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1、关于蛋白质结构与功能的关系第1页，讲稿共53张，创作于星期三第一节第一节 肌红蛋白的结构与功能肌红蛋白的结构与功能 第二节第二节 血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能 第三节第三节 血红蛋白的分子病血红蛋白的分子病 第四节第四节 免疫球蛋白免疫球蛋白 第2页，讲稿共53张，创作于星期三第一节第一节 肌红蛋白的结构与功能肌红蛋白的结构与功能第3页，讲稿共53张，创作于星期三一一.肌红蛋白的三级结构肌红蛋白的三级结构 第4页，讲稿共53张，创作于星期三二血红素（铁卟啉）的结构二血红素（铁卟啉）的结构 原卟啉原卟啉IXIX血红素血红素第5页，讲稿共53张，创作于星期三三三O O2 2与肌红蛋白的
2、结合与肌红蛋白的结合 近侧近侧HisHis第6页，讲稿共53张，创作于星期三第7页，讲稿共53张，创作于星期三第8页，讲稿共53张，创作于星期三四四O O2 2的结合改变肌红蛋白的构象的结合改变肌红蛋白的构象第9页，讲稿共53张，创作于星期三五肌红蛋白结合氧的定量分析（氧结合曲线）五肌红蛋白结合氧的定量分析（氧结合曲线）Y第10页，讲稿共53张，创作于星期三蛋白质的结构四级结构第二节第二节 血红蛋白的结构与功能血红蛋白的结构与功能 第11页，讲稿共53张，创作于星期三一一.血红蛋白的结构血红蛋白的结构 第12页，讲稿共53张，创作于星期三二氧结合引起的血红蛋白构象变化二氧结合引起的血红蛋白构象
3、变化 第13页，讲稿共53张，创作于星期三第14页，讲稿共53张，创作于星期三三血红蛋白的协同性氧结合（三血红蛋白的协同性氧结合（HbHb氧结合曲线）氧结合曲线）第15页，讲稿共53张，创作于星期三Log(Y/1-Y)=n logL-log Kd第16页，讲稿共53张，创作于星期三第17页，讲稿共53张，创作于星期三Y四四H H+、COCO2 2 和和 BPG BPG 对血红蛋白结合氧的影响对血红蛋白结合氧的影响1.Bohrs effect1.Bohrs effect第18页，讲稿共53张，创作于星期三2.BPG2.BPG降低降低HbHb对对O O2 2的亲和力的亲和力第19页，讲稿共53张，
4、创作于星期三第20页，讲稿共53张，创作于星期三Y第21页，讲稿共53张，创作于星期三第三节第三节 血红蛋白分子病血红蛋白分子病 分分子子病病（molecular molecular diseasesdiseases）由由于于基基因因突突变变导导致致蛋蛋白白质质分分子子在在数数量量或或结结构构上上产产生生异异常常，从从而而引引起起机机体体一一系系列列病病理理变变化化，并并产产生生功功能能障障碍碍的的一一类类疾疾病病称称为为分分子子病病。实实际际上上任任何何由由遗遗传传原原因因引引起起的的蛋蛋白白质质功功能能异异常常所所带带来来的的疾疾病病都都是是分分子子病病，但但习习惯惯上上把把酶酶蛋蛋白白分
5、分子子催催化化功功能能异异常常引引起起的的疾疾病病归归属属于于先先天天性性代代谢谢缺缺陷陷.而而把把除除了了酶酶蛋蛋白白以以外外的的其其他蛋白质异常引起的疾病称为他蛋白质异常引起的疾病称为分子病分子病。血红蛋白分子病血红蛋白分子病 血浆蛋白分子病血浆蛋白分子病 免疫缺陷分子病免疫缺陷分子病 受体蛋白分子病受体蛋白分子病 膜蛋白分子病膜蛋白分子病 分子病分子病 (根据异常蛋白的功能和分布分为根据异常蛋白的功能和分布分为)第22页，讲稿共53张，创作于星期三 血血红红蛋蛋白白病病（hemoglobinopathyhemoglobinopathy）是是由由于于血血红红蛋蛋白白分分子子合成异常而引起的
6、疾病。合成异常而引起的疾病。异常血红蛋白病异常血红蛋白病:地中海贫血综合征地中海贫血综合征:由于由于珠蛋白基因珠蛋白基因异常而导致合成异常而导致合成的珠蛋白肽链结构与功能发生异的珠蛋白肽链结构与功能发生异常。如常。如:镰状细胞贫血症镰状细胞贫血症 珠蛋白基因缺失或缺陷而致珠蛋珠蛋白基因缺失或缺陷而致珠蛋白肽链合成速率降低。白肽链合成速率降低。血红蛋白病血红蛋白病第23页，讲稿共53张，创作于星期三镰刀状细胞贫血症镰刀状细胞贫血症 第24页，讲稿共53张，创作于星期三 镰刀状细胞贫血病：镰刀状细胞贫血病：Hb-AHb-A（正常人）：正常人）：Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu
7、-LysVal-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-LysHb-SHb-S（患者）：患者）：Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-LysVal-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys-链链 1 2 3 4 5 6 7 8 蛋白质的一级结构与分子病蛋白质的一级结构与分子病第25页，讲稿共53张，创作于星期三第26页，讲稿共53张，创作于星期三第27页，讲稿共53张，创作于星期三地中海贫血地中海贫血 （ThalassemiaThalassemia）：链合成缺陷链合成缺陷 ：链合成缺陷链合成缺陷 地中海贫血地中海贫血 地中海贫血地中海贫血地中海贫血地中海
