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1、关于抗生素类药物的分析(4)第1页，讲稿共148张，创作于星期一思考与练习第一节 概 述第二节 内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素 第三节第三节 氨基糖苷类抗生素氨基糖苷类抗生素第四节第四节 四环素类抗生素四环素类抗生素第五节 抗生素类药物中高分 子杂质的检查基本要求基本要求第2页，讲稿共148张，创作于星期一基本要求基本要求一一、掌掌握握抗抗生生素素类类药药物物的的结结构构特特点点与与分分析析方方法法之之间间的的关系。关系。二、掌握抗生素类药物的鉴别原理与方法。二、掌握抗生素类药物的鉴别原理与方法。三三、掌掌握握抗抗生生素素类类药药物物法法定定含含量量测测定定方方法法的的原原理理、测定方法与计算。
2、测定方法与计算。四、熟悉抗生素类药物杂质检查的方法。四、熟悉抗生素类药物杂质检查的方法。五、了解抗生素类药物中高分子聚合物检查。五、了解抗生素类药物中高分子聚合物检查。返返 回回第3页，讲稿共148张，创作于星期一第一节第一节 概述概述一、抗生素的定义一、抗生素的定义 抗生素是指：在低微浓度下即抗生素是指：在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。制作用的化学物质的总称。第4页，讲稿共148张，创作于星期一抗生素的来源抗生素的来源1.1.生物合成（微生物发酵）生物合成（微生物发酵）2.2.化学合成或半合成化学合成或半合成第5页，讲稿共14
3、8张，创作于星期一抗生素药物的特点：抗生素药物的特点：化学纯度较低化学纯度较低活性组分易发生变异活性组分易发生变异稳定性差稳定性差第6页，讲稿共148张，创作于星期一二、分类二、分类（按结构与性质）：（按结构与性质）：内酰胺类、氨基糖苷类、内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、其他抗生素类林可霉素类、其他抗生素类返返 回回第7页，讲稿共148张，创作于星期一三、抗生素类药物的细菌耐药性三、抗生素类药物的细菌耐药性细菌耐药性：是指细菌产生的对抗菌药不敏感的现象，是细菌自身生存过程的一种特殊表现形式。第8
4、页，讲稿共148张，创作于星期一（一）鉴别试验（一）鉴别试验1.官能团的显色反应官能团的显色反应：内酰胺环的羟内酰胺环的羟肟酸铁反应；链霉素的麦芽酚反应、坂肟酸铁反应；链霉素的麦芽酚反应、坂口反应。口反应。2.光谱法光谱法3.色谱法色谱法4.生物学法生物学法四、抗生素药物的质量分析四、抗生素药物的质量分析第9页，讲稿共148张，创作于星期一抗生素质量的复杂性：抗生素质量的复杂性：产品稳定性差产品稳定性差分子结构大多不稳定，分子结构大多不稳定，降解后疗效下降、失效降解后疗效下降、失效或增加毒副作用或增加毒副作用发酵过程不易控制发酵过程不易控制易受污染易受污染生产工艺复杂生产工艺复杂（二）检查（二
5、）检查第10页，讲稿共148张，创作于星期一发酵液中杂质发酵液中杂质 无机盐、脂肪、各种蛋白质、各无机盐、脂肪、各种蛋白质、各种降解产物、色素、热原、毒性种降解产物、色素、热原、毒性物质物质 增加增加 异常毒性、细菌内毒素、异常毒性、细菌内毒素、热原、降压物质、无菌热原、降压物质、无菌 检查检查第11页，讲稿共148张，创作于星期一微生物学法与理化法的比较微生物学法与理化法的比较微生物检定法微生物检定法理化法理化法以抗生素对微生物的以抗生素对微生物的杀伤或抑制程杀伤或抑制程度度为指标衡量抗生素的生物效价为指标衡量抗生素的生物效价 根据抗生素结构特点，利用其根据抗生素结构特点，利用其特有的理化性
