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1、关于血球计数板使用及相关计算第1页，讲稿共10张，创作于星期三第2页，讲稿共10张，创作于星期三第3页，讲稿共10张，创作于星期三血球计数板的使用方法步骤血球计数板的使用方法步骤1镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；物，则需清洗，吹干后才能进行计数；2加样品。将清洁干燥的血球计数板的加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次
2、性养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室充满计数室，防止产生气泡，多余培养，防止产生气泡，多余培养液可用滤纸吸去；液可用滤纸吸去；3计数。稍待片刻（约计数。稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。第4页，讲稿共10张，创作于星期三1每天每天同一时间同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，菌个数，
3、并作记录，连续观察连续观察7天天。2从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡震荡几下，这几下，这样使酵母菌分布均匀，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。样使酵母菌分布均匀，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。3如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀释稀释。具体方法是：摇匀试管，取。具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养液，加入成酵母菌培养液，加入成倍的无菌水稀释，稀释倍的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。以
4、每小方格内含有以稀释倍数。以每小方格内含有45个酵母细胞为宜。个酵母细胞为宜。4活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。个酵母细胞。第5页，讲稿共10张，创作于星期三5对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右线数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，另的原则处理，另两边不计数。两边不计数。6计数一个样品要从
5、计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值两个计数室中计得的平均数值来计算，对每来计算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。个样品可计数三次，再取其平均值。7血球计数板的清洁血球计数板的清洁血球计数板使用后，用血球计数板使用后，用自来水冲洗自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾自行晾干干或用吹风机或用吹风机吹干吹干，或用，或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。物。若不干净，则必须重复清
6、洗直到干净为止。第6页，讲稿共10张，创作于星期三例例1、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为、通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数，若计数室为1mm1mm0.1mm方格，由方格，由400个小方格组成，如果一个小方格个小方格组成，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先内酵母菌过多，难以计数，应先 后再计数。若多次重复计数后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则个酵母菌，则10mL该培养液中酵该培养液中酵母菌总数有母菌总数有 个。个。（参考答案：稀释；（参考答案：稀释；2108）540010000102108。第7页，讲稿
7、共10张，创作于星期三例例2、检测员将检测员将1 mL水样稀释水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为个小格组成，容纳液体的总体积为01 mm3。现观察到图中该计数室所示现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格个中格80个小格内共个小格内共有蓝藻有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻个，则上述水样中约有蓝藻 个个mL。（参考答案：（参考答案：5n105 ）第8页，讲稿共10张，创作于星期三感感谢谢大大家家观观看看第10页，讲稿共10张，创作于星期三