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1、第五章第四节尿糖尿酮体检查本讲稿第一页，共十六页一、尿糖检查一、尿糖检查n n尿糖？尿糖？尿糖？尿糖？健康人排出量健康人排出量健康人排出量健康人排出量 2.8 2.8 mmol/24hmmol/24h v出现糖尿的出现糖尿的3个因素：个因素：血糖浓度血糖浓度 肾小管对糖的重吸收能力肾小管对糖的重吸收能力 肾血流量和肾血流量和GFR本讲稿第二页，共十六页糖还原实验：糖还原实验：葡萄糖含有醛基在热碱性葡萄糖含有醛基在热碱性环境中可将环境中可将Cu2+还原为低价的氧化亚铜。还原为低价的氧化亚铜。1.尿液葡萄糖糖测定方法尿液葡萄糖糖测定方法本讲稿第三页，共十六页葡萄糖氧化酶试带法：葡萄糖氧化酶试带法：
2、葡萄糖葡萄糖+H2O 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶 葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸+H2O2 H2O2+色原剂色原剂 过氧化物酶过氧化物酶 有色物质有色物质 （常用的色源剂有邻联甲苯胺、碘化钾）（常用的色源剂有邻联甲苯胺、碘化钾）本讲稿第四页，共十六页本讲稿第五页，共十六页邻甲苯胺法邻甲苯胺法邻甲苯胺法邻甲苯胺法:(:(O-TBO-TB法法法法):):葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热,葡萄糖的醛葡萄糖的醛葡萄糖的醛葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺
3、基与邻甲苯胺缩合形成葡萄糖基胺,后者脱水生成席夫碱后者脱水生成席夫碱后者脱水生成席夫碱后者脱水生成席夫碱,再经结构重排再经结构重排再经结构重排再经结构重排,生成有色化合物生成有色化合物生成有色化合物生成有色化合物,在在在在630630nmnm有吸收峰。有吸收峰。有吸收峰。有吸收峰。本讲稿第六页，共十六页本讲稿第七页，共十六页q氧化酶试纸法阴性，还原实验法阳性氧化酶试纸法阴性，还原实验法阳性 试纸质量问题试纸质量问题 葡萄糖以外的其他还原糖葡萄糖以外的其他还原糖 尿液中含有较高浓度的还原性物质尿液中含有较高浓度的还原性物质 存在少量葡萄糖伴有高浓度的还原物质存在少量葡萄糖伴有高浓度的还原物质q氧
4、化酶试纸法阳性，还原实验法阴性氧化酶试纸法阳性，还原实验法阴性 尿液标本被过氧化物或者次氯酸盐污染尿液标本被过氧化物或者次氯酸盐污染尿糖测定结果分析：尿糖测定结果分析：本讲稿第八页，共十六页2.尿液其他糖的检验方法尿液其他糖的检验方法n n果糖：果糖：果糖与溶于强酸的间苯二酚溶液加热后显红色反果糖与溶于强酸的间苯二酚溶液加热后显红色反果糖与溶于强酸的间苯二酚溶液加热后显红色反果糖与溶于强酸的间苯二酚溶液加热后显红色反应。应。应。应。n半乳糖：半乳糖：与硝酸共热，可被氧化为白色的粘酸与硝酸共热，可被氧化为白色的粘酸 结晶。结晶。n 粘多糖：粘多糖：甲苯胺蓝法、十六烷三甲基溴化铵实验。甲苯胺蓝法、
