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1、关于尿液理学蛋白本周蛋白尿糖检测试验第一张,PPT共三十六页,创作于2022年6月尿尿液液形形成成过过程程示示意意图图第二张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 容器容器1、一般检查:清洁干燥2 2、细菌培养:有盖无菌大试管3 3、24小时尿:清洁干燥的大口瓶 常规检查可随时留取,但晨尿较浓缩、偏酸性,病理成分多且完整,可提高检查的阳性率。尿液保存尿液保存1、冷藏2、立即送检,夏季1h,冬季 2500 ml/24h 少尿:400 ml/24h 无尿:1.020,随机尿,随机尿1.0031.030 新生儿:新生儿:1.0021.004 临床意义:反映临床意义:反映肾小管肾小管的的浓缩稀释浓缩
2、稀释功能功能比重慢性肾衰竭、尿崩症急性肾小球肾炎、心力衰竭、高热、脱水、出汗过多尿少尿多糖尿病第十四张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 【注意事项】注意事项】1尿比重计通过校正后才能使用。2尿液要求新鲜;尿液过少不足以浮起比重计时。3因低温所致的尿酸或其他盐类沉淀可水浴(37)使其溶解,待尿液温度降至比重计所标定的温度时即可测定。4尿液面应消除泡沫;比重计浮标要垂直悬浮于尿液中;读取比密值要准确。5校正结果 要进行蛋白尿、糖尿和温度的校正。6每次测定完毕都需用纯净水冲洗比重计,若有蛋白质及盐类物质沉积时,需用清洁液洗净后使用。第十五张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 【原理】【
3、原理】pH广泛试纸是多种指示剂混合的试带,灵敏度约为pH1.0,显色范围为棕红至深黑色,试带蘸取尿液后即可显色,然后与标准色板比较即可测得尿液pH近似值 四、尿酸碱度四、尿酸碱度pHpH试纸法测定试纸法测定第十六张,PPT共三十六页,创作于2022年6月【操作】【操作】1.1.取试纸取试纸 2.2.浸尿浸尿 3.3.读取结果读取结果 4.4.报告方式报告方式第十七张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 参考值参考值 新鲜晨尿pH值在5.56.5,平均值6.0 新鲜随机尿pH值在4.58.0 久置可变碱性 临床意义临床意义PH值酸中毒、发热、糖尿病、痛风或服用氯化铵等药物后碱中毒、尿潴留、肾
4、小管酸中毒、服用碱性药物后第十八张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 【注意事项】【注意事项】1.1.试带试带 应避光,密封与干燥保存,远离酸性和碱性物质,以防失效2.2.标本标本 应新鲜,放置过久会因挥发性酸丧失或细菌繁殖而使pH增高,标本不能使用防腐剂,否则可能会影响检测结果3.3.比色时间比色时间 应在规定的时间内比色第十九张,PPT共三十六页,创作于2022年6月第二节第二节 尿尿蛋白蛋白定性检查定性检查 【原理】【原理】生物碱试剂磺基水杨酸,在酸性条件下,其磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性蛋白盐沉淀。磺基水杨酸法第二十张,PPT共三十六页,创作于2022年6月【
5、操作】1.调pH:使尿液PH值在56 2.加尿液:取2支试管,加入1ml尿液 3.加试剂:第一支试管加试剂2滴,轻混 匀,另 一支试管不加做对照 4.判断结果:1min内观察结果 1第二十一张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 优点优点:简便快速,灵敏度高0.05-0.1g/L;缺点缺点:与清/球/本周蛋白反应;假阳性。干化学法的参考方法,NCCLS推荐的 确证实验。【评价】【评价】尿液中蛋白质含量150mg/24h 尿中蛋白质浓度100mg/L 蛋白定性为阳性,即蛋白尿。1.1.蛋白尿蛋白尿 (proteinuria,PROproteinuria,PRO)第二十二张,PPT共三十六页,
6、创作于2022年6月【干扰因素】【干扰因素】干 扰 因 素假阳性高浓度尿酸、尿酸盐、草酸盐碘造影剂、大剂量青霉素混入生殖系统分泌物假阴性pH 9 或 3第二十三张,PPT共三十六页,创作于2022年6月【注意事项】【注意事项】1.标本标本:尿液明显混浊,先离心或过滤。患者应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺、含 碘造影剂时,应告知结果可能产生假阳性。正确采集中段尿,避免混有生殖系统分泌物。2.调调pH pH 本法在尿液偏碱或偏酸时(pH9,pH3)可呈 假阴性,检测前先测试尿pH(56).3掌握好结果判断时间,对于微弱阳性的判断,可选用黑色衬纸作背景,以提高分辨力。第二十四张,PPT共三十六页