8、贫血0 0地贫地贫：链完全不能合成链完全不能合成 地贫地贫：链有部分能合成链有部分能合成 地中海贫血地中海贫血0 0地贫地贫：链完全不能合成链完全不能合成 地贫地贫：链有部分能合成链有部分能合成 地中海贫血地中海贫血第28页，讲稿共53张，创作于星期三第四节第四节 免疫球蛋白免疫球蛋白 体液免疫系统体液免疫系统细胞免疫系统细胞免疫系统记忆记忆B B细胞细胞效应效应B B细胞细胞记忆记忆T T细胞细胞效应效应T T细胞细胞分化分化第29页，讲稿共53张，创作于星期三第30页，讲稿共53张，创作于星期三第31页，讲稿共53张，创作于星期三一一.免疫球蛋白的分类免疫球蛋白的分类：IgGIgG、IgA
9、IgA、IgMIgM、IgDIgD和和IgEIgE五五个类别。个类别。分子量：分子量：1515万万9595万万DaDa（见（见表表6-26-2）。）。所有所有C CL L都由都由和和类型之一构类型之一构成。成。C CH H每种都只由每种都只由（IgGIgG）、）、（IgAIgA）、）、（IgMIgM）、）、（IgDIgD）、）、（IgEIgE）之一组成。）之一组成。、和和长约长约330AA330AA，和和长约长约440AA 440AA IgMIgM第32页，讲稿共53张，创作于星期三二二.免疫球蛋白的结构免疫球蛋白的结构A.A.A.A.基本结构基本结构基本结构基本结构 (一一)重链重链重链重链
10、（heavy chainheavy chain，H H H H）2 2 2 2条条 轻链轻链轻链轻链（light chainlight chainlight chainlight chain，L L L L）2 2 2 2条条条条 (二二二二)可变区（可变区（variable region,Vvariable region,Vvariable region,Vvariable region,V区）区）恒定区恒定区恒定区恒定区（constant region,Cconstant region,Cconstant region,Cconstant region,C区）区）区）区）(三三)超变区超变
11、区超变区超变区（hyperhyperhyperhyper-variable region,HVRvariable region,HVR),又称又称互互互互补决定补决定补决定补决定区区区区(complementarcomplementarcomplementarcomplementary y determining regiondetermining region,CDR,CDR,CDR,CDR）骨架区骨架区骨架区骨架区（framework region,FRframework region,FR）(四四四四)铰链区铰链区铰链区铰链区（hinge regionhinge region）第33页，
12、讲稿共53张，创作于星期三CDR1,CDR2,CDR3,CDR=complementarity determining region第34页，讲稿共53张，创作于星期三第35页，讲稿共53张，创作于星期三B.B.功能区（功能区（功能区（功能区（domaindomain）轻链轻链:V V V VL L，C C C CL L 重链重链:V:VH H H H，C C C CH H H H1 1 1 1，C C C CH H H H2 2 2 2，C CH H H H3 3 3 3(IgGIgGIgGIgG、IgAIgA 和和和和IgDIgDIgDIgD)多一个多一个多一个多一个C C C CH H4
13、 4 4 4（IgMIgMIgMIgM和和IgEIgE）第36页，讲稿共53张，创作于星期三第37页，讲稿共53张，创作于星期三第38页，讲稿共53张，创作于星期三第39页，讲稿共53张，创作于星期三第40页，讲稿共53张，创作于星期三第41页，讲稿共53张，创作于星期三第42页，讲稿共53张，创作于星期三 三三.IgG.IgG的的水解片段水解片段 木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶（PapainPapain）IgGIgG FabFab段段(fragment of antigen-fragment of antigen-binding,binding,抗原结合片段抗原结合片段)FcFc段段（fragment
14、 crystalizable,fragment crystalizable,可结晶片段）可结晶片段）胃蛋白酶胃蛋白酶（PepsinPepsin）IgGIgG F F(abab)2 2 pFc pFc 意义：阐明意义：阐明IgGIgG分子生物学作用；分子生物学作用；构建基因工程抗体。构建基因工程抗体。第43页，讲稿共53张，创作于星期三第44页，讲稿共53张，创作于星期三四基于抗体四基于抗体抗原相互作用抗原相互作用的生化分析方的生化分析方法法 第45页，讲稿共53张，创作于星期三1.1.酶联免疫吸附测定酶联免疫吸附测定(ELISA)(ELISA)第46页，讲稿共53张，创作于星期三第47页，讲稿
15、共53张，创作于星期三第48页，讲稿共53张，创作于星期三2.2.免疫印迹测定免疫印迹测定(Western Blot)(Western Blot)第49页，讲稿共53张，创作于星期三第50页，讲稿共53张，创作于星期三第51页，讲稿共53张，创作于星期三Each hybridoma line can produce pure single antibody,called monoclonal antibody.1234mmmm12341234MonoclonalantibodiesCell fusionSpleen cellsMyelomaxAntiseumAntigenImmunizationA mixture of all Ab1 23412341 234B cell五五.单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备+第52页，讲稿共53张，创作于星期三感感谢谢大大家家观观看看第53页，讲稿共53张，创作于星期三