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1、关于微生物细胞大小的测定第1页,讲稿共17张,创作于星期日一、目的要求一、目的要求 了了解解目目镜镜测测微微尺尺和和镜镜台台测测微微尺尺的的构构造造和和使使用用原原理理;掌掌握握微微生生物物细细胞胞大大小小的的测测定定方法。方法。第2页,讲稿共17张,创作于星期日二、基本原理二、基本原理 微微生生物物细细胞胞大大小小,是是微微生生物物的的形形态态特特征征之之一一,也也是是分分类类鉴鉴定定的的依依据据之之一一。由由于于菌菌体体很很小小,只只能能在在显显微微镜镜下下测测量量。用用来来测测量量微微生生物物细细胞胞大大小小的的工工具具有有目目镜镜测测微微尺(图尺(图3)和镜台测微尺(图)和镜台测微尺(
2、图4)。)。第3页,讲稿共17张,创作于星期日目目镜镜测测微微尺尺(图图3,A)是是一一块块可可放放在在接接目目镜镜内内的的隔隔板板上上的的圆圆形形小小玻玻片片,其其 中中 央央 刻刻 有有 精精 确确 的的 刻刻 度度,有有 等等 分分50小小 格格 或或100小小格格两两种种,每每5小小格格间间有有一一长长线线相相隔隔。由由于于所所用用接接目目镜镜放放大大倍倍数数和和接接物物镜镜放放大大倍倍数数的的不不同同,目目镜镜测测微微尺尺每每小小格格所所代代表表的的实实际际长长度度也也就就不不同同,因因此此,目目镜镜测测微微尺尺不不能能直直接接用用来来测测量量微微生生物物的的大大小小,在在使使用用前
3、前必必须须用用镜镜台台测测微微尺尺进进行行校校正正,以以求求得得在在一一定定放放大大倍倍数数的的接接目目镜镜和和接接物物镜镜下下该该目目镜镜测测微微尺尺每每小小格格的的相相对对值值,然然后后才才可可用用来测量微生物的大小。来测量微生物的大小。第4页,讲稿共17张,创作于星期日第5页,讲稿共17张,创作于星期日镜镜台台测测微微尺尺(图图4)是是中中央央部部分分刻刻有有精精确确等等分分线线的的载载玻玻片片。一一般般将将1mm等等分分为为100格格(2 mm等等分分为为200格格),每每格格长长度度等等于于0.01mm(即即10m),是是专专用用于于校校正正目目镜镜测测微微尺每格长度的。尺每格长度的
4、。第6页,讲稿共17张,创作于星期日图图图图 4 4 4 4 目测微尺和镜台测微尺目测微尺和镜台测微尺目测微尺和镜台测微尺目测微尺和镜台测微尺 目镜测微尺目镜测微尺目镜测微尺目镜测微尺镜台测微尺镜台测微尺镜台测微尺镜台测微尺镜台测微尺的中心部放大镜台测微尺的中心部放大镜台测微尺的中心部放大镜台测微尺的中心部放大镜台测微尺标实目镜测微尺时两者重叠镜台测微尺标实目镜测微尺时两者重叠镜台测微尺标实目镜测微尺时两者重叠镜台测微尺标实目镜测微尺时两者重叠 A.A.A.A.目镜测微尺目镜测微尺目镜测微尺目镜测微尺 B.B.B.B.镜台测微尺镜台测微尺镜台测微尺镜台测微尺第7页,讲稿共17张,创作于星期日三
5、、器材三、器材 酿酿酒酒酵酵母母(Saccharomyces cerevisiae)斜斜面面菌菌种种,目目镜镜测测微微尺尺,镜镜台台测测微微尺尺,显显微微镜镜,擦擦镜镜纸纸,香香柏柏油油,二甲苯等。二甲苯等。第8页,讲稿共17张,创作于星期日四、操作步骤四、操作步骤 1目镜测微尺的标定目镜测微尺的标定(1)放放 置置 目目 镜镜 测测 微微 尺尺 取取 出出 接接 目目 镜镜,旋旋 开开 接接 目目 镜镜 透透 镜镜,将将 目目 镜镜 测测 微微 尺尺 的的 刻刻 度度 朝朝 下下 放放 在在 接接 目目 镜镜 筒筒 内内 的的 隔隔 板板 上上(图图3,B),然然后后旋旋上上接接目目透透镜镜
6、,最最后后将将此此接接目目镜镜插插入入镜镜筒筒内内(图(图3,C)。)。(2)放放置置镜镜台台测测微微尺尺 将将镜镜台台测测微微尺尺置置于于显显微微镜镜的的载载物物台台上上,使使刻刻度度面面朝上。朝上。第9页,讲稿共17张,创作于星期日(3)校正目镜测微尺)校正目镜测微尺 先先用用低低倍倍镜镜观观察察,对对准准焦焦距距,当当看看清清镜镜台台测测微微尺尺后后,转转动动接接目目镜镜,使使目目镜镜测测微微尺尺的的刻刻度度与与镜镜台台测测微微尺尺的的刻刻度度平平行行,移移动动推推动动器器,使使目目镜镜测测微微尺尺和和镜镜台台测测微微尺尺的的某某一一区区间间的的两两对对刻刻度度线线完完全全重重合合,然然