6、质测定其含量特有的理化性质测定其含量已知或新发现的抗生素、精制品或已知或新发现的抗生素、精制品或粗制品均能测定粗制品均能测定 测定化学结构已知、已提纯的测定化学结构已知、已提纯的抗生素抗生素灵敏度高、样品需用量小、反映抗灵敏度高、样品需用量小、反映抗生素的生素的医疗价值医疗价值，但操作步骤多、，但操作步骤多、费时、费时、误差大误差大 迅速、准确、专属性高、样品迅速、准确、专属性高、样品需用量小、操作简单、省时需用量小、操作简单、省时（三）含量或效价测定（三）含量或效价测定第12页，讲稿共148张，创作于星期一微生物检定法微生物检定法测定抗生素抑菌或杀菌的能力测定抗生素抑菌或杀菌的能力管碟法管碟
7、法浊度法浊度法第13页，讲稿共148张，创作于星期一1.微生物检定法微生物检定法优点优点1、与临床效果一致、与临床效果一致2、灵敏度高、灵敏度高3、干扰物质少、干扰物质少缺点缺点1、操作繁琐、操作繁琐2、培养时间长、培养时间长2、测定误差大、测定误差大第14页，讲稿共148张，创作于星期一2.化学及物理化学方法化学及物理化学方法以理化方法测定主药含量以理化方法测定主药含量优点优点 1.准确度高准确度高2.简单、快速简单、快速1.不一定代表生物效价不一定代表生物效价缺点缺点2.易受杂质干扰易受杂质干扰第15页，讲稿共148张，创作于星期一3.3.抗生素的活性以抗生素的活性以效价单位效价单位来表示
8、：来表示：每每mlml或每或每mgmg中含有某种抗生素的有效成分中含有某种抗生素的有效成分的多少，用的多少，用单位（单位（u u）或）或gg 表示。表示。1 1mgmg青霉素青霉素G G钠盐定为钠盐定为16701670单位单位同一种抗生素的各种盐类的效价可根据其分子量进行换算，同一种抗生素的各种盐类的效价可根据其分子量进行换算，如：如：1 1mgmg青霉素青霉素G G钾盐的单位（钾盐的单位（u u）=1670356.4/372.5=1595u/mg=1670356.4/372.5=1595u/mg第16页，讲稿共148张，创作于星期一分类分类（按结构与性质）：（按结构与性质）：内酰胺类、氨基糖
9、苷类、内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类、四环素类、大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类 林可霉素类、其他抗生素类林可霉素类、其他抗生素类返返 回回第17页，讲稿共148张，创作于星期一第二节第二节 内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素 青霉素族青霉素族ABA：内酰胺环内酰胺环B：氢化噻唑环：氢化噻唑环*1234第18页，讲稿共148张，创作于星期一头孢菌素族头孢菌素族A：内酰胺环内酰胺环B：氢化噻嗪环：氢化噻嗪环AB*23456178第19页，讲稿共148张，创作于星期一头孢菌素类头孢菌素类AB第20页，讲稿共148张，创作于星期一青霉素青霉素（青霉素（青霉素G、
10、苄青霉素）、苄青霉素）第21页，讲稿共148张，创作于星期一氨苄西林氨苄西林（氨苄青霉素）（氨苄青霉素）第22页，讲稿共148张，创作于星期一阿莫西林阿莫西林（羟氨苄青霉素）（羟氨苄青霉素）第23页，讲稿共148张，创作于星期一普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素第24页，讲稿共148张，创作于星期一头孢拉啶头孢拉啶第25页，讲稿共148张，创作于星期一头孢氨苄头孢氨苄第26页，讲稿共148张，创作于星期一头孢羟氨苄头孢羟氨苄第27页，讲稿共148张，创作于星期一头孢噻吩钠头孢噻吩钠第28页，讲稿共148张，创作于星期一酸性酸性结构与性质结构与性质一、一、Na与碱金属与碱金属(Na+、K+)成盐成盐
