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1、关于免疫学关于免疫学检测检测免疫学免疫学预预防防现在学习的是第1页，共25页主要内容主要内容l第一节 免疫细胞及其亚群的检测（自学）l第二节 免疫分子的检测（重点）l一、抗原、抗体的检测l（一）抗原-抗体反应的特点（自学）l（二）抗原-抗体反应的影响因素（自学）l（三）抗原-抗体反应的类型和检测方法（重点）l1.沉淀反应（自学）l2.凝集反应（自学）l3.补体参与的抗原抗体反应（自学）l4.免疫标记技术（重点）l5.蛋白芯片技术（自学）l二、细胞因子的检测（自学）l第三节 免疫学检测的临床应用现在学习的是第2页，共25页第二节第二节 免疫分子的检测免疫分子的检测n（三）抗原抗体反应的类型和检测
2、方法（三）抗原抗体反应的类型和检测方法n4.免疫标记技术免疫标记技术（1）免疫荧光技术）免疫荧光技术（3）放射免疫测定法）放射免疫测定法（2）酶免疫测定法）酶免疫测定法.现在学习的是第3页，共25页 Ag-Ab+标记技术标记技术。用以检测用以检测Ag或或Ab的一种试验方法。的一种试验方法。标记：标记：标记：标记：荧光素、酶、放射性同位素等。标记后的荧光素、酶、放射性同位素等。标记后的Ag或或Ab仍仍 有有原有的生物学活性。原有的生物学活性。特点：特点：特点：特点：敏感性高、特异性强、应用范围广，可定性、定量、定位。敏感性高、特异性强、应用范围广，可定性、定量、定位。4、免疫标记技术、免疫标记技
3、术免疫荧光技术免疫荧光技术免疫酶测定法免疫酶测定法 放射免疫测定法放射免疫测定法发光免疫分析发光免疫分析免疫胶体金技术免疫胶体金技术免疫印迹技术免疫印迹技术现在学习的是第4页，共25页Ag荧光素荧光素Ag放射性同位素放射性同位素酶酶荧光显微镜荧光显微镜酶标检测仪酶标检测仪射线测量仪射线测量仪化学发光物、金属颗粒等化学发光物、金属颗粒等用用荧光素荧光素、放射性放射性同位素同位素、酶酶、金属金属颗粒颗粒及及化学化学（或（或生物生物）发光剂发光剂等等作作为追踪物为追踪物，标记抗标记抗体体或或抗原抗原进行的抗进行的抗原抗体反应原抗体反应n免疫标记技术免疫标记技术现在学习的是第5页，共25页Ag硝酸纤维
4、素膜硝酸纤维素膜和和醋酸纤维素膜醋酸纤维素膜利用利用吸附载体作为固吸附载体作为固相相进行抗原抗体反应进行抗原抗体反应吸附载体吸附载体聚苯乙烯聚苯乙烯微量反应板微量反应板（酶标板）（酶标板）现在学习的是第6页，共25页Ag聚苯乙烯聚苯乙烯微量反应板微量反应板（酶标板）（酶标板）封阻封阻/封闭（封闭（blockblock）包被（包被（coatcoat）AgAg现在学习的是第7页，共25页荧光素：荧光素：异硫氰酸荧光素（异硫氰酸荧光素（FITC）-黄绿色荧光黄绿色荧光 四乙基罗丹明（四乙基罗丹明（RB200）-橙色荧光橙色荧光四甲基异硫氰酸罗丹明（四甲基异硫氰酸罗丹明（TMRITC）-橙红色橙红色现
5、在学习的是第8页，共25页待检标本（固定在玻片上）待检标本（固定在玻片上）+已知荧光抗体已知荧光抗体洗去游离的荧光洗去游离的荧光Ab 干燥后，荧光显微镜下观察。干燥后，荧光显微镜下观察。用途：病毒感染的细胞、携带某种特异性用途：病毒感染的细胞、携带某种特异性Ag的细胞的检测。的细胞的检测。a、直接荧光法、直接荧光法问题思考：问题思考：直接法会给我们的检测工作带来什么不方面直接法会给我们的检测工作带来什么不方面？检测多种检测多种Ag需制备多种相应的荧光抗体需制备多种相应的荧光抗体标记。标记。现在学习的是第9页，共25页用来检测标本中未知的用来检测标本中未知的Ag。检测检测Ag。未标记。未标记Ab
6、+待检待检Ag（未知）（未知）（冲洗）（冲洗）+荧光标荧光标 记抗记抗Ab冲洗、干燥、荧光显微镜下观察。冲洗、干燥、荧光显微镜下观察。b、间接荧光法、间接荧光法优点：敏感性高，制备一种荧光标记抗优点：敏感性高，制备一种荧光标记抗Ab即可对多种即可对多种Ab-Ab系统进行系统进行检测。检测。缺点：易出现非特异性荧光。缺点：易出现非特异性荧光。现在学习的是第10页，共25页直接酶标法直接酶标法间接酶标法间接酶标法辣根过氧化物酶（辣根过氧化物酶（HRP）碱性磷酸酶碱性磷酸酶抗抗体、二抗酶联免疫吸附试验（ELISA）现在学习的是第11页，共25页双抗体夹心法双抗体夹心法用已知抗体检测未知抗原用已知抗体
