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1、基础课时案44基因工程的应用、安全性和生物 武器及蛋白质工程1(2014山东日照一模,35)我们日常吃的大米中铁含量极低,科研人员通过基因工程等技术,培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻,改良了稻米的营养品质。如图为培育转基因水稻过程示意图,请回答问题。(1)在上述工程中,铁结合蛋白基因称为_,获取该基因后常用_技术进行扩增。(2)构建重组Ti质粒时,通常要用同种限制酶分别切割_和_。将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用_处理农杆菌,使重组Ti质粒易于导入。(3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时,通过培养基2的筛选培养,可以获得_;培养基3与培养基2的区别是_。(4)检
2、测培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻_。解析本题中培育转基因水稻的目的是获得铁含量比普通大米高的大米,因此目的基因为铁结合蛋白基因,要大量获得一般采用PCR技术进行扩增。构建重组质粒要用同种限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒。将外植体培养成试管苗的过程要用到不同的培养基,各培养基最明显的差别在于所添加激素的比例不同。答案(1)目的基因PCR(2)含目的基因的DNA片段质粒CaCl2(3)含有重组质粒的愈伤组织生长素和细胞分裂素的浓度比例(4)种子中铁含量2(2014衡阳联考二)如图为转基因生物培养示意图。据图回答问题。(1)上图中A表示目的基因,研究人员需要用_酶获得它,还需
3、采用_技术对其进行扩增,然后将目的基因与质粒等载体组合形成了上图中的_(填字母)。(2)基因表达载体的构建是基因工程的核心,其中的_是RNA聚合酶识别和结合的部位。标记基因的作用是为了鉴别_。(3)将目的基因导入受体细胞的过程中,在过程中一般是采用_法,棉花受体细胞一般为体细胞,在过程中的受体细胞一般是_。(4)由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中,检测其体内是否出现药用蛋白,在分子水平上的检测方法是_。答案(1)限制性核酸内切PCRB(2)启动子受体细胞中是否含有目的基因(3)农杆菌转化受精卵(4)抗原抗体杂交3(2013吉林一中一模,40)继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后,膀胱生物反应器
4、的研究也取得了一定进展。最近,科学家培养出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中,请回答下列问题。(1)获得人的生长激素基因的方法有从基因文库中获取、_、_等。(2)在构建重组质粒的过程中,人的生长激素基因用_进行切割。人的生长激素基因之所以能“嫁接”到小鼠染色体的DNA上,原因是_,人的生长激素基因进入小鼠细胞内,且能维持稳定和表达的过程称为_。(3)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是_。进行基因转移时,通常要将外源基因转入_(细胞)中,原因是_,一般可采用_技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。但在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的_细胞中特
5、异表达。(4)若要一次获得多只相同的转基因小鼠,宜采用_技术,操作过程需要特别注意的问题是_。(5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠细胞的_转入_细胞中构成重组细胞,使其发展成与供体具有相同性状的个体,该技术称为_技术。解析(1)目的基因的获取一般有3种方法,即PCR技术扩增、人工合成、从基因文库中获取。(2)切割基因的酶是限制性核酸内切酶。基因和DNA都是两条链,具有相同的结构基础是其能重组的原因。(3)若受体细胞是动物细胞,一般选用显微注射法将目的基因导入受体细胞。常用的受体细胞是受精卵,因其较易表现出全能性。检测外源基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术。膀胱生物反应器要用
6、膀胱上皮细胞作为受体细胞。(4)要获得多只基因型相同的转基因小鼠,常用胚胎分割技术,操作时要特别注意将内细胞团均等分割,以免造成胚胎发育不均或难以发育。(5)后代要长期保持外源基因,可用核移植的方法。答案(1)PCR技术扩增人工合成(2)限制酶人的生长激素基因和小鼠DNA分子的空间结构、化学组成相同转化(3)显微注射法受精卵(早期胚胎)受精卵(或早期胚胎)具有全能性,可使外源基因在相应组织细胞表达DNA分子杂交膀胱上皮(4)胚胎分割将内细胞团均等分割(5)细胞核去核的卵核移植(克隆)4(2015湖南六校联考)下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,请据图回答问题。(1)图示AB过程的目的是_。
7、在细胞内完成这类过程不需要加热,主要与_酶的作用有关;在AB的过程中,所需酶的特点是_。(2)过程通常用_处理,可达到超数排卵的目的;为使过程中的受体生理状况适宜,可用激素对受体进行_处理。若要同时产生多个相同的转基因牛,常用到_技术。(3)过程的常用方法是_。解析(1)图示AB过程为利用PCR技术在体外大量扩增目的基因的过程;在细胞内完成基因扩增不需要加热,主要与解旋酶的作用有关;在AB的过程中,所需酶是耐高温的DNA聚合酶。(3)过程是将目的基因导入受体细胞,受体细胞是植物细胞,常用方法是农杆菌转化法。答案(1)获取大量的目的基因解旋耐高温(2)促性腺激素同期发情胚胎分割(3)农杆菌转化法
8、5(2015皖南八校联考)人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。(1)图中的高血压相关基因作为_,质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体。(2)将该基因通过_法注入鼠的_细胞。(3)子代大鼠如果检测出_,和表现出_,即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达,然后可用其建立高血压转基因动物模型。解析(1)图中的高血压相关基因是目的基因,质粒是该过程的运载体,二者必须用同一种限制酶进行切割才能露出相同的黏性末端,以便目的基因插入运载体。(2)把目的基因导入动物细胞时,所用方法是显微注射法,受体细胞是受精卵。(3)子代大鼠如果检测出相应的与高血压相关的蛋白质,说明在分子水平上目的基因成功表达,如果表现出高血压症状,则说明在个体水平上目的基因成功表达。答案(1)目的基因载体同一种限制酶(2)显微注射受精卵(3)与高血压有关的蛋白质高血压症状4