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1、关于噬菌体侵染细菌的实验现在学习的是第1页，共29页噬菌体侵染细菌实验噬菌体侵染细菌实验n你记得本实验的基本操作吗？考纲要求：两个经典实验的设计思路和结论分析考情回顾：2010、2011年江苏卷、上海卷现在学习的是第2页，共29页n赫尔希通过T2噬菌体侵染细菌的实验证明DNA是遗传物质，实验包括4个步骤：n培养噬菌体(侵染细菌)，n35S和32P标记噬菌体，n放射性检测，n离心分离。n实验步骤的先后顺序为nA B n C DC现在学习的是第3页，共29页深度解读噬菌体侵染大肠杆菌的实验n1、实验者：n2、实验方法：放射性同位素标记法：用放射性同位素（如14C）掺入正常的分子中，使该分子带有放射
2、性，然后用放射自显影检测分子的分布。拓展：四本书中使用这种方法的有哪些知识？现在学习的是第4页，共29页蛋白质蛋白质外壳外壳DNA3、实验材料：噬菌体选择是关键现在学习的是第5页，共29页n解读实验材料T2噬菌体：n（1）结构：有何特点？n所用同位素究竟标记的是这两种物质的什么位置？请你写出氨基酸结构通式；画出脱氧核苷酸的结构简图；并标出同位素标记的部位。（2）生活方式：什么特点？怎样培养？（3）增殖特点：虽无细胞结构，但为生物的原因。看书P44T2T2T2T2噬菌体中60%是蛋白质,40%是DNA.现在学习的是第6页，共29页解读大肠杆菌n1、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？n2、噬
3、菌体若想向大肠杆菌中注入物质，需要先n溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？现在学习的是第7页，共29页解读大肠杆菌n1、为什么不同的噬菌体会侵染不同的大肠杆菌？n2、噬菌体若想向大肠杆菌中注入物质，需要先n溶解其什么结构？该结构主要成分是什么？细胞表面的特异性受体决定。细胞壁；肽聚糖现在学习的是第8页，共29页4、实验设计思路-不同于体外转化实验n巧妙构思：n噬菌体只有DNA和蛋白质两种成分，n没有其它物质的干扰。nS是蛋白质特有元素，nP是DNA特有元素，n用不同放射性同位素分别标记蛋白质和DNA，n直接地、单独地来观察它们的作用现在学习的是第9页，共29页n在“噬菌体侵染细菌”的实验中，
4、如果放射性同位素主要分布在离心管的沉淀物中，则获得侵染噬菌体的方法是()nA用含35S的培养基直接培养噬菌体nB用含32P的培养基直接培养噬菌体nC用含35S的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体nD用含32P的培养基培养细菌，再用此细菌培养噬菌体D现在学习的是第10页，共29页5、实验过程（如何标记噬菌体？）如何标记噬菌体？）n第一步：标记细菌（如何标记？）如何标记？）35S培养基+细菌35S标记的细菌32P培养基+细菌32P标记的细菌第二步：标记噬菌体（如何标记？）（如何标记？）噬菌体+35S标记的细菌35S标记的噬菌体噬菌体+32P标记的细菌32P标记的噬菌体现在学习的是第11页，共29
5、页n第三步：标记的噬菌体侵染未标记的细菌n仔细研读课本实验有关内容n友情提示：n今年高考选修三试题基本都是课本n原话填空，所以看书必须仔细现在学习的是第12页，共29页第四步：放射性检测-搅拌和离心短时间保温、搅拌、离心目的-现在学习的是第13页，共29页第四步：放射性检测解读上清液：解读沉淀物：现在学习的是第14页，共29页第四步：放射性检测解读上清液：上清液中含未侵染的T2噬菌体和侵染后的噬菌体外壳解读沉淀物：沉淀物中含有被感染的细菌现在学习的是第15页，共29页 该实验中时间应怎样把握？过长过短放射性会集中于上清液还是沉淀？为什么？时间过长因为超过噬菌体的裂解周期，放射性集中于上清液中，