7、检测未知抗原用已知抗体检测未知抗原用已知抗体检测未知抗原 现在学习的是第12页，共25页间接法间接法用已知抗原检测未知抗体用已知抗原检测未知抗体用已知抗原检测未知抗体用已知抗原检测未知抗体 现在学习的是第13页，共25页“免疫标记技术免疫标记技术”小结小结荧光标荧光标记法记法酶联免疫酶联免疫吸附试验吸附试验直直 接接荧光法荧光法间间 接接荧光法荧光法夹心法夹心法间接法间接法已知抗体已知抗体包被于固相载体，包被于固相载体，加加待测抗原待测抗原，再加，再加酶标酶标抗体抗体，显色；反之亦然，显色；反之亦然（先加已知抗原）（先加已知抗原）标记抗原或标记抗原或者者一抗一抗抗原抗原包被于固相载体，包被于固
8、相载体，加加酶标一抗酶标一抗，再加，再加酶标酶标二抗二抗，显色，显色标记标记二抗二抗现在学习的是第14页，共25页课堂测试课堂测试n1、下列哪项不是免疫标记技术的特点、下列哪项不是免疫标记技术的特点_nA、提高了反应的灵敏度、提高了反应的灵敏度 B、反应的特异性更强、反应的特异性更强nC、能进行定量检测、能进行定量检测 D、能进行定性检测、能进行定性检测nE、具有快速的优点、具有快速的优点n2、下列免疫学测定方法灵敏度最高的是、下列免疫学测定方法灵敏度最高的是_nA、沉淀反应、沉淀反应 B、凝集反应、凝集反应 C、ELISAnD、放射免疫测定、放射免疫测定 E、补体结合试验、补体结合试验n3、
9、免疫荧光抗体技术间接法是将荧光素标记在、免疫荧光抗体技术间接法是将荧光素标记在_nA、被检抗原上被检抗原上 B、已知抗体上已知抗体上nC、抗抗Ig抗体上抗体上 D、AgAb复合物上复合物上nE、已知抗原上已知抗原上现在学习的是第15页，共25页n4、ELISA的双抗体夹心法，固相载体的标记物是的双抗体夹心法，固相载体的标记物是_nA、待检抗原、待检抗原 B、已知抗原、已知抗原 C、已知抗体、已知抗体nD、酶标抗体、酶标抗体 E、酶标抗原、酶标抗原n5、检测可溶性抗原可以用、检测可溶性抗原可以用_nA、直接凝集反应、直接凝集反应 B、酶联免疫吸附实验、酶联免疫吸附实验nC、放射性免疫分析法、放射
10、性免疫分析法 D、直接荧光标记、直接荧光标记n6、间接标记技术一般主要用于检测、间接标记技术一般主要用于检测_nA、未知抗原、未知抗原 B、未知抗体、未知抗体nC、两者都可以、两者都可以现在学习的是第16页，共25页第二十四章第二十四章 免疫学防治免疫学防治l第一第一节节 免疫免疫预预防（重点）防（重点）l一、疫苗（重点）一、疫苗（重点）l二、疫苗的基本要求（自学）二、疫苗的基本要求（自学）l三、三、计计划免疫和划免疫和预预防接种注意事防接种注意事项项（了解）（了解）l第二第二节节 免疫治免疫治疗疗（自学）（自学）现在学习的是第17页，共25页老问老问题思题思考考n第一次患严重疾病而病愈，第一
11、次患严重疾病而病愈，第二次第二次遭受同一严重疾病，患病结果会怎样？怎么解释患病结果会怎样？怎么解释？现在学习的是第18页，共25页现在学习的是第19页，共25页初次抗原刺激初次抗原刺激再次抗原刺激再次抗原刺激时间（天）时间（天）现在学习的是第20页，共25页人工主动免疫和人工被动免疫的特点人工主动免疫和人工被动免疫的特点人工主动免疫人工主动免疫 人工被动免疫人工被动免疫输入物质输入物质抗原抗原抗体等抗体等免疫力出现免疫力出现时间时间慢（慢（2-32-3周）周）快（输注即生效）快（输注即生效）免疫力维免疫力维持时间持时间数月至数年数月至数年2-32-3周周主要用途主要用途预防预防治疗或紧急预防治
12、疗或紧急预防接种次数接种次数1 1到到3 3次次1 1次次现在学习的是第21页，共25页是是给机体输入给机体输入抗原性物质抗原性物质，剌激机体产生特异性免，剌激机体产生特异性免疫力疫力一、疫苗 1.灭活疫苗灭活疫苗/死疫苗死疫苗 2.减毒活疫苗减毒活疫苗 3.类毒素类毒素 4.新型疫苗新型疫苗现在学习的是第22页，共25页三、计划免疫和预防接种注意事项有计划地使用有计划地使用生物制品（主要生物制品（主要是疫苗）进行预是疫苗）进行预防接种，提高人防接种，提高人群的免疫水平群的免疫水平 现在学习的是第23页，共25页我国推行的儿童基础免疫程序我国推行的儿童基础免疫程序现在学习的是第24页，共25页感感谢谢大大家家观观看看2022/9/26现在学习的是第25页，共25页