7、后后计计数数出出两两对对重重合合线线之之间间各各自自所所占占的的格格数数。例例如如图图4中中A(目目镜镜测测微微尺尺)上上5格格对对准准B镜镜台台测测微微尺尺上上的的2格格,B的的 1格格 为为 10m,2格格 的的 长长 度度 为为20m,所以目镜测微尺上所以目镜测微尺上1小格的长度为小格的长度为4m。第10页,讲稿共17张,创作于星期日根根据据计计数数得得到到的的目目镜镜测测微微尺尺和和镜镜台台测测微微尺尺重重合合线线之之间间各各自自所所占占的的格格数数,通通过过如如下下公公式式换换算算出出目目镜镜测微尺每小格所代表的实际长度:测微尺每小格所代表的实际长度:目目 镜镜 测测 微微 尺尺 每
8、每 小小 格格 长长 度度(m)=(两两 对对 重重 合合 线线 间间 镜镜 台台 测测 微微 尺尺 格格 数数 10)/两对重合线间目镜测微尺格数两对重合线间目镜测微尺格数同同法法校校正正在在高高倍倍镜镜和和油油镜镜下下目目镜镜测测微微尺尺每每小小格格所所代代表的长度。表的长度。第11页,讲稿共17张,创作于星期日2菌体大小的测定菌体大小的测定(1)将酵母菌斜面制成一定浓度的菌悬液()将酵母菌斜面制成一定浓度的菌悬液(10-2)。)。(2)取一滴酵母菌菌悬液制成水浸片。)取一滴酵母菌菌悬液制成水浸片。(3)移移去去镜镜台台测测微微尺尺,换换上上酵酵母母菌菌水水浸浸片片,先先在在低低倍倍镜镜下
9、下找找到到目目的的物物,然然后后在在高高倍倍镜镜下下用用目目镜镜测测微微尺尺来来测测量量酵酵母母菌菌菌菌体体的的长长,宽宽各各占占几几格格(不不足足一一格格的的部部分分估估计计到到小小数数点点 后后 一一 位位 数数)。测测 出出 的的 格格 数数 乘乘 上上 目目 镜镜 测测 微微 尺尺 每每格格的的校校正正值值,即即等等于于该该菌菌的的长长和和宽宽。一一般般测测量量菌菌体体的的 大大 小小 要要 在在 同同 一一 个个 标标 本本 片片 上上 测测 定定10-20个个菌菌体体,求求出出平平均均值值,才才能能代代表表该该菌菌的的大大小小。而而且且一一般般是用对数生长期的菌体进行测定。是用对数
10、生长期的菌体进行测定。第12页,讲稿共17张,创作于星期日3取取出出目目镜镜测测微微尺尺,将将接接目目镜镜放放回回镜镜筒筒,再再将将目目镜镜测测微微尺尺和和镜镜台台测测微微尺尺分分别别用擦镜纸擦试后,放回盒内保存。用擦镜纸擦试后,放回盒内保存。第13页,讲稿共17张,创作于星期日五、实验报告五、实验报告 1将目镜测微尺校正结果填入下表。将目镜测微尺校正结果填入下表。接物镜接物镜 接物镜倍接物镜倍数数 目镜测微尺格目镜测微尺格数数 镜台测微尺格镜台测微尺格数数 目镜测微尺每格目镜测微尺每格代表的长度代表的长度(mm)低倍镜低倍镜 高倍镜高倍镜 油油 镜镜 接目镜倍数接目镜倍数 _第14页,讲稿共
11、17张,创作于星期日2在高倍镜和油镜下测量在高倍镜和油镜下测量酵母酵母菌大小,将结果填入下表。菌大小,将结果填入下表。菌菌体体编编号号长(长(m)宽(宽(m)菌体大小(平均值)菌体大小(平均值)长长宽(宽(m)目镜测微目镜测微尺格数尺格数菌体长度菌体长度目镜测微目镜测微尺格数尺格数菌体宽度菌体宽度12345678910注:结果计算注:结果计算 长长/m/m平均格数平均格数 校正值;宽校正值;宽/m/m平均格数平均格数 校正值;校正值;大小表示为宽大小表示为宽大小表示为宽大小表示为宽/m/m长长长长/m/m第15页,讲稿共17张,创作于星期日3当当接接目目镜镜不不变变,目目镜镜测测微微尺尺也也不不变变,只只改改变变接接物物镜镜,目目镜镜测测微微尺尺每每格格所所量量的的镜镜台台上上物物体体的的实实际际长长度度是是否否相相同同?为为什什么?么?第16页,讲稿共17张,创作于星期日9/15/2022感感谢谢大大家家观观看看第17页,讲稿共17张,创作于星期日