11、（一）羧基（一）羧基 易溶于水易溶于水 酸酸白色沉淀白色沉淀第29页，讲稿共148张，创作于星期一与有机碱与有机碱(普鲁卡因普鲁卡因)成盐成盐 难溶于水难溶于水普鲁卡因普鲁卡因青霉素青霉素第30页，讲稿共148张，创作于星期一（二）（二）手性手性C C 头孢菌素类头孢菌素类 C6 C7青霉素类青霉素类 C3 C5 C6 旋光性旋光性第31页，讲稿共148张，创作于星期一 （三）共轭体系（三）共轭体系 头孢菌素类头孢菌素类 母核有共轭体系母核有共轭体系 青霉素类青霉素类 母核无明显母核无明显UVUV 多数有苯环取代基多数有苯环取代基 UVUV第32页，讲稿共148张，创作于星期一（四）（四）内酰
12、胺环内酰胺环 水溶液水溶液 不稳定不稳定 干燥纯净干燥纯净 稳定稳定 不稳定性不稳定性因素因素四元环张力大四元环张力大 酰胺键易水解酰胺键易水解 第33页，讲稿共148张，创作于星期一青霉素类青霉素类 某些氧化剂某些氧化剂酸、碱、青霉素酶酸、碱、青霉素酶（某些金属离子）（某些金属离子）（温度）（温度）降解降解失效失效第34页，讲稿共148张，创作于星期一例例青霉素的降解反应青霉素的降解反应青青霉霉素素青霉噻唑酸青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉素酶青霉酸青霉酸H2OpH2100青霉噻唑青霉噻唑酰基羟胺酸酰基羟胺酸NH2OH青霉烯酸青霉烯酸pH4青霉胺青霉胺CO2青霉醛青霉醛HgCl2第35页，
13、讲稿共148张，创作于星期一头孢菌素类头孢菌素类酸、碱、胺类酸、碱、胺类-内酰胺酶内酰胺酶降解降解失效失效第36页，讲稿共148张，创作于星期一（一）呈色反应（一）呈色反应1.1.羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应-内酰胺类内酰胺类呈色呈色羟肟酸衍生物羟肟酸衍生物Fe3+/3H+鉴别试验鉴别试验 二、二、NaOH2 2HClNOHH-内酰胺类内酰胺类第37页，讲稿共148张，创作于星期一H+Fe3+/3（红、棕、褐）（红、棕、褐）第38页，讲稿共148张，创作于星期一2.茚三酮茚三酮反应反应-氨基氨基-氨基氨基茚三酮茚三酮 蓝紫色蓝紫色第39页，讲稿共148张，创作于星期一3.双缩脲反应双缩脲反应似似双
14、缩脲双缩脲（开环分解）（开环分解）-内酰胺类内酰胺类碱性碱性硫酸铜硫酸铜紫紫第40页，讲稿共148张，创作于星期一蓝紫色蓝紫色第41页，讲稿共148张，创作于星期一4.与重氮苯磺酸反应与重氮苯磺酸反应橙黄色橙黄色重氮苯磺酸重氮苯磺酸-5 56 6OHHC（偶合）（偶合）酚羟基酚羟基头孢哌酮头孢哌酮第42页，讲稿共148张，创作于星期一5.与变色酸与变色酸-硫酸反应硫酸反应活泼活泼“-CH2-”青霉素青霉素阿莫西林阿莫西林氨苄西林氨苄西林（分解分解）变色酸变色酸显色显色第43页，讲稿共148张，创作于星期一1.K+、Na+的火焰反应的火焰反应（二）各种盐的反应（二）各种盐的反应 焰色焰色鲜黄色鲜
