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1、土壤中蛔虫卵的检查及活力测定法第1页，本讲稿共24页检验土壤蛔虫卵的原理，是先用碱性溶液和已经处理过的土壤样品充分混合，分离蛔虫卵，继用比重较蛔虫卵比重大的溶液为漂浮液，使蛔虫卵漂浮在溶液的表面，从而收集检验之；或加入清水，因蛔虫卵的比重大于水的比重，使蛔虫卵沉在水底，从中吸取蛔虫卵检验之。所用方法为改良饱和硝酸钠漂浮监察法。第2页，本讲稿共24页改良饱和硝酸钠漂浮法(1)取回土样，剔除菜叶、树皮等大杂物，压碎土样中的大颗粒；(2)过筛 先后用孔径3mm的铜筛和孔径为2mm的铜筛过筛，收集过筛后的土样；(3)取2支50毫升大离心管，各放入过筛后的土样10g，加5%氢氧化钠溶液至40或45ml刻
2、度线；第3页，本讲稿共24页改良饱和硝酸钠漂浮法(4)充分混合，离心，每分钟2,000转，离4分钟；(5)倾去上部的氢氧化钠（即弃去上部碱性溶液）；(6)加入饱和硝酸钠溶液搅拌混匀，每分钟2000转，离心4分钟；(7)离心后，再加饱和硝酸钠溶液满至管口，覆上18mm18mm盖玻片；(8)静置15min后，取下盖玻片置于载玻片上镜检。第4页，本讲稿共24页第5页，本讲稿共24页受精猪蛔虫卵受精猪蛔虫卵大小：大小：50508740874060m60m形状：椭圆形或圆形，卵壳厚，外包形状：椭圆形或圆形，卵壳厚，外包有粗糙凹凸不平的蛋白膜，内含尚未有粗糙凹凸不平的蛋白膜，内含尚未分裂呈颗粒的卵细胞。分
3、裂呈颗粒的卵细胞。人蛔虫卵人蛔虫卵大小：大小：45457535753550m(50m(平均平均60m60m）形状：短椭圆形或近圆形，卵壳厚，呈双线层，其外形状：短椭圆形或近圆形，卵壳厚，呈双线层，其外包有一层厚而呈乳头状突起的蛋白膜包有一层厚而呈乳头状突起的蛋白膜土壤中的动物蛔虫卵与人蛔虫卵土壤中的动物蛔虫卵与人蛔虫卵第6页，本讲稿共24页牛羊蛔虫卵牛羊蛔虫卵大小：大小：69699560956077m77m形状：近球形，外有似蜂窝状蛋白膜。形状：近球形，外有似蜂窝状蛋白膜。人蛔虫卵人蛔虫卵第7页，本讲稿共24页犬弓蛔虫卵犬弓蛔虫卵大小：大小：7590m7590m形状：近球形，也常有呈卵形，有粗
4、糙形状：近球形，也常有呈卵形，有粗糙凹凸不平卵壳，卵壳内充满黑褐色到黑凹凸不平卵壳，卵壳内充满黑褐色到黑色的尚未分裂，呈颗粒状内含物。色的尚未分裂，呈颗粒状内含物。人蛔虫卵人蛔虫卵第8页，本讲稿共24页猫弓蛔虫卵猫弓蛔虫卵大小：大小：6575m6575m形状：同犬弓蛔虫卵。形状：同犬弓蛔虫卵。人蛔虫卵人蛔虫卵第9页，本讲稿共24页蛔虫卵活力测定方法蛔虫卵活力测定方法蛔虫卵活力测定方法蛔虫卵活力测定方法第10页，本讲稿共24页含一个卵细胞活含一个卵细胞活受精蛔虫卵，外受精蛔虫卵，外包有乳头状突起包有乳头状突起的蛋白膜的蛋白膜脱蛋白膜活受脱蛋白膜活受精蛔虫卵精蛔虫卵外包蛋白膜的外包蛋白膜的死受精蛔
5、虫卵，死受精蛔虫卵，卵细胞移向一卵细胞移向一端端脱蛋白膜的死脱蛋白膜的死受精蛔虫卵，受精蛔虫卵，卵细胞移向一端卵细胞移向一端 一、直接镜检法（死活蛔虫卵的形态比较）一、直接镜检法（死活蛔虫卵的形态比较）第11页，本讲稿共24页空泡化死受精蛔虫卵空泡化死受精蛔虫卵外包蛋白膜死受精蛔虫卵，卵内外包蛋白膜死受精蛔虫卵，卵内 脂肪变性，细胞质形成空泡脂肪变性，细胞质形成空泡第12页，本讲稿共24页含幼虫的活受精蛔虫卵含幼虫的活受精蛔虫卵卵壳内幼虫变形的死受精蛔虫卵卵壳内幼虫变形的死受精蛔虫卵第13页，本讲稿共24页人活蛔虫卵形态人活蛔虫卵形态 含一个卵细含一个卵细胞活受精蛔胞活受精蛔虫卵，外包虫卵，外
