色。国内如上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心生产的免疫学现场快速测试试
20、纸盒。现在学习的是第31页，共33页色谱、质谱技术l色谱技术实质上是一种物理化学分离方法，即当两相作相对运动时，由于不同的物质在两相(固定相和流动相)中具有不同的分配系数(或吸附系数)，通过不断分配(即组分在两相之间进行反复多次的溶解、挥发或吸附、脱附过程)从而达到各物质被分离的目的。色谱类型很多。目前，色谱技术已经发展成熟，具有检测灵敏度高、分离效能高、选择性高、检出限低、样品用量少、方便快捷等优点，己被广泛应用于食品工业的安全检测中。色谱中常用的方法有气相色谱法、高效液相色谱法、薄层色谱法和免疫亲和色谱法。现在学习的是第32页，共33页光谱分析法光谱分析法l光谱分析法是利用物质发射、吸收电磁辐射以及物质与电磁辐射的相互作用而建立起来的一种方法，通过辐射能与物质组成和结构之间的内在联系及表现式，以光谱测量为基础形成的方法。光谱分析是一种无损的快速检测技术，分析成本低。其中，拉曼光谱、红外光谱、近红外光谱以及荧光光谱等在食品安全检测中应用较为广泛。现在学习的是第33页，共33页