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1、生物技术实践 选修1单元 闯关检测题组时间:50分钟分值:100分非选择题(共100分)1.(2015河北邯郸摸底,55)(12分)下表是筛选异养型细菌的培养基配方。KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 gFeCl30.1 gX1 g维生素微量琼脂15 g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到100 mL(1)苯胺是致癌物质,土壤中有分解苯胺的异养型细菌,此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外,还能提供(写全得分),该培养基从作用看属于培养基。制备固体培养基时调节pH在步骤后;对培养基进行灭菌的常用方法是。(2)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效
2、果图。则获得图B效果的接种方法是。运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加可初步鉴定该种细菌能够分解尿素;在筛选能够分解纤维素的微生物过程中,常用到染色法。2.(2015安徽黄山二次月考,47)(12分)某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起,圆褐固氮菌属于固氮细菌。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤,并回答有关问题:(1)主要步骤:制备两种培养基:一种是培养基,另一种是的培养基。分别分成两份,依次标上A,A和B,B,备用。分别向A、B培养基中接种。接种后,放在恒温箱中培养34天。分别从A、B培养基的菌落中
3、挑取生长良好的菌种,接种到A、B培养基中。接种后,把A、B培养基放入恒温箱中培养34天。(2)回答问题:在步骤中,为保证无杂菌污染,实验中应采用的主要措施有、。第两个步骤的目的是。3.(2015内蒙古赤峰质检,31)(13分)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。请回答下列问题:(1)实验过程应采用无菌技术,防止培养物被微生物污染及被微生物感染,操作者的双手需要进行清洁和处理。(2)、号培养基配制和灭菌时,灭菌与调节pH的先后顺序是。(3)号培养基中的碳源为。若号培养基中的菌落连成一片,最可能的原因是。(4)部分嗜热菌
4、的菌落周围形成透明圈,应挑出透明圈(填“大”或“小”)的菌落接种到号培养基,该过程的目的是目的菌;下次划线时接种环上的菌种来源于。4.(2015河北冀州中学第一次月考,44)(12分)某课题组研究被石油污染过的土壤中细菌数量,并从中筛选出能分解石油的细菌。为了分离和纯化高效分解石油的细菌,科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。图A图B(1)配制好的培养基通常可以使用法灭菌。与步骤中培养基成分相比,步骤中培养基成分的最大区别是。(2)接种细菌常用的方法有。若经过过程后获得的结果为图B所示,则所操作方法如图所示。(3)步骤后取样测定石油含量的目的是。对步骤中某瓶中细菌计数的方法有两种
5、,一种方法是,其菌落数可代表活菌数;另一种方法是。5.(2014广东信宜中学月考,26)(13分)如图表示葡萄酒的酿制过程,请据图分析:(1)该过程表明酵母菌异化作用的类型是。(2)葡萄酒的酿制原理是:先通气使酵母菌进行,以增加酵母菌的数量,然后使酵母菌获得葡萄酒,果汁发酵后是否有酒精产生,可以用来检验。(3)在甲中进行搅拌的目的是,乙中排出的气体是发酵过程产生的。(4)如果丙装置产生酒精后去掉盖子,一段时间后发酵液会变酸,写出此时发生的化学反应式:。与该过程有关的微生物是,该菌种与酵母菌在结构上的主要区别是。(5)在制作馒头时,可采用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软,请问这两种方法中
6、,馒头中的营养和所含有的能量情况相比较最可能的是()A.后者所含营养丰富、能量少B.后者所含营养单一、能量少C.前者所含营养丰富、能量多D.两者所含营养和能量相同6.(2014广东百所高中联考,29)(13分)常品茶、善品茶者能在杯水之中品出生活的真谛。茶的种类以色泽(或制作工艺)分为绿茶、红茶、乌龙茶、白茶等不同品种。请回答:(1)绿茶是不经发酵制成的茶。在制作绿茶的工艺中,有一道工序是迅速将温度提高到70 左右,目的是,从而保证茶叶鲜绿的颜色。(2)红茶菌液是一种传统的活菌饮料,制作流程是制作红茶糖液接种红茶菌种发酵红茶菌液。红茶菌种是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共同体,可以用法分离纯化得到不
