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1、第六章吸光光度法本讲稿第一页，共十九页3.吸收曲线吸收曲线 1)最大吸收波长最大吸收波长max：吸光度最大处的波长吸光度最大处的波长.2)同一物质浓度增加时同一物质浓度增加时,吸收曲线形状相同吸收曲线形状相同,max不变，吸光不变，吸光度增大度增大.A C增增大大什么是吸收曲线？什么是吸收曲线？本讲稿第二页，共十九页4.光吸收定律光吸收定律c：mol/L 摩尔吸光系数摩尔吸光系数 :L mol 1 cm-1c：g/L 吸光系数吸光系数 K:L g 1 cm-1本讲稿第三页，共十九页5.摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度摩尔吸光系数摩尔吸光系数:其大小反应了吸光物质对光的吸收能
2、其大小反应了吸光物质对光的吸收能力力,也反应了光度法测定吸光物质的灵敏度也反应了光度法测定吸光物质的灵敏度.同一吸光物质的同一吸光物质的 只与波长有关只与波长有关,max 处的处的 最大最大,即在即在max处测定的灵敏度最高处测定的灵敏度最高.105低灵敏度低灵敏度中等灵敏度中等灵敏度高灵敏度高灵敏度本讲稿第四页，共十九页桑德尔灵敏度桑德尔灵敏度S 当仪器的检测极限当仪器的检测极限 A=0.001时，单位截面积光程内所能检时，单位截面积光程内所能检测出来的吸光物质的最低含量，单位为测出来的吸光物质的最低含量，单位为gcm-2.S越小越小,测定的灵敏度越高测定的灵敏度越高.S与与 的转化的转化:
3、注意注意:不要换算单位不要换算单位本讲稿第五页，共十九页6.目视比色法比较的是透过光强度目视比色法比较的是透过光强度 吸光光度法比较的是吸收光的强度吸光光度法比较的是吸收光的强度7.光度计的基本部件及其作用光度计的基本部件及其作用 光源光源单色器单色器样品池样品池检测器检测器 显示器显示器氢灯氢灯、氘灯氘灯-紫外紫外;钨灯钨灯-可见可见 棱镜棱镜(玻璃、石英玻璃、石英)、光栅、光栅玻璃玻璃(可见可见)，石英，石英(紫外、可见紫外、可见)光电倍增管。将光信号转换为电信号，并放光电倍增管。将光信号转换为电信号，并放大大.本讲稿第六页，共十九页6.2 分光光度法的设计分光光度法的设计2.吸光度的读数
4、范围吸光度的读数范围:0.20.83.参比溶液的作用参比溶液的作用:用于调节仪器零点，用于调节仪器零点，扣除非待测组扣除非待测组 分的吸收分的吸收.参比溶液参比溶液 的选择的选择:P3181.影响显色反应的因素影响显色反应的因素P321:（了解）（了解）本讲稿第七页，共十九页例题：例题：分光光度法测定纯钴盐中微量分光光度法测定纯钴盐中微量Mn，方法是加，方法是加入无色氧化剂将入无色氧化剂将 Mn2+氧化为氧化为MnO4-，测定中应选下列，测定中应选下列哪种溶液作参比：哪种溶液作参比：()(A)试剂空白试剂空白 (B)不加氧化剂的样品空白不加氧化剂的样品空白(C)蒸馏水空白蒸馏水空白 （D）加氧
5、化剂的样品空白）加氧化剂的样品空白本讲稿第八页，共十九页配制系列待测物标准溶液配制系列待测物标准溶液:C1、C2Cn相同条件下测吸光度相同条件下测吸光度:A1、A2An AxCx 先制作工作曲线，然后查出待测组分含量先制作工作曲线，然后查出待测组分含量 4.定量方法定量方法:工作曲线法工作曲线法 5.测定波长的选择测定波长的选择 P323标准曲线不过原点的原因标准曲线不过原点的原因:P229AC0本讲稿第九页，共十九页6.3 光度法的误差光度法的误差1.对比尔定律的偏离对比尔定律的偏离原因原因:P3242.仪器的测量误差仪器的测量误差即即T的读数误差与不同的的读数误差与不同的T值有关。值有关。
