第八章吸光光度法PPT讲稿.ppt

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1、第八章吸光光度法第1页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述概述概述 利用物质的光学性质来进行分析的方法。从现在开始我们所接触的内容为仪器分析（简单仪器分析），仪器分析主要测定微量组分，0.1%以下，（常量1001%，微量10.001%，痕量0.001%）。那么我们判断一下下列情况能否用化学分析吗？第2页，共68页，编辑于2022年，星期三nAnBa=1b=6 计算得：0.01865ml0.02ml 8-1 概述概述 一般滴定管的误差为0.01ml，(0.02ml)，不能用滴定法，也不能用重量法，含量太小，误差大。含铁量为0.001%试样，称取一克，用标液滴定，用去多少毫升？1g

2、试样含纯铁：10.001%=0.01mg 第3页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述概述概述 可以这样：待测组分有色溶液 第4页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述概述概述 溶液浓度小：色浅 橙红色络合物一定体积时：溶液浓度大：色深 这种利用物质颜色深浅不同，测定改种有色溶液的有色物质浓度的方法比色分析法。它的基本依据：有色物质对光的选择性吸收作用。第5页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述概述概述 那么吸光光度法（分光光度法）也是基于有色物质对光的选择性吸收作用，利用测试仪器分光光度计 比色分析可见红外紫外，荧光等 吸光光度法光

3、度法光电比色（光电比色计）分光光度计法 分光光度计 这种分类方法，采用名词不同，是因为仪器的不同或发展的历史不同，实际上都称为吸光光度法，都是基于物质对光的选择性吸收作用。第6页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述概述概述 一、吸光光度法的特点：一、吸光光度法的特点：1.灵敏度高：110-3%微量分析，甚至达10-410-5%痕量 2.准确度高：相对误差510%比色25%分光光度，一般不超过6%3.应用广泛：几乎所有的无机离子和许多有机化合物 4.操作简便，快速，仪器设备不复杂 第7页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述 二、吸光光度法的基本原理：二、吸光光度法

4、的基本原理：1.1.光的基本性质光的基本性质光的基本性质光的基本性质 光的波动性：参数：波长；：频率；C：光速，关系：C=光的粒子性：光电效应，光的吸收，发射等把光看作是带有能量的粒子流 微粒：光子 能量：E 决定于，波粒关系：第8页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述概述概述 =CE小 紫外10400nmE大可见400780nm红外7803000nm第9页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述 波长越长，能量越小，红外光对人无多大害处，但紫外光或更短的波长对人有害。单色光由能量和波长相同的光所组成的光子流，（波长相同的光）复合光波长不同的光所组成的光，例如白光

5、400780nm 由各种波长和能量的光所组成的红橙黄可见光 第10页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述概述概述 2.2.物质对光的选择性吸收物质对光的选择性吸收物质对光的选择性吸收物质对光的选择性吸收 当光束照射到有色物质上时，光与物质发生相互作用，于是就产生光的反射、散射、吸收、透射等现象 白光入射400780nm反射 反射光很小吸收散射 均匀溶液可忽略透射刺激人眼而使人感觉到颜色的存在 第11页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述概述概述 看见的光是不被吸收而透过的光（眼睛所观察到的）吸收的光不被看见两种颜色（互补色）我们人眼能看到谁哪？透射光吸收光（互补

6、色光）例如：CuSO4直观为蓝色，吸收黄色580600nmKmnO4紫红色 吸收500560nm绿色H2O 无色，没有吸收透射蓝色透过紫红第12页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 概述概述 物质颜色与吸收光颜色的互补关系 物质颜色吸收光颜色波长/nm黄绿黄橙红紫红紫蓝绿蓝蓝绿紫蓝绿蓝蓝绿绿黄绿黄橙红400450450480480490490500500560560580580600600650650780第13页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述 我们穿的衣服，所看到的各种大自然中的各种颜色，都是由于物质对可见光的吸收显示出来的。所以：不同物质对光有选择性吸

