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1、关于细菌的分布与外界因素对细菌的影响第一张，PPT共二十八页，创作于2022年6月实验内容一、细菌的分布检查一、细菌的分布检查1.空气中细菌的检查2.水中细菌的检查3.皮肤消毒试验4.飞沫中细菌的检查二、外界因素对细菌二、外界因素对细菌的影响的影响1.高压蒸汽灭菌法2.紫外线杀菌试验 3.药物敏感试验第二张，PPT共二十八页，创作于2022年6月实验目的1.1.掌握标准纸片扩散法（）的原理、操作方法、掌握标准纸片扩散法（）的原理、操作方法、结果的判读及临床意义结果的判读及临床意义2.2.掌握皮肤消毒方法掌握皮肤消毒方法3.3.熟悉人体咽喉部细菌检查方法熟悉人体咽喉部细菌检查方法4.4.熟悉高压
2、蒸汽灭菌法，紫外线灭菌方法熟悉高压蒸汽灭菌法，紫外线灭菌方法5.5.了解空气、水中细菌的检查方法了解空气、水中细菌的检查方法第三张，PPT共二十八页，创作于2022年6月一、细菌的分布检查 了解微生物在自然界及正常人体的分布，对于在医了解微生物在自然界及正常人体的分布，对于在医疗实践及某些科学实验中树立无菌观念有着重要的意义。疗实践及某些科学实验中树立无菌观念有着重要的意义。第四张，PPT共二十八页，创作于2022年6月材 料普通琼脂平板普通琼脂平板血琼脂平板血琼脂平板 MHMH琼脂平板琼脂平板温箱温箱无菌棉签等无菌棉签等普通琼脂平板血琼脂平板第五张，PPT共二十八页，创作于2022年6月空气
3、中细菌的检查（示教）左边培养皿菌落是未被过滤空气中的细菌，右边是经过滤空气中留有的少量细菌 第六张，PPT共二十八页，创作于2022年6月水中细菌的检查（示教）取水样取水样1ml 1ml 注入无菌空平皿内注入无菌空平皿内 加加15mL15mL已融化并冷却至约已融化并冷却至约4545的培养基混匀的培养基混匀 倒置于倒置于温箱培养温箱培养18-18-h h后观察结果后观察结果第七张，PPT共二十八页，创作于2022年6月 1.1.分区标记分区标记 2.2.接种接种 3.3.培养培养皮肤细菌的检查：空白对照空白对照消毒后消毒后消毒前消毒前常用的皮肤消毒剂常用的皮肤消毒剂第八张，PPT共二十八页，创作
4、于2022年6月飞沫中细菌的检查用咳碟法将咽喉部细菌接种于血平板用咳碟法将咽喉部细菌接种于血平板第九张，PPT共二十八页，创作于2022年6月二、外界因素对细菌的影响 当外界环境条件发生巨大改变，可导致微生当外界环境条件发生巨大改变，可导致微生物的主要代谢活动发生障碍，生长停顿，甚至死物的主要代谢活动发生障碍，生长停顿，甚至死亡。亡。第十张，PPT共二十八页，创作于2022年6月消毒与灭菌消毒与灭菌 原理原理：微生物由蛋白质、核酸、脂类等构成，：微生物由蛋白质、核酸、脂类等构成，极易受外界条件的影响，对多种物理、化学因素极易受外界条件的影响，对多种物理、化学因素都敏感。都敏感。消毒与灭菌就是消
5、毒与灭菌就是根据这一原理抑制或根据这一原理抑制或杀死外环境中的病原微生物。杀死外环境中的病原微生物。第十一张，PPT共二十八页，创作于2022年6月1.高压蒸汽灭菌法（示教）原理：利用密闭的金属锅，密闭加热使锅内蒸汽原理：利用密闭的金属锅，密闭加热使锅内蒸汽压力增大，温度随之升高，杀菌力增强。压力增大，温度随之升高，杀菌力增强。第十二张，PPT共二十八页，创作于2022年6月手提式高压蒸汽灭菌器第十三张，PPT共二十八页，创作于2022年6月高压蒸汽灭菌器构造：为一双层的金属圆构造：为一双层的金属圆筒，两层之间盛水，外筒，两层之间盛水，外层坚厚，上方有金属厚层坚厚，上方有金属厚盖。螺旋能紧闭盖
6、门，盖。螺旋能紧闭盖门，使蒸汽不能外溢，因而使蒸汽不能外溢，因而蒸汽压力升高，其温度蒸汽压力升高，其温度亦相应的增高。亦相应的增高。第十四张，PPT共二十八页，创作于2022年6月1.1.加水至外筒内，被灭菌物品放入内筒。加水至外筒内，被灭菌物品放入内筒。2.2.盖上灭菌器盖，拧紧螺旋使之密闭。盖上灭菌器盖，拧紧螺旋使之密闭。3.3.加热，同时打开排气阀门，排净其中冷空气，关闭排加热，同时打开排气阀门，排净其中冷空气，关闭排气阀。继续加热，待压力表渐渐升至所需压力时气阀。继续加热，待压力表渐渐升至所需压力时(103.4kPa,121.3)(103.4kPa,121.3)，保持压力和温度维持，保
7、持压力和温度维持151530min30min。4.4.待压力自行降至零时，慢慢打开排气阀，排除余气，待压力自行降至零时，慢慢打开排气阀，排除余气，开盖取物。开盖取物。使用方法第十五张，PPT共二十八页，创作于2022年6月注意事项：注意事项：1 1）冷空气彻底排除；）冷空气彻底排除；2 2）压力降为）压力降为“0”0”时方可打开时方可打开。在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，完全极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气所以，