15、黄色 +醋酸氧铀锌醋酸氧铀锌黄黄 Na+焰色焰色紫色紫色 +0.1%四苯硼钠四苯硼钠+Ac白白 K+第44页，讲稿共148张，创作于星期一2.沉淀反应（青霉素盐）沉淀反应（青霉素盐）遇酸遇酸在过量在过量HClHCl或或有机溶剂中溶解有机溶剂中溶解白白青霉素青霉素青霉素钠青霉素钠青霉素钾青霉素钾緘緘+H第45页，讲稿共148张，创作于星期一3.重氮化重氮化 -偶合反应偶合反应 重氮化重氮化-偶合反应偶合反应芳伯氨基芳伯氨基第46页，讲稿共148张，创作于星期一普鲁卡因普鲁卡因普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素第47页，讲稿共148张，创作于星期一红色红色第48页，讲稿共148张，创作于星期一1、IR法
16、法3180cm-1 N-H内酰胺内酰胺 C=O1780cm-13470cm-1 O-H1690cm-1仲酰胺仲酰胺 C=O以阿莫西林为例以阿莫西林为例（三）光谱（三）光谱第49页，讲稿共148张，创作于星期一2、UV法法样品、分解产物样品、分解产物Cu2+头孢氨苄头孢氨苄 max=262nm青霉素青霉素V钠钠 A280nm/A264nm=1.301.50第50页，讲稿共148张，创作于星期一pH3.8分分子子重重排排第51页，讲稿共148张，创作于星期一第52页，讲稿共148张，创作于星期一色谱法色谱法（四）（四）1、TLC法法对照品对照法对照品对照法2、HPLC法法第53页，讲稿共148张，
17、创作于星期一三、特殊杂质的检查三、特殊杂质的检查 药物药物 检查项目检查项目 检查方法检查方法 头孢他啶头孢他啶 聚合物聚合物 分子排阻色谱分子排阻色谱分子排阻色谱分子排阻色谱 头孢曲松钠头孢曲松钠 头孢哌酮钠头孢哌酮钠 头孢噻肟钠头孢噻肟钠 头孢呋辛酯头孢呋辛酯 有关物质和异构体有关物质和异构体 HPLC法法 青霉素钾（钠）青霉素钾（钠）吸收度吸收度 UV 第54页，讲稿共148张，创作于星期一1.1.头孢呋辛酯中头孢呋辛酯中有关物质和异构体有关物质和异构体的检查的检查 固定相：固定相：ODSODS 流动相：流动相：0.2mol/L0.2mol/L磷酸二氢铵磷酸二氢铵-甲醇（甲醇（62:38
18、62:38）1 1）头孢呋辛酯）头孢呋辛酯3 3-异构体的制备：头孢呋辛酯对异构体的制备：头孢呋辛酯对 照品照品+流动相流动相 头孢呋辛酯头孢呋辛酯3 3-异构体。异构体。2 2）系统适用性试验：各异构体之间的）系统适用性试验：各异构体之间的R1.5R1.5，以，以 头孢呋辛酯头孢呋辛酯A A异构体计算异构体计算n1500n1500。第55页，讲稿共148张，创作于星期一 3 3）异构体：）异构体：第56页，讲稿共148张，创作于星期一2、吸光度、吸光度 检查目的：控制杂质含量检查目的：控制杂质含量 检查药物：青霉素钠（钾）检查药物：青霉素钠（钾）检查方法：检查方法：1.80 mg/ml水溶液
19、；水溶液；A280nm0.10 A264nm=0.800.88第57页，讲稿共148张，创作于星期一3、有机溶剂、有机溶剂 氨苄西林钠：二氯甲烷（氨苄西林钠：二氯甲烷（GC）头孢哌酮钠：丙酮（头孢哌酮钠：丙酮（GC）头孢硫脒：二氯甲烷，乙醇，丙酮（头孢硫脒：二氯甲烷，乙醇，丙酮（GC）头孢他啶：吡啶（头孢他啶：吡啶（HPLC）第58页，讲稿共148张，创作于星期一Fe3+/3H+红色红色NaOHHClNOHH2-内酰胺类内酰胺类羟肟酸衍生物羟肟酸衍生物四、含量测定四、含量测定1、可见、可见-紫外分光光度法紫外分光光度法-羟肟酸比色法羟肟酸比色法USP JP第59页，讲稿共148张，创作于星期一