6、T为透光率的读数误差为透光率的读数误差,一般为一般为0.01.T=36.8%,A=0.434 时误差最小时误差最小.T:15%65%，A:0.20.8.(Er4%)课后习题课后习题本讲稿第十页，共十九页6.4其他光度法及其应用其他光度法及其应用1.示差光度法示差光度法(高浓度组分的测定高浓度组分的测定)参比参比:以浓度为以浓度为 Cs 的标准溶液为参比的标准溶液为参比.(CsCx)ACCxA定量方法定量方法-工作曲线法工作曲线法本讲稿第十一页，共十九页示差法可以减小误差的原因示差法可以减小误差的原因:改变了改变了A(T)的读数范围的读数范围,使其在使其在0.20.8范围内范围内.以标准溶液作参
7、比，即标准溶液的以标准溶液作参比，即标准溶液的T=100%,对被测溶液对被测溶液,在示差法中透光率的扩大倍数与参比相同在示差法中透光率的扩大倍数与参比相同.-有关计算题的依据有关计算题的依据课后习题课后习题 例题例题:一含一含KMnO4 8.57ug/L的溶液的溶液,在波长在波长525nm处处,以水以水做参比测定做参比测定T=21.6%.以上述溶液为参比以上述溶液为参比,测定另一浓度较测定另一浓度较大大KMnO4溶液时溶液时,测定透光率为测定透光率为25.7%,计算计算KMnO4溶溶液的浓度液的浓度.本讲稿第十二页，共十九页2.弱酸弱碱离解常数的测定弱酸弱碱离解常数的测定说明说明:AHR-酸性
8、溶液中全部以酸性溶液中全部以HR存在时的吸光度存在时的吸光度.AR-碱性溶液中全部以碱性溶液中全部以R存在时的吸光度存在时的吸光度.A-某某PH下下HR+R的吸光度的吸光度.且三个吸光度的测定波长相同且三个吸光度的测定波长相同.R RA HR HR本讲稿第十三页，共十九页3.络和物组成的测定络和物组成的测定1)饱和法饱和法(摩尔比法摩尔比法)2)连续变化法连续变化法(等摩尔系列法等摩尔系列法)ACR/CMn00.51.0ACM/C本讲稿第十四页，共十九页条件稳定常数的测定条件稳定常数的测定0.501.0ACM/CA由于络合物离解引起由于络合物离解引起A A离解度离解度:MR =R +M总浓度总
9、浓度 C平衡浓度平衡浓度 C(1-a)CaCa将将代入上式即可求出络合物的代入上式即可求出络合物的条件稳定常数条件稳定常数.本讲稿第十五页，共十九页例题例题1 某显色络合物某显色络合物MR2，M的总浓度为的总浓度为 5.010-5mol/L，R的总浓度为的总浓度为2.010-5mol/L，一定波长，一定波长下用下用1厘米比色皿测得透射比为厘米比色皿测得透射比为63（4104 Lmol-1cm-1)，求该络合物的稳定常数。，求该络合物的稳定常数。本讲稿第十六页，共十九页例题例题2以邻二氮菲以邻二氮菲R作显色剂用光度法测定作显色剂用光度法测定Fe,显色反应为显色反应为:Fe2+3R=FeR3 lg
10、K(FeR3)=21.31.如过量显色剂总浓度为如过量显色剂总浓度为R =5.010-5 mol/L,问在问在PH=3.0时未配位的时未配位的Fe2+占多大比例占多大比例(%)?(PH=3.0时时,lg R(H)=1.9)2.称取称取0.5000克试样克试样,制成制成100ml试液试液,从中移取从中移取10.00ml显色后稀释为显色后稀释为50ml,用用1.0cm比色皿比色皿,在在510nm处测定透光率处测定透光率T=60.0%.求试样中铁的质量求试样中铁的质量分数分数.510nm处的处的 =1.110 4 Lmol-1 cm-1 Ar(Fe)=55.85.本讲稿第十七页，共十九页解解1.2.略略本讲稿第十八页，共十九页例题例题 简述滴定分析法，重量分析法，分光光度法的主要误差来源。本讲稿第十九页，共十九页