5、十六烷三甲基溴化铵实验。n 戊糖：戊糖：戊糖与盐酸共沸后生成糠醛，再与二羟基甲苯戊糖与盐酸共沸后生成糠醛，再与二羟基甲苯 作用形成绿色化合物。作用形成绿色化合物。本讲稿第九页，共十六页3.尿液糖的纸层析法尿液糖的纸层析法在层析法中有固定相和流动相，两相间可做相对流动。在层析法中有固定相和流动相，两相间可做相对流动。在层析法中有固定相和流动相，两相间可做相对流动。在层析法中有固定相和流动相，两相间可做相对流动。当样品中各种糖随流动相通过固定相时，即反复发生吸当样品中各种糖随流动相通过固定相时，即反复发生吸当样品中各种糖随流动相通过固定相时，即反复发生吸当样品中各种糖随流动相通过固定相时，即反复发
6、生吸附、脱附、解析或其他亲和作用，由于各种糖在上述性附、脱附、解析或其他亲和作用，由于各种糖在上述性附、脱附、解析或其他亲和作用，由于各种糖在上述性附、脱附、解析或其他亲和作用，由于各种糖在上述性能上的差异而产生移动速度的差异，而相互分离。能上的差异而产生移动速度的差异，而相互分离。能上的差异而产生移动速度的差异，而相互分离。能上的差异而产生移动速度的差异，而相互分离。Rf=Rf=溶质斑点中心与起始点距离：溶剂前沿与起始点距离溶质斑点中心与起始点距离：溶剂前沿与起始点距离溶质斑点中心与起始点距离：溶剂前沿与起始点距离溶质斑点中心与起始点距离：溶剂前沿与起始点距离本讲稿第十页，共十六页4.尿糖检
7、查的临床意义尿糖检查的临床意义糖糖糖糖尿尿尿尿非葡萄糖尿非葡萄糖尿非葡萄糖尿非葡萄糖尿葡萄糖尿葡萄糖尿葡萄糖尿葡萄糖尿胰岛外性糖尿胰岛外性糖尿胰岛外性糖尿胰岛外性糖尿生理性糖尿生理性糖尿生理性糖尿生理性糖尿摄食性糖尿摄食性糖尿摄食性糖尿摄食性糖尿妊娠性糖尿妊娠性糖尿妊娠性糖尿妊娠性糖尿神经精神性糖尿神经精神性糖尿神经精神性糖尿神经精神性糖尿病理性糖尿病理性糖尿病理性糖尿病理性糖尿真性糖尿真性糖尿真性糖尿真性糖尿半乳糖尿半乳糖尿半乳糖尿半乳糖尿果糖尿果糖尿果糖尿果糖尿戊糖尿戊糖尿戊糖尿戊糖尿其他糖尿其他糖尿其他糖尿其他糖尿本讲稿第十一页，共十六页 二二、尿液酮体检查尿液酮体检查酮体：脂肪酸分解代
8、谢的中间产物酮体：脂肪酸分解代谢的中间产物 丙酮丙酮丙酮丙酮（CHCH3 3COCHCOCH3 3）乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸（CHCH3 3COCHCOCH2 2COOHCOOH）-羟丁酸羟丁酸（CHCH3 3CHCH（OHOH）CHCH2 2COOHCOOH）2424小时排泄量：小时排泄量：小时排泄量：小时排泄量：丙酮丙酮丙酮丙酮33mgmg；乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸99mgmg；-羟丁酸羟丁酸羟丁酸羟丁酸55mg 本讲稿第十二页，共十六页1.尿液酮体检查方法尿液酮体检查方法n nLangeLange法：法：法：法：n nRothera改良法改良法n n试纸法试纸法 尿中丙酮
9、和乙酰乙酸在碱性溶液中与亚硝基铁尿中丙酮和乙酰乙酸在碱性溶液中与亚硝基铁尿中丙酮和乙酰乙酸在碱性溶液中与亚硝基铁尿中丙酮和乙酰乙酸在碱性溶液中与亚硝基铁氰化钠反应生成紫色化合物。氰化钠反应生成紫色化合物。氰化钠反应生成紫色化合物。氰化钠反应生成紫色化合物。注意事项：注意事项：注意事项：注意事项：1.1.标本新鲜；标本新鲜；标本新鲜；标本新鲜；2.2.该法对该法对该法对该法对乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸的灵敏的灵敏的灵敏的灵敏度最高，度最高，度最高，度最高，-羟丁酸不反应。羟丁酸不反应。本讲稿第十三页，共十六页尿中乙酰乙酸的检测：尿中乙酰乙酸的检测：尿中乙酰乙酸的检测：尿中乙酰乙酸的检测：（