20、HPLCHPLC法法2、ChPChP 内标法校正因子内标法校正因子外标法外标法特点特点 快速、高效、灵敏快速、高效、灵敏 专属性强、重现性好专属性强、重现性好 一法多用（鉴别、检查、含测）一法多用（鉴别、检查、含测）返返 回回第60页，讲稿共148张，创作于星期一第三节 氨基糖苷类抗生素链霉素链霉素 双氢链霉素双氢链霉素新霉素新霉素 卡那霉素卡那霉素庆大霉素庆大霉素 巴龙霉素巴龙霉素碱性环己多元醇碱性环己多元醇第61页，讲稿共148张，创作于星期一链霉素链霉素链霉胍链霉胍+链霉糖链霉糖+N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺 苷元苷元糖糖链霉双糖胺链霉双糖胺第62页，讲稿共148张，创作于星期一链
21、霉胍链霉胍链霉糖链霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺第63页，讲稿共148张，创作于星期一链霉胍链霉胍链霉糖链霉糖N-甲基甲基-L-葡萄糖胺葡萄糖胺第64页，讲稿共148张，创作于星期一巴龙霉素巴龙霉素D-D-葡萄糖胺葡萄糖胺+脱氧链霉胺脱氧链霉胺+D-+D-核糖核糖+巴龙霉糖巴龙霉糖巴龙糖胺巴龙糖胺苷元苷元巴龙二糖胺巴龙二糖胺 糖糖 第65页，讲稿共148张，创作于星期一D-D-葡萄糖胺葡萄糖胺脱氧链霉胺脱氧链霉胺D-D-核糖核糖巴龙霉糖巴龙霉糖第66页，讲稿共148张，创作于星期一庆大霉素庆大霉素 糖糖 苷元苷元绛红糖胺绛红糖胺 +脱氧链霉胺脱氧链霉胺 +加洛糖胺加洛糖胺 糖糖 第67
22、页，讲稿共148张，创作于星期一绛红糖胺绛红糖胺紫素胺紫素胺2-脱氧链霉胺脱氧链霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-甲基甲基-3-去氧去氧-4-甲甲基戊糖胺基戊糖胺第68页，讲稿共148张，创作于星期一绛红糖胺绛红糖胺紫素胺紫素胺2-脱氧链霉胺脱氧链霉胺加洛糖胺加洛糖胺N-甲基甲基-3-去氧去氧-4-甲甲基戊糖胺基戊糖胺第69页，讲稿共148张，创作于星期一庆大霉素庆大霉素C复合物复合物 庆大霉素庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素庆大霉素C2a R=CH3 R1=R2=H 庆大霉素庆大霉素C2b
23、R=R1=H R2=CH3第70页，讲稿共148张，创作于星期一一、一、结构与性质结构与性质多与硫酸成盐多与硫酸成盐链霉素链霉素 3个个庆大霉素庆大霉素 5个个碱性中心碱性中心碱性碱性（一）（一）水溶性水溶性溶解性溶解性（二）（二）第71页，讲稿共148张，创作于星期一链霉素链霉素 pH 57.5庆大霉素庆大霉素 pH 212 稳定稳定稳定性稳定性（四四）UV（三三）链霉素链霉素 230nm第72页，讲稿共148张，创作于星期一坂口反应坂口反应N-甲基葡萄甲基葡萄糖胺反应糖胺反应麦芽酚反应麦芽酚反应第73页，讲稿共148张，创作于星期一二二、鉴别鉴别 茚三酮反应茚三酮反应（一一）氨基糖苷结构氨
24、基糖苷结构第74页，讲稿共148张，创作于星期一Molisch试验试验 （二）（二）五碳糖或六碳糖结构五碳糖或六碳糖结构-萘酚萘酚蒽蒽酮酮红紫色红紫色蓝紫色蓝紫色第75页，讲稿共148张，创作于星期一红紫色红紫色第76页，讲稿共148张，创作于星期一N-N-甲基葡萄糖胺反应甲基葡萄糖胺反应（三三）甲基葡萄糖胺甲基葡萄糖胺巴龙霉素巴龙霉素链霉素链霉素水解水解-N乙酰丙酮乙酰丙酮 OH-吡咯衍生物吡咯衍生物对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛H+红色红色（Elson-Morgan反应反应）庆大霉素庆大霉素第77页，讲稿共148张，创作于星期一(缩合缩合)第78页，讲稿共148张，创作于星期一红色红色对