7、,创作于2022年6月第三节第三节 尿本周蛋白定性检查尿本周蛋白定性检查一、凝溶法一、凝溶法【原理】【原理】本周蛋白在pH4.90.1条件下,加热至 4060时可发生凝固,温度升至90100时沉淀消失,当温度降低恢复至4060时又可重新凝固。第二十五张,PPT共三十六页,创作于2022年6月【操作】(详见实验课本【操作】(详见实验课本 P90 P90)1标本处理 2加入试剂 3观察结果 4验证结果 第二十六张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 【注意事项】【注意事项】1收集已诊断轻链疾病患者的尿液做此试验。尿液新鲜,减少清蛋白、球蛋白分解变性产生的干扰。混浊尿液须先离心取上清液。2严格控
8、制或调节pH,凝溶法最适pH为4.55.5。3煮沸过滤时,动作迅速,保持高温,不要振荡,防止BJP夹杂于其他沉淀蛋白中被过滤除掉而造成假阴性。过滤用漏斗、滤纸、试管等用品,需保持高温状态,以避免温度降低使BJP凝固。4凝溶法特异性高,操作繁琐、费时,灵敏度低(0.32.0)g/L。5.操作时一定注意安全!第二十七张,PPT共三十六页,创作于2022年6月二、对二、对-甲苯磺酸法甲苯磺酸法【原理】【原理】对-甲苯磺酸能沉淀相对分子质量较小的本周蛋白,而对相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应。第二十八张,PPT共三十六页,创作于2022年6月【操作】【操作】1.1.加尿液加尿液:取2支试管,分
9、别加尿液1ml 2.2.加试剂加试剂:测定管加0.5ml试剂,对照管加 0.5ml冰醋酸,轻混匀静置5min 3.3.观察结果观察结果:阳性阳性:测定管浑浊加重或有沉淀,对照管清晰透明或轻度浑浊 阴性阴性:测定管清晰透明或与对照管相似第二十九张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 【注意事项】【注意事项】1收集已诊断轻链疾病患者的尿液做此试验。尿液应新鲜,混浊尿液须先行离心取上清液。服用利福平类抗结核药物患者可能出现周蛋白假阳性。2尿液中其他球蛋白5.0g/L可出现假阳性,需进行验证。如果尿液中本周蛋白含量低,则需先对尿液进行浓缩。第三十张,PPT共三十六页,创作于2022年6月第四节第四
10、节 尿葡萄糖班氏法定性检查尿葡萄糖班氏法定性检查【原理】【原理】CuCu2+2+-CuCu+蓝色蓝色 黄色黄色至砖红色至砖红色.简易步骤简易步骤:班氏试剂1ml(煮沸不变色)+尿4滴煮沸1-2min 冷却后观察.碱性条件碱性条件+葡萄糖葡萄糖第三十一张,PPT共三十六页,创作于2022年6月操作:操作:ml班氏试剂,加热试管底部,煮沸,观察,再加尿液2滴,继续煮沸min,冷却后观察结果。结果判断:结果判断:1.蓝色不变:-2.蓝中略带绿无沉淀:+/-3.绿色有少许黄绿色沉淀:+4.较多黄绿色沉淀:+5.土黄色浑浊,大量沉淀:+6.大量红棕/砖红色沉淀:+第三十二张,PPT共三十六页,创作于20
11、22年6月【干扰因素干扰因素】标本因素标本因素假阳性:还原性糖假阳性:还原性糖假阴性:假阴性:大量铵盐,预先加碱煮沸大量铵盐,预先加碱煮沸 去氨后再检验;去氨后再检验;蛋白蛋白0.5g/L,0.5g/L,加热乙酸法加热乙酸法去蛋白取滤液检验去蛋白取滤液检验;药物因素药物因素假阳性:假阳性:VitCVitC,青青/链霉素链霉素,头孢菌素头孢菌素,异异烟肼烟肼,水杨酸盐水杨酸盐,氨苄西林氨苄西林【评价评价】缺乏特异性,灵敏度低第三十三张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 【注意事项】【注意事项】1、试剂与尿液的比例为101。2、煮混时应不时摇动试管以防爆沸喷出,试管口朝向无人处。3、检验糖尿
12、病患者尿液中葡萄糖,空腹或餐后2h留取尿标本。4、大量铵盐,易致假阴性,应预先加碱煮沸去氨后再检验。5、蛋白0.5g/L,易致假阴性,加热乙酸法去蛋白取滤液检验。6、VitC,青/链霉素,头孢菌素,异烟肼,水杨酸盐,氨苄西林等 药物易致假阳性,应停药一段时间再行检测。第三十四张,PPT共三十六页,创作于2022年6月 【实验报告格式】【实验报告格式】一、实验原理一、实验原理二、器材与试剂二、器材与试剂三、操作步骤三、操作步骤四、实验结果与分析四、实验结果与分析(实验报告的重点内容,具体分析自己所做的实验结果,结果与书本原理不相符时,到底什么原因自己要去思考分析)五、注意事项五、注意事项第三十五张,PPT共三十六页,创作于2022年6月感感谢谢大大家家观观看看第三十六张,PPT共三十六页,创作于2022年6月9/19/2022