7、同的菌种。在接种活菌之前,红茶糖液要先煮沸后冷却,这是为了。(3)科学家利用植物组织培养技术实现优良茶种的大量繁殖,在组织培养过程中,无菌操作是成功的关键,因此用于培养的外植体要先做处理;外植体要经过和过程获得胚状体;用于植物组织培养的培养基中除植物激素、蔗糖和维生素等有机物外还应有。(4)实验室分离色素的方法为法。7.(2015广西桂林中学月考,39)(12分)某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了研究,操作如下:某年1月4日下午选取1、2、3号三只相同的泡菜坛,在每个坛中加入洗净的新鲜莲花菜0.6 kg,再分别倒入相同量的煮沸并冷却的10%的盐水,将坛密封,置于同一环境中。封
8、坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量,后来定时测定,结果如下图。请问:(1)实验中盐水需煮沸原因是,并且冷却后才可使用。溶液量增加,这是由于。(2)测定亚硝酸盐含量的方法是,其原理是:在盐酸酸化的条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成,将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。(3)该小组对实验数据的处理方法是否合理?。根据图中数据进一步分析,可推测在腌制过程中的第天泡菜中的亚硝酸盐含量达到最大值,若要食用,至少要在腌制的第天比较好。(4)实验中三只坛中产生的亚硝酸盐含量存在差异,最可能的原因是。8.(2
9、014河南禹州一模,39)(13分)请回答下列与生物技术实践相关的问题:(1)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌,这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到特定培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有和。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、。(2)酵母菌是一种真菌,可用于制作果酒。果汁发酵后是否产生酒精,可以用来检验,在酸性条件下,该物质与酒精反应呈现的颜色为。(3)加酶洗衣粉中有的加香精,高档洗衣粉中的香精是由植物芳香油制成的,目前从植物中提取
10、芳香油的方法有、 、等。非选择题1.答案(1)碳源和氮源选择溶化高压蒸汽灭菌法(2)平板划线法低(3)酚红指示剂刚果红解析(1)根据培养基的配方可以看出,所给的物质中不能为微生物提供碳源和氮源,因此微生物生长所需要的碳源和氮源由X提供。该培养基从作用看属于选择培养基,在制备固体培养基时一般要先溶化再调节pH,培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。(2)B图为平板划线法;运用A所示接种方法统计的菌落常常比活菌的实际数目低,因为一个菌落可能是由一个或多个细菌繁殖形成的。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加酚红指示剂可初步鉴定该种细菌能够分解尿素,原因是尿素被细菌合成的脲酶分解产生氨,而氨能使酚红指
11、示剂变红;筛选能够分解纤维素的微生物过程中,常用到刚果红染色法。2.答案(1)无氮加青霉素混合菌(2)培养基高压蒸汽灭菌接种环在酒精灯火焰上灭菌接种过程在酒精灯火焰附近进行获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌解析(1)将微生物进行分离一般采用选择培养基。选择培养基是在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。圆褐固氮菌是自生固氮菌,能在无氮培养基上生长繁殖,而酵母菌则不能;青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖,而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。根据这一原理可将两种微生物分离开来。(2)在微生物培养过程中的灭菌措施有:培养基和培养皿的高压蒸汽灭菌、金属用具的灼烧灭菌、
