《高效液相色谱优秀 (4)精选文档.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《高效液相色谱优秀 (4)精选文档.ppt（18页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、高效液相色谱本讲稿第一页，共十八页实验目的实验目的掌握用高效液相色谱法测定饮料中咖掌握用高效液相色谱法测定饮料中咖啡因的方法啡因的方法分离的原理分离的原理仪器的结构和操作仪器的结构和操作定性及定量方法定性及定量方法本讲稿第二页，共十八页咖啡因简介咖啡因简介咖啡因咖啡因：（Caffeine）是从茶叶、咖啡果）是从茶叶、咖啡果中提炼出来的一种黄嘌呤生物碱中提炼出来的一种黄嘌呤生物碱化合物化合物 作用作用：提神醒脑提神醒脑 药用药用国家管制的国家管制的精神药品精神药品，同海洛因、，同海洛因、鸦片、冰毒、可卡因都为毒品鸦片、冰毒、可卡因都为毒品在饮料中的在饮料中的食品卫生标准食品卫生标准：我国我国 1
2、50ppm美国、日本美国、日本 流动相的截止波长流动相的截止波长本讲稿第十二页，共十八页HPLC定性与定量方法定性与定量方法定性定性：保留时间定性保留时间定性 联用技术定性（联用技术定性（IR、MS、NMR）定量定量：利用峰高和利用峰高和峰面积峰面积定量定量本讲稿第十三页，共十八页实验部分实验部分色谱条件：固定相：固定相：C18柱柱流动相：流动相：40甲醇甲醇+60水水进样量：进样量：20L流速：流速：1 mL/min柱温：柱温：室温室温本讲稿第十四页，共十八页样品处理样品处理可乐可乐：超声脱气超声脱气5min后取后取25.00ml咖啡咖啡：0.08g 蒸馏水加热溶解蒸馏水加热溶解茶叶茶叶：0
3、.04g 蒸馏水煮沸蒸馏水煮沸5min左右左右后取上清液，重复操作两次后取上清液，重复操作两次定容至定容至50ml干过滤干过滤 弃去前滤液弃去前滤液 取后滤液取后滤液0.45m微孔微孔滤滤膜膜过滤过滤注入注入样样品瓶品瓶本讲稿第十五页，共十八页数据处理数据处理记录标准系列溶液的出峰时间和峰面积，记录标准系列溶液的出峰时间和峰面积，以浓度对峰面积作图得到标准曲线以浓度对峰面积作图得到标准曲线记录样品对应的出峰时间及峰面积，通过记录样品对应的出峰时间及峰面积，通过标准曲线计算浓度标准曲线计算浓度计算原始样品中咖啡因的含量计算原始样品中咖啡因的含量本讲稿第十六页，共十八页注意事项注意事项流动相在使用前必须经过脱气处理流动相在使用前必须经过脱气处理流动相和样品必须经流动相和样品必须经0.45m滤膜过滤滤膜过滤进样阀件必须充分清洗干净，所进样品体进样阀件必须充分清洗干净，所进样品体积必须是阀件定量管体积的积必须是阀件定量管体积的2倍以上倍以上本讲稿第十七页，共十八页本讲稿第十八页，共十八页