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1、实验革兰染色细菌基本形态特殊结构第1页,共30页,编辑于2022年,星期五实验内容l油镜的使用与保护油镜的使用与保护l细菌染色标本观察细菌染色标本观察l(革兰染色法)(革兰染色法)l细菌基本形态观察细菌基本形态观察(球菌、杆菌、螺形菌)(球菌、杆菌、螺形菌)l细菌特殊结构观察细菌特殊结构观察(荚膜、鞭毛、芽胞)(荚膜、鞭毛、芽胞)第2页,共30页,编辑于2022年,星期五一、普通光学显微镜的使用l显微镜的构造图 l油镜头的辨认l油镜的使用方法l显微镜的维护第3页,共30页,编辑于2022年,星期五一、一、油镜的使用与保护油镜的使用与保护1.原理原理2.方法方法第4页,共30页,编辑于2022年
2、,星期五四,细菌的三种基本形态四,细菌的三种基本形态l球菌:葡萄球菌。l杆菌:大肠杆菌。l螺形菌:霍乱弧菌。第5页,共30页,编辑于2022年,星期五 细菌的三种基本形态示意图第6页,共30页,编辑于2022年,星期五葡萄球菌:葡萄球菌:第7页,共30页,编辑于2022年,星期五Figure 1-A Gram stain of Gram+Staphylococcus cells.第8页,共30页,编辑于2022年,星期五显微镜下的杆菌杆菌(bacillus)Figure 2-Gram stain of Gram-E.coli cells第9页,共30页,编辑于2022年,星期五弧菌弧菌第10页
3、,共30页,编辑于2022年,星期五霍乱弧菌Figure 3-Gram stain of Gram Cholera cells第11页,共30页,编辑于2022年,星期五五,细菌的特殊结构观察五,细菌的特殊结构观察l芽胞示教片:破伤风杆菌。l鞭毛示教片:变形杆菌。l荚膜示教片:肺炎双球菌。第12页,共30页,编辑于2022年,星期五芽孢产芽孢细菌的种类 菌体 (营养细胞)芽胞第13页,共30页,编辑于2022年,星期五破伤风梭菌破伤风梭菌1000第14页,共30页,编辑于2022年,星期五鞭毛第15页,共30页,编辑于2022年,星期五变形杆菌鞭毛1000第16页,共30页,编辑于2022年,
4、星期五细菌荚膜示意图细菌荚膜示意图第17页,共30页,编辑于2022年,星期五荚膜的观察:负染色负染色 第18页,共30页,编辑于2022年,星期五三,细菌标本染色检查法三,细菌标本染色检查法第19页,共30页,编辑于2022年,星期五l【菌种菌种】大肠杆菌大肠杆菌+葡萄球菌葡萄球菌l【试剂试剂】生理盐水、革兰染液生理盐水、革兰染液l【其他材料其他材料】酒精灯、接种环、玻片、吸水纸、显微镜等酒精灯、接种环、玻片、吸水纸、显微镜等l【方法方法】1 1、细菌涂片标本的制片、细菌涂片标本的制片 2 2、革兰染液染色、革兰染液染色 3 3、油镜下观察结果、油镜下观察结果 革兰染色法革兰染色法由丹麦医生
5、由丹麦医生Hans Christian GramHans Christian Gram于于18841884年创立年创立。第20页,共30页,编辑于2022年,星期五l操作原则:无菌操作(烧灼灭菌)操作原则:无菌操作(烧灼灭菌)Aseptic area10-20cm外焰外焰焰芯焰芯内焰内焰第21页,共30页,编辑于2022年,星期五 器具:器具:接种环(上)和接种针(下)接种环(上)和接种针(下)柄约22cm25mm绝缘柄约7.5cm金属柄约14.5cm58cm安装环(针)的螺口(约8mm)细菌涂片的制备细菌涂片的制备第22页,共30页,编辑于2022年,星期五菌液采取法菌液采取法细菌涂片的制备
6、细菌涂片的制备第23页,共30页,编辑于2022年,星期五菌液采取法菌液采取法细菌涂片的制备细菌涂片的制备第24页,共30页,编辑于2022年,星期五一、细菌涂片的制备一、细菌涂片的制备 一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步。一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步。涂片涂片 干燥干燥 固定固定【操作步骤】第25页,共30页,编辑于2022年,星期五固定的目的:固定的目的:l使细菌的细胞凝固,使菌体与玻片粘得使细菌的细胞凝固,使菌体与玻片粘得更牢固;更牢固;l可改变菌体对染料的通透性;可改变菌体对染料的通透性;l加热固定可杀死细菌,比较安全。加热固定可杀死细菌,比较安全。第26页,共30页,编辑于
7、2022年,星期五 结晶紫结晶紫 1 1 碘液碘液 1 1 95%95%乙醇乙醇 3030”复红复红 1 1 冲洗冲洗 滤纸干燥滤纸干燥 油镜观察油镜观察冲洗冲洗冲洗冲洗冲洗冲洗革兰染液染色革兰染液染色初染初染媒染媒染脱色脱色复染复染【操作步骤】第27页,共30页,编辑于2022年,星期五紫色(紫色(G)革兰氏染色步骤示意图革兰氏染色步骤示意图革兰染色革兰染色甲菌甲菌乙乙菌菌初染初染结晶紫结晶紫媒染媒染碘液碘液脱色脱色乙醇乙醇复染复染稀释复红稀释复红紫色(紫色(G)红色(红色(G-)革兰染色步骤示意图革兰染色步骤示意图第28页,共30页,编辑于2022年,星期五【结果结果】l细菌被染成紫色者,称为革兰阳性菌;细菌被染成紫色者,称为革兰阳性菌;l而细菌染成红色者,称为革兰阴性菌;而细菌染成红色者,称为革兰阴性菌;阳性菌阳性菌紫色紫色 阴性菌阴性菌红色红色第29页,共30页,编辑于2022年,星期五实验报告实验报告l简要写出革兰染色原理、操作步骤,绘简要写出革兰染色原理、操作步骤,绘制革兰染色镜下细菌图制革兰染色镜下细菌图l绘制细菌的基本形态及其特殊结构图绘制细菌的基本形态及其特殊结构图第30页,共30页,编辑于2022年,星期五