12、接种过程在酒精灯火焰附近进行等。为获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌,可以用选择培养基重复进行选择培养。3.答案(1)操作者自身消毒(2)先调节pH,后灭菌(3)淀粉菌液浓度过高(或稀释不够)(4)大纯化上次划线末端解析(1)微生物培养时,为了防止培养物被微生物污染及操作者自身被微生物感染,应采用无菌技术,对操作者的双手需要进行清洁和消毒处理。(2)培养基配制时,应先调节pH,然后进行灭菌处理。(3)从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,应以淀粉作为碳源。若涂布平板时培养基中的菌落连成一片,最可能的原因是菌液浓度过高(或稀释不够)。(4)选择培养基中嗜热菌的菌落周围形成透明圈,透明圈越大,则表
13、明该菌越能高效利用淀粉。号培养基上采用平板划线法接种,其是为了纯化目的菌,下次划线时接种环上的菌种来源于上次划线末端。4.答案(1)高压蒸汽灭菌石油是唯一碳源(2)平板划线法和稀释涂布平板法甲(3)筛选出分解石油能力最好的细菌稀释涂布平板法显微镜直接计数法(血球计数板计数法)解析(1)培养基灭菌用高压蒸汽灭菌法,为筛选出能分解石油的细菌,以石油为唯一碳源。(2)接种细菌常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。图B为平板划线法接种的结果,操作方法如图甲所示。(3)步骤进一步操作是为了筛选出分解石油能力最好的细菌,微生物计数可用稀释涂布平板法和显微镜直接计数法(血球计数板计数法)。5.答案(1)兼
14、性厌氧型(2)有氧呼吸无氧呼吸或发酵重铬酸钾(3)充分接触并增加溶氧二氧化碳(4)C2H5OH+O2CH3COOH+H2O醋酸杆菌(醋酸菌)后者有核膜包围的细胞核(5)A解析(1)实验过程表明酵母菌既能进行有氧呼吸也能进行无氧呼吸,异化作用的类型是兼性厌氧型。(2)酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,大量繁殖,在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精。酿制葡萄酒过程中要先通气使酵母菌进行繁殖,以增加酵母菌的数量,然后使酵母菌进行无氧呼吸获得葡萄酒,果汁发酵后是否有酒精产生,可以用酸性重铬酸钾来检验。(3)为了让酵母菌与反应物充分接触,同时为酵母菌提供更多的氧气,可以通过搅拌来进行。乙中排出的气体是酵母菌
15、进行无氧呼吸产生的二氧化碳。(4)如果丙装置产生酒精后去掉盖子,一段时间后发酵液会因酒精在醋酸杆菌作用下被氧化成乙酸而变酸,发生的化学反应式为C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。醋酸杆菌是细菌,属于原核生物,与酵母菌在结构上的主要区别是后者有核膜包围的细胞核。(5)在制作馒头时,可采用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软,用酵母菌发酵的方法时,酵母菌会将馒头中的淀粉分解成小分子有机物,馒头中营养成分增加,但酵母菌消耗部分能量。6.答案(1)通过高温使酶变性失活(2)稀释涂布平板(平板划线)清除培养液中的杂菌,并防止高温杀死红茶菌种(3)消毒脱分化再分化无机盐(或矿质元素)(4)纸层析
16、解析(1)通过高温可以使相关的酶变性失活,从而保证茶叶鲜绿的颜色。(2)分离纯化得到不同的菌种常用平板划线法或稀释涂布平板法。在接种活菌之前,红茶糖液要先煮沸后冷却,煮沸是为了清除培养液中的杂菌,冷却是为了防止高温杀死红茶菌种。(3)在组织培养过程中,为了防止微生物感染,外植体要进行消毒处理。外植体经过脱分化和再分化过程可获得胚状体。用于植物组织培养的培养基中除植物激素、蔗糖和维生素等有机物外还应有无机盐。(4)实验室通常用纸层析法分离色素。7.答案(1)杀灭杂菌外界溶液浓度过高使细胞渗透失水(2)比色法玫瑰红色染料(3)不合理310(4)各坛中微生物种类和数量可能存在差异(其他合理答案也可)
17、解析实验中盐水需煮沸是为了杀灭杂菌,腌制过程中坛中溶液量增加是由于外界溶液浓度过高使细胞渗透失水;用比色法测定亚硝酸盐含量,其原理是在盐酸酸化的条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料,将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。从3只坛中的亚硝酸盐含量变化曲线可知,在1月7日时亚硝酸盐含量达到最大,1月14日后亚硝酸盐的含量达到最低,可以食用。三只坛中亚硝酸盐的含量存在差异最可能的原因是各坛中微生物种类和数量可能存在差异。8.答案(1)平板划线法稀释涂布平板法无机盐、碳源、氮源(多答少答均不得分)(2)重铬酸钾灰绿色(3)萃取法蒸馏法压榨法解析(1)实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。微生物培养基一般都含有水、无机盐、碳源、氮源。(2)酒精可以和橙色的重铬酸钾在酸性条件下反应呈现灰绿色。(3)从植物中提取芳香油的方法有萃取法、蒸馏法、压榨法等。7