2019_2020高中生物专题5DNA和蛋白质技术课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段练习含解析新人教版选修1.doc

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1、课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段一、选择题1从第二次循环开始,复制DNA片段呈哪种方式扩增(B)A直线B指数C对数D不变解析利用PCR反应循环n次会获得2n个片段,呈指数扩增。2DNA的羟基(OH)末端称为(A)A3端B5端C1端D2端解析DNA的两条链是反向平行的,为了明确地表示DNA的方向,通常将DNA的羟基(OH)末端称为3端。3PCR利用了DNA的什么原理,来控制DNA的解聚与结合(C)A特异性B稳定性C热变性D多样性解析PCR技术控制DNA的解聚与结合是利用DNA的热变性原理。4下图a、b、c均为PCR扩增的DNA片段,下列有关说法正确的是(C)A片段a、b、c的长度均相同B片段

2、a、b只是第一次循环的产物C片段c最早出现在第三次循环的产物中D经过30次循环后,片段c的数量为230解析图中片段a、b只有一种引物,是由原始DNA链为模板复制而来,其长度比片段c长,A项不正确。由于原始模板在每次循环中均可作为模板,则每次循环都能产生图中片段a、b,B项不正确。由于第一次循环的产物只有一种引物,而图中片段c有两种引物,且两条链等长,则最早出现在第三次循环,C项正确。经过30次循环后,得到的DNA片段总数为230,这包括图中的片段a、b,故D项不正确。5实验室内模拟生物体的DNA复制必需的一组条件是(A)ATP DNA分子酶转运RNA信使RNA 脱氧核苷酸分子适宜的pH 适宜的

3、温度ABC D解析ATP是直接能源物质,为DNA复制提供能量,需要;DNA分子是复制的模板,需要;酶是催化剂,需要;转运RNA是翻译的工具,不需要;信使RNA是转录的产物,是翻译的模板,不需要;脱氧核苷酸分子是复制的原料,需要;适宜的pH是酶活性正常发挥所必须的,需要;适宜的温度是酶活性正常发挥所必须的,需要。所以实验室内模拟生物体的DNA复制必需的一组条件是。6在PCR扩增的实验中,加入一种提取物(一种模板DNA片段),但实验得到的产物却有2种DNA,其原因可能是(C)A基因突变BTaq DNA聚合酶发生变异C基因污染D温度过高解析此现象属于PCR技术中的假阳性现象,是由靶基因污染造成的。因

4、此,在PCR实验中,一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸头等。尽量避免靶基因污染,故C项正确。若是基因突变,则可能得不到扩增产物或扩增产物仍为一种,A项不正确。若Taq DNA聚合酶发生变异则不会有扩增产物,B项不正确。若温度过高亦不会有扩增产物,D项不正确。7在遗传病及刑侦破案中要对样品DNA进行分析,PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题。(1)在相应的横线上写出引物,并在复性这一步骤中将引物置于合适的位置。(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DN

5、A分子。_3GCAG5_5GGTC35GGTC3_3CCAG5_(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,请分析循环一次后生成的DNA分子的特点:_每个DNA分子各有一条链含32P_,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为_1/2n_。(4)PCR反应过程的前提条件是_DNA解旋_,PCR技术利用了DNA的_热变性_原理解决了这个问题。(5)在对样品DNA分析过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,要去除这些组蛋白可加入的物质是_蛋白酶_。解析(1)由图可知,引物为5GAOH。(2)循环一次后生成的DNA分子如下:(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记,根据DN

6、A半保留复制特点可知,循环一次后,每个DNA分子各有一条链含32P,循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链的比例为。(4)PCR反应过程的前提条件是DNA解旋,PCR技术利用DNA的热变性原理解决了这个问题。(5)在对样品DNA进行分析的过程中发现,DNA掺杂着一些组蛋白,根据酶的专一性原理,要去除这些组蛋白可加入蛋白酶。8近十年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室里的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)加热使DNA双链打开,这

7、一步是打开_氢_键,称为_解旋_。(2)当温度降低时,引物与模板_3_端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两个DNA分子,此过程中原料是_四种脱氧核苷酸_,遵循的原则是_碱基互补配对原则_。(3)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的_温度_和_酸碱度_,前者由PCR仪自动调控,后者则靠_缓冲液_来维持。(4)DNA的复制需要引物,其主要原因是(D)A可加快DNA复制速度B引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合C引物的5端有助于DNA聚合酶延伸DNA链DDNA聚合酶只能从3端延伸DNA链解析(1)PCR是体外酶促合成特

8、异DNA片段的方法,主要由变性、复性和延伸三个步骤构成;在高温(95)下,待扩增的DNA双链受热,打开氢键变性成为两条单链DNA模板为变性过程;在低温(3755)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链为复性过程;在Taq酶的最适温度(72)下,以引物3端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿模板以53方向延伸,合成DNA新链为延伸过程。(2)当温度降低时,引物与模板3端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成2个DNA分子,此过程为PCR中的延伸过程,此过程中原料是四种脱氧核苷酸,遵循的原则是碱基互补配对原则,即AT,CG。(3)PCR技术的必要条件,除了模板、原料、ATP、酶以外,至少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的温度和酸碱度,前者是由PCR仪自动调控,后者则靠缓冲液来维持。(4)延伸过程中,以引物3端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿模板以53方向延伸,合成DNA新链,DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链,所以DNA复制需要引物,故选D。4

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