6、过短来不及侵染细菌，从而也集中于上清液中。现在学习的是第16页，共29页n解读放射性检测结果：n35S标记后上清液放射性高，沉淀物放射性很低（为什么沉淀物有低放射性？）n32P标记后上清液放射性很低（为什么上清液有低放射性？），沉淀物放射性很高。现在学习的是第17页，共29页解读32P标记后上清液有低放射性原因n（1）保温时间过短，有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌细胞内，经离心分布于上清液中，上清液中出现放射性。n（2）噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离，这一段保温时间过长，噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代，经离心分布于上清液，也会使上清液有放射性。现在学习的是第18页，共29页35S标
7、记后为什么沉淀物有低放射性？n由于搅拌不充分，有少量含35S的噬菌体吸附在细菌表面，随细菌离心到沉淀物中。现在学习的是第19页，共29页实验分析：n结果分析：n细菌体内无35S，体外有35Sn细菌体内有32P，体外无32P35S标记的噬菌体外壳并没有进入细胞内部，而32P标记的噬菌体DNA进入了细菌内部实验结论：DNA是遗传物质。你认为该实验还能证明什么？DNA 分子具有相对稳定性；DNA能自我复制，保持前后代一定连续性；DNA能控制蛋白质的生物合成，但不能证明DNA分子产生可遗传的变异。现在学习的是第20页，共29页解读子代噬菌体的组成（课本44页）n噬菌体侵染细菌后，n合成子代噬菌体的外壳
8、的原料是？n而子代噬菌体的DNA来自？现在学习的是第21页，共29页注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：现在学习的是第22页，共29页注意标记对象是噬菌体还是细菌，标记对象不同，结果应不同：现在学习的是第23页，共29页3535S S标标记记的的蛋白质蛋白质3232P P标标记记的的DNADNA1 1、感染、感染2 2、搅拌、搅拌3 3、离心、离心蛋白质外壳蛋白质外壳（强放射性）（强放射性）细菌（强放射性）细菌（强放射性）细菌细菌蛋白质外蛋白质外壳壳现在学习的是第24页，共29页噬菌体（病毒）、大肠杆菌（原核生物）噬菌体（病毒）、大肠杆菌（原核生物）1 1、实验材料：、实验
9、材料：2 2、实验思路：、实验思路：4 4、实验结果：、实验结果：5 5、实验分析：、实验分析：总结蔡斯和赫尔希的实验总结蔡斯和赫尔希的实验设法把设法把DNADNA与蛋白质分开，单独与蛋白质分开，单独地直接去观察它们的作用。地直接去观察它们的作用。用放射性同位素用放射性同位素3535S S和和3232P P分别标记噬菌体分别标记噬菌体的蛋白质外壳和的蛋白质外壳和DNADNA内核，后侵染细菌内核，后侵染细菌3 3、实验操作：、实验操作：在新噬菌体只能检测到在新噬菌体只能检测到3232P P，检，检测不到测不到3535S S在亲子代间具备连续性的是在亲子代间具备连续性的是DNADNA6 6、实验结
10、论：、实验结论：DNADNA是遗传物质是遗传物质现在学习的是第25页，共29页试比较肺炎双球菌转化实验和噬菌体侵染细菌的实验相同点：1、实验思路-均使DNA和蛋白质分开，单独处理，观察它们各自的作用，但两类实验中分开方式不同。2、实验原则-都遵循了对照原则。3、都证明了DNA是遗传物质。不同点：1、方法不同:艾弗里-分离化合物，分别与R型菌混合培养同位素标记法-分别标记DNA和蛋白质的特殊元素2、结论不同：艾弗里-DNA是遗传物质，蛋白质等不是遗传物质同位素标记法-DNA是遗传物质现在学习的是第26页，共29页(2010南京模拟)有人试图通过实验来了解H5N1禽流感病毒侵入家禽的一些过程，设计实验如图：一段时间后，检测子代H5N1病毒的放射性及S、P元素，下表对结果的预测中，最可能发生的是()D现在学习的是第28页，共29页感感谢谢大大家家观观看看现在学习的是第29页，共29页