7、收，使得各种物质具有不同颜色。第14页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述概述概述 为什么有吸光现象？选择性吸收？为什么有吸光现象？选择性吸收？(1).(1).吸光现象吸光现象吸光现象吸光现象 10-8秒秒，以以热热或或荧荧光光形式放出形式放出激态激态基态基态物质粒子与光子碰撞能量转移，这个作用叫光的吸收。第15页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述(2).(2).选择性吸收选择性吸收选择性吸收选择性吸收 激发态粒子约10-8秒后回到基态，吸收的能量以热或荧光等形式释放 每种物质其结构不同，具有不同的量子化能级，对光的吸收不同，当照射光的能量h与

8、被照射物质粒子的基态与激发态能量之差相当时才发生吸收，发生电子跃迁，呈现不同颜色，物质对光有选择性吸收。第16页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述概述概述 3.3.吸收曲线（吸收光谱）吸收曲线（吸收光谱）吸收曲线（吸收光谱）吸收曲线（吸收光谱）表示光吸收程度的量有：A 吸光度 D 光密度 E 消光值 0.0004mg/ml0.002mg/ml0.0006mg/ml0.300 0.200 0.100(nm)600 500 吸收最大波长为510nm（绿色）,600nm左右的橙红色光几乎无吸收 第17页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述概述概述 浓

9、度越大，吸收越大（A越大）A最大最大所对应的波长为最大吸收波长（max）max不随浓度的变化而变化 这是为什么？这是由物质的量子化能级决定的 第18页，共68页，编辑于2022年，星期三8-1 8-1 概述概述 结论：利用物质对不同的波长具有选择性吸收，而且浓度不同对光吸收的程度不同来测定含量 定性：利用max不同物质其吸收曲线的形状和max不同 定量：的关系，在不同max下测定A值。换算含量。第19页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 一、朗伯比尔定律 开始是由实验观察得到，后又理论推导 1.实验结论：当一束平

10、行单色光通过液池厚度为b的有色溶液时，溶质吸收了光能，光的强度就要减弱，溶液的浓度越大，液池厚度越大，光被吸收的越多，光强度减弱也就越显著。It透射Ir反射I0 入射平行单系bIa吸收第20页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 描述它们之间的定量关系为：I0=It+Ir+IaIr很小可以忽略；散射光不存在，因为溶液均匀。=It+Ia 命It=I Ia=I0-It=I0-I 透光率透光率第21页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 加合

11、起来朗伯发现：C一定，比尔发现：b一定，a：k1、k2加合比例常数为吸光系数 L/gcm浓度为C：g/L第22页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 物理定义：当一束平行单色光通过单一均匀的、非散射的吸光物质溶液时，溶液的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。此定律不仅适用于溶液，也适用于其他均匀非散射的吸光物质（气体或固体），是各类吸光光度法定量分析的依据。有色溶液的浓度C：molL-1，则：摩尔吸光系数，L/molcm 与a的关系：=Ma 第23页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基

12、本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 例题：铁（）浓度为1，10-邻二氮杂菲反应，生成橙红色络合物。该络合物在波长580nm，比色皿厚度为2cm时，测得A=0.19。计算1，10-邻二氮杂菲亚铁的a及。的溶液，与解：已知铁的相对原子质量为55.85。根据比尔定律得：第24页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 2.理论推导 dx dIx吸光度II0bS（截面积）第25页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 吸光质点（能

13、吸收光子的粒子可能是离子、分子、原子）dn个吸光质点（吸光粒子）ds俘获光子的总表面积一个光子碰巧到达这些表面上，将立即被吸收，：光子在截面内被俘获的几率 通过S的光强度Ix：通过dn后，光强度减弱dIx（被吸收的光强度）则为光强度减弱的几率。第26页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 从意义上讲，光子在S内被俘获的几率应与光强度减弱的几率相一致 光强度因被吸收而减弱 第27页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 质子数越多，A越大

14、第28页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 将n/v换算为C（molL-1）v=Sb 第29页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 凡含有个原子的元素叫摩尔原子：摩尔吸光系数，有色溶液在浓度C为1molL-1液池厚度b=1cm时，吸光度A=朗伯-比尔定律：第30页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 吸光度与透光率的关系：百分透光率A=2-lgT%第31页