8、当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时，压力与温度的关系见表量空气时，压力与温度的关系见表第十六张，PPT共二十八页，创作于2022年6月用 途 凡耐高温和潮湿的物品，如培养基、生理盐凡耐高温和潮湿的物品，如培养基、生理盐水、衣服、纱布、棉花、敷料、玻璃器材、传染水、衣服、纱布、棉花、敷料、玻璃器材、传染性污物等都可应用本法灭菌。性污物等都可应用本法灭菌。第十七张，PPT共二十八页，创作于2022年6月2.紫外线杀菌试验 原理：通过紫外线的照射，破坏及改变微生物的原理：通过紫外线的照射，
9、破坏及改变微生物的DNADNA结构，使细菌当即死亡或不能繁殖后代，达到杀结构，使细菌当即死亡或不能繁殖后代，达到杀菌的目的。菌的目的。第十八张，PPT共二十八页，创作于2022年6月l波长波长200300nm的紫外线具有杀菌作用，其中以的紫外线具有杀菌作用，其中以265266nm最最强，这与强，这与DNA的吸收光谱范围一致。紫外线主要作用于的吸收光谱范围一致。紫外线主要作用于DNA，使一，使一条条DNA链上相邻的二个胸腺嘧啶共价结合而形成双聚体，因而链上相邻的二个胸腺嘧啶共价结合而形成双聚体，因而改变改变DNA的分子构型，干扰的分子构型，干扰DNA的复制与转录，导致细菌的死亡的复制与转录，导致
10、细菌的死亡或变异。或变异。l紫外线释放的能量较低，故穿透力较弱，普通玻璃、纸张、尘埃、水紫外线释放的能量较低，故穿透力较弱，普通玻璃、纸张、尘埃、水蒸气等均能阻挡紫外线，故只能用于手术室、传染病房、细菌实验室蒸气等均能阻挡紫外线，故只能用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒，或用于不耐热物品的表面消毒。杀菌波长的紫外线对人的空气消毒，或用于不耐热物品的表面消毒。杀菌波长的紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。体皮肤、眼睛有损伤作用，使用时应注意防护。紫外线杀菌试验紫外线杀菌试验第十九张，PPT共二十八页，创作于2022年6月 优点优点 简单便捷、广谱高效、无二次污染、便于治理
11、和实现自动化等优点。缺点缺点穿透能力弱特点第二十张，PPT共二十八页，创作于2022年6月材料普通琼脂平板普通琼脂平板18-24h18-24h细菌培养物细菌培养物紫外线灯等紫外线灯等第二十一张，PPT共二十八页，创作于2022年6月方 法 细菌接种于普通平板细菌接种于普通平板 皿盖盖住半边做对照，置紫皿盖盖住半边做对照，置紫外灯下约外灯下约30cm30cm处，照射处，照射3030分分钟。钟。培养培养第二十二张，PPT共二十八页，创作于2022年6月药物敏感试验 进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法、稀释进行药敏试验的方法主要有纸片扩散法、稀释法、抗生素浓度法、自动化仪器等。法、抗生素浓度法、自动
12、化仪器等。第二十三张，PPT共二十八页，创作于2022年6月标准纸片扩散法（）原理：将含抗生素的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂原理：将含抗生素的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂上，药物在琼脂中扩散，在药物浓度到达的范围内对上，药物在琼脂中扩散，在药物浓度到达的范围内对此药敏感的细菌不能生长而形成透明的抑菌圈。此药敏感的细菌不能生长而形成透明的抑菌圈。不同细菌形成的抑菌圈各不相同，抑菌圈的大小反映不同细菌形成的抑菌圈各不相同，抑菌圈的大小反映了测试菌对该药的敏感程度，并与该药物对测试菌的了测试菌对该药的敏感程度，并与该药物对测试菌的最低抑菌浓度（最低抑菌浓度（MICMIC）呈负相关。）呈负相关。第
13、二十四张，PPT共二十八页，创作于2022年6月材 料菌种：葡萄球菌、大肠杆菌菌液菌种：葡萄球菌、大肠杆菌菌液培养基：水解酪蛋白琼脂（培养基：水解酪蛋白琼脂（MHMH琼脂）琼脂）试剂：各种抗菌药物纸片（试剂：各种抗菌药物纸片（PENPEN、GENGEN、STRSTR、CHL)CHL)第二十五张，PPT共二十八页，创作于2022年6月方法 棉试蘸取试验菌涂抹在棉试蘸取试验菌涂抹在MHMH培培养基表面，均匀涂抹养基表面，均匀涂抹3 3次次 以无菌镊子取各抗生素纸片以无菌镊子取各抗生素纸片贴于表面贴于表面 培养培养各纸片中心距24mm,纸片距平板边缘应15mmPENGENSTRCHL第二十六张，PPT共二十八页，创作于2022年6月结果判断 量抑菌圈直径，量抑菌圈直径，参考试验指导表参考试验指导表3-63-6的标准判读结的标准判读结果，按果，按 敏感（敏感（S S）、）、中介（中介（I I）、）、耐药（耐药（R R）报告。）报告。第二十七张，PPT共二十八页，创作于2022年6月感感谢谢大大家家观观看看第二十八张，PPT共二十八页，创作于2022年6月