25、二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛H+第79页，讲稿共148张，创作于星期一 麦芽酚反应麦芽酚反应（四四）链霉素特征反应链霉素特征反应H+分子重排分子重排第80页，讲稿共148张，创作于星期一紫红紫红麦芽酚麦芽酚第81页，讲稿共148张，创作于星期一链霉胍特有反应链霉胍特有反应（或或-萘酚萘酚）8-8-羟基喹啉羟基喹啉坂口反应坂口反应（五五）-萘酚萘酚第82页，讲稿共148张，创作于星期一第83页，讲稿共148张，创作于星期一（六六）反应反应H+UV法法（七七）庆大霉素无庆大霉素无UVUV吸收吸收nmmax230230=l l链霉素链霉素第84页，讲稿共148张，创作于星期一（八）色谱法（八）色谱
26、法（1 1）TLCTLC法：硫酸庆大霉素的鉴别法：硫酸庆大霉素的鉴别 点样：供试液：展开、凉干、碘蒸气中显色点样：供试液：展开、凉干、碘蒸气中显色 对照液对照液 判断：供试液与对照液所显斑点的颜色与位判断：供试液与对照液所显斑点的颜色与位 置应一致。置应一致。点样：供试液点样：供试液 对照液对照液：硫酸链霉素标准品：硫酸链霉素标准品 对照液对照液：硫酸链霉素标准品：硫酸链霉素标准品 +硫酸硫酸 新霉素标准品新霉素标准品+硫酸卡那霉素标准品硫酸卡那霉素标准品第85页，讲稿共148张，创作于星期一判定法：供试液中主斑点的位置、颜色、大小判定法：供试液中主斑点的位置、颜色、大小 应与对照液应与对照液
27、 相同，相同，对照液对照液应显示分离清晰的应显示分离清晰的3 3个斑点个斑点 否则试验无效。否则试验无效。（2 2）HPLCHPLC法：硫酸庆大霉素的鉴别法：硫酸庆大霉素的鉴别 比较供试液与对照液各组分的保留时间。比较供试液与对照液各组分的保留时间。第86页，讲稿共148张，创作于星期一三三、特殊杂质检查特殊杂质检查链霉素杂质链霉素杂质（一）（一）链霉素链霉素B B（甘露糖链霉素）（甘露糖链霉素）2.方法方法 TLCTLC中的对照品法（中的对照品法（BPBP）1.来源来源 反应中间体反应中间体第87页，讲稿共148张，创作于星期一对微生物的活性无明显差异对微生物的活性无明显差异毒副作用和耐药性
28、不同毒副作用和耐药性不同发酵菌种不同发酵菌种不同工艺差别工艺差别C C组分比例组分比例不一致不一致规定控制各组分的相对百分含量规定控制各组分的相对百分含量ChPUSPBPJP庆大霉素庆大霉素C C组分的测定组分的测定（二二）第88页，讲稿共148张，创作于星期一+4 41010.pH吲哚衍生物吲哚衍生物巯基醋酸巯基醋酸邻苯二醛邻苯二醛氨基氨基max=330nm衍生化原理衍生化原理 1.1.第89页，讲稿共148张，创作于星期一1-烷基烷基-2-烷基硫代烷基硫代异吲哚衍生物异吲哚衍生物第90页，讲稿共148张，创作于星期一离子对色谱法离子对色谱法方法方法 2.规定规定 C1 2550%C1a 1
29、540%C2a+C2 2050%计算计算 3.峰面积归一化法峰面积归一化法第91页，讲稿共148张，创作于星期一第92页，讲稿共148张，创作于星期一4.蒸发光散射检测器（蒸发光散射检测器（ChP2010）5.电化学检测器（电化学检测器（BP）第93页，讲稿共148张，创作于星期一四四、含量测定含量测定微生物检定法微生物检定法 各国药典主要采用各国药典主要采用HPLC法法 常用于体内药分常用于体内药分 返返 回回第94页，讲稿共148张，创作于星期一链霉素、庆大霉素链霉素、庆大霉素微生物检定法微生物检定法 本本法法系系利利用用抗抗生生素素在在琼琼脂脂培培养养基基内内的的扩扩散散作作用用量量反反