15、，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 二、吸光度具有加合性 在多组分体系中，如果各种吸光物质之间无相互作用力，这个体系的总吸光度等于各组分吸光度之和。第32页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 三、吸光度的测量（一）、T与A的关系 A=pT=2-lgT%百分透光率：入射光I0为100时，透过的光为多少 如果使用仪器上表示出的T%，则可用上式换算A 第33页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本

16、定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 （二）、吸光度的测量 1.测A不测T 0 A100T%0从右向左刻度越来越小，不均匀，无论怎样，刻度越粗糙的误差越大，我们读取A，AC 是均匀刻度 第34页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 2.参比溶液，调节仪器 因为各种试剂对所选择的最大波长有不同程度的吸收，这就导致了物质对I0吸收的真实性。另外，比色皿的反射，以及比色皿材料也可能有吸收，这样都造成透射光强度的减弱。为使光的强度减弱仅与溶液中待测物质的浓度有关，必须对上述影响进行校正。为此，选用参比溶液以及对测量用的比色

17、皿进行校正。调节仪器使参比皿的A=0，T=100%第35页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 参比皿：选择光学性质相同，厚度相同的比色皿，贮参比溶液 参比溶液：例如邻菲罗啉测Fe+，加入各种试剂但不加Fe的试液，也叫空白液 空白液+比色皿，测得一个A/值本底值。用这个A/值调仪器零点，从而就消除了A/的影响，再测A就是较真实值，通过调节仪器后，实际上入射光强度就是通过参比皿的光强度。第36页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 四、偏

18、离比尔定律的原因：AC理想状态下，当波长和强度一定的入射光通过光程长度固定的有色溶液时，AC。通常在仪器分析中，都是利用标准曲线法（工作曲线法）测定物质的含量，其工作曲线：正常正偏负偏CCX0AXA固定b，配置准确浓度已知的、一系列不同浓度标准溶液（浓度梯度）测其A，以A为纵坐标，以标液浓度C（molL-1）为横坐标作图，可得到一条通过原点的直线 实际中，特别是浓度较高时，常会出现标准曲线不成直线的现象，如上图红线所示 未知含量的物质处理成溶液（同标液的方法），测其AX，从图上查得CX，利用CX求X%。第37页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律

19、光的吸收基本定律光的吸收基本定律 原因：1.非单色光：严格讲朗伯比尔定律只适用于单色光，但实际上单色器提供的波长范围比较窄的光带20nm（据仪器性能而定）。为了讨论方便，假设入射光仅由两种波长组成，例：第38页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 实验证明：当时，负偏 当时，正偏 当时，偏差很小，基本上成为直线关系则上式：第39页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 如果I0所包含的波长范围在被测溶液的吸收曲线较平坦部分，也可测得较好的

20、线性关系。第40页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 2.化学因素：高浓度时，粒子间有相互作用力，不能独立存在，使吸光能力发生改变，一般小于0.01molL-1溶液适于比色 3.由吸光物质构成的化学体系：因条件的改变而形成新的化合物或改变吸光物质的浓度，使偏离。新的化合物：缔合、离解、络合、互变异构，与溶剂的作用。消除：利用物质性质、化学平衡知识加以预测与防止 第41页，共68页，编辑于2022年，星期三8-2 8-2 光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律光的吸收基本定律 尽量选择吸收曲线平坦的曲线处

21、的波长 小结：稀液0.01molL-1第42页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 一、目视比色法一、目视比色法准确度不高的常规分析法准确度不高的常规分析法 同种材料，大小、形状相同的比色管 色阶C2C3C4C5CXC1第43页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 处于两号中间，取其算术平均 从管口垂直向下观察，比较颜色深浅处于哪号溶液其含量与此号相近准确度不高，但方便，相对误差520%，只适用于单色液，且标准系列不能久存，颜色易变。第44页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3

22、 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 二、光度分析法二、光度分析法 与目视比色比较的优点：1.使用仪器代替人眼进行测量，消除了人的主观误差，从而提高了准确度 2.测定溶液中有其他有色物质共存时，可以选择适当的单色光和参比溶液来消除干扰，因而可提高选择性；3.在分析大批试样时，使用标准曲线法可简化手续，加快分析速度。第45页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 近代的仪器型号 方法仪器单色器检测器型号光电比色法光电比色计硒光电池581G分光光度法分光光度计玻璃棱镜硒光电池72型石英棱镜光电管721石英棱镜光电倍增751光栅光电