10、GerhardtGerhardt法）法）法）法）vv试验原理：尿液中的乙酰乙酸与氯化高铁作用形成赭红色试验原理：尿液中的乙酰乙酸与氯化高铁作用形成赭红色试验原理：尿液中的乙酰乙酸与氯化高铁作用形成赭红色试验原理：尿液中的乙酰乙酸与氯化高铁作用形成赭红色乙酰乙酸铁化合物。乙酰乙酸铁化合物。乙酰乙酸铁化合物。乙酰乙酸铁化合物。vv该法对乙酰乙酸测定的敏感度为该法对乙酰乙酸测定的敏感度为该法对乙酰乙酸测定的敏感度为该法对乙酰乙酸测定的敏感度为700700mg/Lmg/L，尿液久置后尿液久置后尿液久置后尿液久置后乙酰乙酸可转变为丙酮，使结果偏低。乙酰乙酸可转变为丙酮，使结果偏低。乙酰乙酸可转变为丙酮，
11、使结果偏低。乙酰乙酸可转变为丙酮，使结果偏低。vv尿液中的酚类、安替比林、水杨酸盐和重碳酸钠等药物可尿液中的酚类、安替比林、水杨酸盐和重碳酸钠等药物可尿液中的酚类、安替比林、水杨酸盐和重碳酸钠等药物可尿液中的酚类、安替比林、水杨酸盐和重碳酸钠等药物可呈假阳性反应。呈假阳性反应。呈假阳性反应。呈假阳性反应。本讲稿第十四页，共十六页-羟丁酸检测：羟丁酸检测：-羟丁酸羟丁酸+NAD 乙酰乙酸乙酰乙酸+NADH 在乳酸脱氢酶抑制剂存在下，加入在乳酸脱氢酶抑制剂存在下，加入-羟丁酸脱氢酶和羟丁酸脱氢酶和NAD，测定测定340nm NADH增加的速度。增加的速度。-羟丁酸羟丁酸 脱氢酶脱氢酶意义：意义：意
12、义：意义：-羟丁酸的肾阈比较高，如尿中出现较多羟丁酸的肾阈比较高，如尿中出现较多-羟羟丁酸。表明酮血症加重。丁酸。表明酮血症加重。本讲稿第十五页，共十六页2.尿液酮体检查临床意义尿液酮体检查临床意义n n健康人尿中酮体含量甚微。健康人尿中酮体含量甚微。n n尿中酮体增加时，称为尿中酮体增加时，称为尿中酮体增加时，称为尿中酮体增加时，称为酮尿酮尿。常见于未控制的糖尿。常见于未控制的糖尿。常见于未控制的糖尿。常见于未控制的糖尿病、运动、寒冷刺激、饥饿、呕吐、痢疾等。病、运动、寒冷刺激、饥饿、呕吐、痢疾等。病、运动、寒冷刺激、饥饿、呕吐、痢疾等。病、运动、寒冷刺激、饥饿、呕吐、痢疾等。n n乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸是酮尿的主要成分，且在以亚硝基铁氰化是酮尿的主要成分，且在以亚硝基铁氰化是酮尿的主要成分，且在以亚硝基铁氰化是酮尿的主要成分，且在以亚硝基铁氰化纳反应为基础的检查法中反应率最高，故尿中酮体纳反应为基础的检查法中反应率最高，故尿中酮体纳反应为基础的检查法中反应率最高，故尿中酮体纳反应为基础的检查法中反应率最高，故尿中酮体定性即为定性即为定性即为定性即为乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸乙酰乙酸定性。定性。定性。定性。n n-羟丁酸羟丁酸羟丁酸羟丁酸的肾阈较高，如尿中出现多量的肾阈较高，如尿中出现多量-羟丁羟丁酸，常说明酮血症加重。酸，常说明酮血症加重。本讲稿第十六页，共十六页