30、应应平平行行线线原原理理的的设设计计，比比较较标标准准品品与与供供试试品品两两者者对对接接种种的的试试验验菌菌产产生生抑抑菌菌圈圈的的大大小小，以以测测定定供供试试品效价的一种方法。品效价的一种方法。第95页，讲稿共148张，创作于星期一第四节 四环素类抗生素ABCD第96页，讲稿共148张，创作于星期一123456789101112第97页，讲稿共148张，创作于星期一第98页，讲稿共148张，创作于星期一四环素四环素（TC）tetracycline765第99页，讲稿共148张，创作于星期一金霉素金霉素(CTC)chlortetracycline氯四环素氯四环素765第100页，讲稿共14
31、8张，创作于星期一土霉素土霉素(OTC)oxytetracycline氧四环素氧四环素765第101页，讲稿共148张，创作于星期一多西环素多西环素(DOTC)doxycycline脱氧土霉素脱氧土霉素765第102页，讲稿共148张，创作于星期一美他环素美他环素（METC）metacycline765第103页，讲稿共148张，创作于星期一一、一、结构与性质结构与性质两性两性（一）（一）1.与酸、碱均能成盐与酸、碱均能成盐2.强酸或强碱中溶解度强酸或强碱中溶解度 酚羟基、烯醇型羟基酚羟基、烯醇型羟基 弱酸性弱酸性二甲胺基二甲胺基 弱碱性弱碱性第104页，讲稿共148张，创作于星期一与金属离子
32、生成有色配位化合物与金属离子生成有色配位化合物Ca2+Mg2+Fe3+Al3+UV UV和荧光性质和荧光性质（三三）与金属离子络合与金属离子络合（四四）pH3 7.5 荧光荧光（二）（二）旋光性旋光性第105页，讲稿共148张，创作于星期一第106页，讲稿共148张，创作于星期一不稳定性不稳定性（五）（五）1.差向异构化差向异构化差向金霉素差向金霉素差向四环素差向四环素金霉素金霉素四环素四环素-4 4-4 46 62 2pH淡黄淡黄黑黑蓝色荧光蓝色荧光第107页，讲稿共148张，创作于星期一差向四环素差向四环素第108页，讲稿共148张，创作于星期一（土霉素、多西环素不易差向异构化土霉素、多西
33、环素不易差向异构化）第109页，讲稿共148张，创作于星期一2.降解反应降解反应（1）酸性下降解酸性下降解max=445nmmax=435nm橙黄色橙黄色脱水金霉素脱水金霉素脱水四环素脱水四环素金霉素金霉素四环素四环素 2 2pH第110页，讲稿共148张，创作于星期一脱水四环素脱水四环素第111页，讲稿共148张，创作于星期一TCETCATCEATC第112页，讲稿共148张，创作于星期一（2）碱性下降解碱性下降解（荧光）（荧光）第113页，讲稿共148张，创作于星期一二二、鉴别试验鉴别试验 浓浓H H2 2SOSO4 4反应反应（一一）黄色黄色朱红色朱红色绿绿蓝蓝深紫色深紫色盐酸多西环素盐
34、酸多西环素盐酸土霉素盐酸土霉素盐酸金霉素盐酸金霉素盐酸四环素盐酸四环素4 42 2SOH盐酸美他环素盐酸美他环素橙红色橙红色第114页，讲稿共148张，创作于星期一FeCl3反应反应（二二）褐色褐色橙褐色橙褐色深褐色深褐色红棕色红棕色盐酸多西环素盐酸多西环素盐酸土霉素盐酸土霉素盐酸金霉素盐酸金霉素盐酸四环素盐酸四环素3 3FeCl第115页，讲稿共148张，创作于星期一Cl-反应反应（三）（三）1mol/L盐酸盐酸-甲醇（甲醇（1100）0.01mg/mlUV法（盐酸美他环素）法（盐酸美他环素）（四）（四）第116页，讲稿共148张，创作于星期一TLCTLC法法（五五）盐酸土霉素的鉴别盐酸土霉