23、倍增710，730等光度计的基本组成：光源、单色器、比色皿、检测器 第46页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 光度计的种类繁多，但它们都是由下列基本部件组成 光源单色器吸收池检测系统（一）光源，一般使用钨丝灯，612V，温度26002870K，熔点3680K，波长3202500nm连续光谱，温度取决于电压，一定要稳压。光强度决定于温度，温度越高强度越大，但注意使用寿命。温度电压光强度（二）单色器，将光源的复合光分解为单色光的装置，包括棱镜，（光栅）狭缝和透镜 滤光片：玻璃，干涉，爽胶只允许和它颜色相同的光透过 30nm 510nm 3

24、040nm（半宽度）第47页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 棱镜：玻璃，石英 它们的质量用半宽度（nm）来说明：T%BACmaxDa.滤光片，最大透光度的一半处曲线的宽度（CD），半宽度越小，单色性越强，滤光片质量越好。选：滤光片的颜色是有色溶液的互补色 b.棱镜：半宽度为510nm，可达2nm，高级0.5nm，灵敏度高，选择性比滤光片好的多。第48页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 玻璃：不透过350nm以下的光石英：350nm透过（三）吸收池（比色皿）规格：0.5，1，

25、2，3，长方形，圆柱形等 玻璃比色皿：1.同厚度之间的透光率相差应小于0.5%2.光与比色皿要垂直，手拿毛玻璃面 3.比色皿一定要保持清洁，表面光滑 洗液洗涤乙醇HNO3 第49页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器（四）检测器测量吸光度时，是将透过吸收池的光强度转换成电流进行测定，这种把光变为点的转换器叫检测器 光电池组成光电转换器光电管检流计第50页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 1.光电池工作原理：光照射到光电池上，半导体硒表面就有电子逸出，被收集于金属薄片上，从而带负电

26、，成为光电池的负极。由于硒的半导体性质，电子只能单向移动，使铁片成为正极。通过外电路连接，可产生10100A的光电流，能用检流计测量。金属薄片(金、银、铅)半导体硒铁片e第51页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 外电路电阻不大（1001000）IA，I电流I0 1.连续长久或强光照射，使其疲劳，即I不变，产生的光电流小 注意事项：2.灵敏度在550nm左右最高，而在750，250nm处降至10%第52页，共68页，编辑于2022年，星期三8-3 8-3 方法与仪器方法与仪器方法与仪器方法与仪器 2.光电管，自学 3.检流计：悬镜式光点

27、反射检流计测量产生的光电流，灵敏度109A/格 应防止震动和大电流通过，使用完毕应先关闭检流计 第53页，共68页，编辑于2022年，星期三8-4 8-4 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择 一、显色反应的选择：氧化还原反应络合反应 显色反应用的最多的反应例如：红色pH=29 lgK稳=21.3=1.2104 max=510nm 第54页，共68页，编辑于2022年，星期三8-4 8-4 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择 问：用581G型光电比色计应选何种滤光片？（绿色

28、）因为一种被测物质组分可能和多种显色剂反应，生成不同的有色物质，因此要考虑最适宜的显色反应，从以下因素考虑：1.灵敏度：因测定微量组分，则要求灵敏度高，选大的显色反应，一般值在104105 2.选择性：好，显色剂仅与一种组分发生显色反应，特效显色剂 或少数几种组分发生显色反应 3.对比度（反射度）：大称：两种有色物质最大吸收波长之差，络合物的最大吸收波长减去显色剂的最大吸收波长。第55页，共68页，编辑于2022年，星期三8-4 8-4 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择 max空白值MRAR也就是说：尽量让R在max处无吸收，降低

29、空白值 4.MR组成恒定，化学性质稳定，保证测量中吸光度基本不变，否则影响A的再现性。第56页，共68页，编辑于2022年，星期三8-4 8-4 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择 二、显色条件的选择：要想得到较好显色反应，则从显色条件考虑。（一）显色剂用量：（一）显色剂用量：（一）显色剂用量：（一）显色剂用量：每个实验前要对用量实验，一般的讲：R越多，利于形成MR，但过量太多也不好。请看下面几种情况:：（固定其他条件，只改变R的用量，然后测定A，以A-C作图）0CRBAAA第57页，共68页，编辑于2022年，星期三8-4 8-4