6、包有乳头状突有乳头状突起的蛋白膜起的蛋白膜 脱蛋白膜脱蛋白膜活受精蛔活受精蛔虫卵虫卵 含含2个卵个卵细胞活受细胞活受精蛔虫卵精蛔虫卵 含含16个卵个卵细胞活受细胞活受精蛔虫卵精蛔虫卵 第14页，本讲稿共24页未受精蛔未受精蛔虫卵外包虫卵外包锯齿状突锯齿状突起的蛋白起的蛋白膜膜 脱蛋白膜脱蛋白膜的未受精的未受精蛔虫卵蛔虫卵 含幼虫的含幼虫的活受精蛔活受精蛔虫卵虫卵 第15页，本讲稿共24页死蛔虫卵形态死蛔虫卵形态 外包蛋白外包蛋白膜的死受膜的死受精蛔虫卵，精蛔虫卵，卵细胞移卵细胞移向一端向一端 脱蛋白膜脱蛋白膜的死受精的死受精蛔虫卵，蛔虫卵，卵细胞移卵细胞移向一端向一端 桑椹期脱桑椹期脱蛋白膜死
7、蛋白膜死蛔虫卵蛔虫卵 死受精蛔死受精蛔虫卵，在虫卵，在卵细胞上卵细胞上部可见透部可见透明细胞质明细胞质 外包蛋白外包蛋白膜死受精膜死受精蛔虫卵，蛔虫卵，卵内脂肪卵内脂肪变性，细变性，细胞质形成胞质形成空泡空泡 第16页，本讲稿共24页死蛔虫卵形态死蛔虫卵形态 脱蛋白膜脱蛋白膜死受精蛔死受精蛔虫卵，在虫卵，在卵细胞上卵细胞上部形成空部形成空泡泡 卵细胞卵细胞皱缩死受皱缩死受精蛔虫卵精蛔虫卵 空泡化死空泡化死受精蛔虫受精蛔虫卵卵 卵细胞卵细胞崩解的死崩解的死受精蛔虫受精蛔虫卵卵 卵细胞崩卵细胞崩解的死受解的死受精蛔虫卵精蛔虫卵 第17页，本讲稿共24页死蛔虫卵形态死蛔虫卵形态卵细胞不卵细胞不规则裂
8、开规则裂开的死受精的死受精蛔虫卵蛔虫卵 卵胚变形卵胚变形的死受精的死受精蛔虫卵蛔虫卵 内含物变内含物变形死受精形死受精蛔虫卵蛔虫卵 卵壳内幼虫卵壳内幼虫变形的死受变形的死受精蛔虫卵精蛔虫卵 第18页，本讲稿共24页二、染色法鉴别蛔虫卵死活二、染色法鉴别蛔虫卵死活第19页，本讲稿共24页（一）原理（一）原理（一）原理（一）原理美蓝、伊红、硼砂染液（简称美蓝、伊红、硼砂染液（简称M.E.BM.E.B）溶于）溶于水呈碱性。水呈碱性。活虫卵可以还原碱性染料，降低着色力，活虫卵可以还原碱性染料，降低着色力，不易被染色。不易被染色。死虫卵不能还原碱性染料，容易着色。死虫卵不能还原碱性染料，容易着色。蛔虫卵
9、外层蛋白膜容易被着色，染色前需蛔虫卵外层蛋白膜容易被着色，染色前需脱去蛋白膜。脱去蛋白膜。第20页，本讲稿共24页（二）步骤（二）步骤1 1、脱蛋白膜、脱蛋白膜将收集的蛔虫卵加入将收集的蛔虫卵加入30%30%次氯酸钠，作用数分钟，并经次氯酸钠，作用数分钟，并经常振荡，再用蒸馏水洗常振荡，再用蒸馏水洗2 2次，即可脱掉蛋白膜。次，即可脱掉蛋白膜。第21页，本讲稿共24页2 2、染色镜检、染色镜检 吸取虫卵沉淀物一滴置于载玻片上，加吸取虫卵沉淀物一滴置于载玻片上，加M.E.BM.E.B染色染色液一滴，上覆盖玻片，静置液一滴，上覆盖玻片，静置3 35 5分钟后镜检。分钟后镜检。或者，吸取虫卵沉淀物或者，吸取虫卵沉淀物1 1滴放入小试管内，加入染滴放入小试管内，加入染色液染色液染3030分钟，再用蒸馏水洗分钟，再用蒸馏水洗2 23 3次，吸取沉淀物镜检。次，吸取沉淀物镜检。3 3、注意：、注意：M.E.B M.E.B的的PHPH值应在值应在1010左右，不宜太高；左右，不宜太高；脱蛋白膜后，应洗净次氯酸钠，否则影响碱性染料脱蛋白膜后，应洗净次氯酸钠，否则影响碱性染料的着色效果。的着色效果。第22页，本讲稿共24页图中箭头所指为死的蛔虫卵图中箭头所指为死的蛔虫卵第23页，本讲稿共24页第24页，本讲稿共24页