30、 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择 图，0-A用量不足，A以后稳定，大于A点之后任何一点浓度，但不能太大，一般根据配比，如Fe2+phen 13 图，吸光度稳定在A-B之间，狭窄 例：A1:61:51:3A浓度太低或太高，生成配位体数低或高的络合物吸光度都降低。R小于CA或大于CB，A都下降，必须严格控制CR用量。图，CR增大，A增大，如由橙黄变为血红，一般不选 形成逐级络合，第58页，共68页，编辑于2022年，星期三8-4 8-4 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择

31、 （二）、酸度：实验确定合适的酸度（二）、酸度：实验确定合适的酸度（二）、酸度：实验确定合适的酸度（二）、酸度：实验确定合适的酸度 BApHA固定组分及显色剂浓度，改变pH值测A，作A-pH图，取平坦曲线下的pH值为测定此组分的最佳pH。酸度影响情况：显色剂的颜色与pH有关，R是一种有机弱酸，带有酸、碱指示剂的性质，酸度改变，存在形式发生变化，改变了溶液的颜色，从而改变有色化合物的浓度；对被测离子存在状态有影响，pH改变有可能造成M n+的水解。第59页，共68页，编辑于2022年，星期三8-4 8-4 显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件的选择显色反应及显色条件

32、的选择 （三）、其他因素：（三）、其他因素：（三）、其他因素：（三）、其他因素：温度：一般室温下进行，但有的反应需加热加速反应完全，但注意在比色时，温度保持一致（温度恒定）。根据反应条件，选适当的温度，如高温分解。时间：作A-t图，确定合适的时间，时间的长短与温度有关，有的在放置时，受到空气的氧化或发生光解（光化学反应），会使色减。溶剂：氯代磺粉S测Nb，水中显色需几小时，但加丙酮后只需30分钟即可。共存离子的影响：Fe3+，Co2+，Ni2+，Cu2+，Cr3+本身有色，Mn2+本身无色，但与R反应有色，负误差。第60页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5 8-5 吸光度测量条件的选择

33、吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择 一、入射光波长的选择 1.吸收曲线A大处max 2.若max不在仪器可测内或干扰物在max有强烈吸收，可选非峰值处的，但不易改变的。Amax第61页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5 8-5 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择 二、参比溶液的选择 待测组分显色剂等试剂参比溶液无色无色蒸馏水（溶剂）随显色剂的介质而定无色有色加试剂溶液（空白溶液）有色无色加试液（不加显色剂）有色有色试液+掩蔽剂+显色剂及其它试剂（让待测组分不显色）第62页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5

34、8-5 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择 三、吸光度读数范围的选择 仪器表头上，A值引起微小误差，会导致的误差 浓度相对误差 一般仪器A=0.20.8 72型A=0.10.65，T=1070%，如果仪器不在此范围，根据A=bc，改变bc，使A处于要求范围内。第63页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5 8-5 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择 从朗伯比尔定律推导：透光度的相对误差0.22%第64页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5 8-5 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度

35、测量条件的选择吸光度测量条件的选择 今假定T=0.5%，则用上式算出下表 浓度相对误差浓度相对误差透光度T/%吸光度A透光度T/%吸光度A950.022（）10.2400.3991.36900.0465.3300.5231.38800.0972.8200.6991.55700.1552.0101.0002.17600.2221.6331.5234.75500.3011.4421.6996.38第65页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5 8-5 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择 作图 1.7第66页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5 8-5 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择 T%=1070时，最小1.42.2%当为1.4时，消除读数误差的方法：1.控制试液的酸度 2.选择不同厚度的比色皿 第67页，共68页，编辑于2022年，星期三8-5 8-5 吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择吸光度测量条件的选择 本章重点要求：1.朗伯比尔定律的基本公式，物理意义，基本概念。2.分光光度计，光电比色计的基本构件，使用注意事项，光电管的工作原理 3.显色反应及条件的选择，光度测量方法 第68页，共68页，编辑于2022年，星期三