35、素的鉴别 HPLC HPLC法法（六六）EDTAEDTA 克服痕量金属造成的克服痕量金属造成的 拖尾现象拖尾现象比较保留时间比较保留时间第117页，讲稿共148张，创作于星期一三三、特殊杂质检查特殊杂质检查 4-4-差向四环素（差向四环素（ETCETC）脱水四环素脱水四环素（ATCATC）差向脱水四环素差向脱水四环素（EATCEATC）盐酸金霉素盐酸金霉素（CTCCTC）有关物质有关物质（一一）HPLCHPLC法（法（20102010版）版）盐酸四环素盐酸四环素第118页，讲稿共148张，创作于星期一吸收度吸收度（二）（二）nmmax355355268268l l、盐酸四环素盐酸四环素第119
36、页，讲稿共148张，创作于星期一杂质吸收度杂质吸收度 取取供供试试品品配配成成每每毫毫升升10mg/ml10mg/ml的的溶溶液液至至4cm4cm的的吸吸收收池池中中，在在530nm530nm处处测测定定，自自加加0.80.8NaOHNaOH起起5min5min时，其吸收度不得超过时，其吸收度不得超过0.120.12。应严格控制温度和时间应严格控制温度和时间第120页，讲稿共148张，创作于星期一四四、含量测定含量测定HPLCHPLC法法 盐酸四环素的测定盐酸四环素的测定 系统适用性试验：盐酸四环素、有关系统适用性试验：盐酸四环素、有关 物质及物质及ATCATC峰间的峰间的 分离度分离度均应符
37、合要均应符合要 求。求。定量方法：外标法以峰面积计定量方法：外标法以峰面积计。返返 回回第121页，讲稿共148张，创作于星期一第五节 抗生素类药物中高分子 杂质的检查1.1.高分子杂质高分子杂质 分子量大于药物本身的杂质总称。分子量大于药物本身的杂质总称。第122页，讲稿共148张，创作于星期一 蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、多糖的结合物。主要来自于蛋白、多肽、多糖的结合物。主要来自于发酵工艺，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉发酵工艺，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。噻唑多肽。药物的自身聚合物，来自于生药物的自身聚合物，来自于生产、贮存过程。可引发过敏。产、贮
38、存过程。可引发过敏。外源性杂质外源性杂质内源性杂质内源性杂质第123页，讲稿共148张，创作于星期一第124页，讲稿共148张，创作于星期一第125页，讲稿共148张，创作于星期一第126页，讲稿共148张，创作于星期一 3.3.高分子杂质的质控方法高分子杂质的质控方法（1 1）凝胶色谱法测定高分子杂质原理：使高分子杂质）凝胶色谱法测定高分子杂质原理：使高分子杂质 与药物分离。与药物分离。（2 2）高分子杂质的控制方法）高分子杂质的控制方法-自身对照外标法自身对照外标法 原理原理：测定在：测定在K Kavav=0=0处处 药物缔合物的峰响应药物缔合物的峰响应 指标指标 样品中高分子杂质的响应指
39、标样品中高分子杂质的响应指标 按外标法计算，得样品中高分子杂质按外标法计算，得样品中高分子杂质 相当于药物本身的相对含量。相当于药物本身的相对含量。第127页，讲稿共148张，创作于星期一（3 3）高分子杂质的分析方法）高分子杂质的分析方法简单测定系统：葡聚糖凝胶简单测定系统：葡聚糖凝胶G-10G-10（4040 120m120m）柱）柱.HPLCHPLC系统系统:葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶G-10G-10柱柱.返返 回回第128页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 1、下列哪个药物会发生羟肟酸铁反应下列哪个药物会发生羟肟酸铁反应 A.青霉素青霉素 B.庆大霉素庆大霉素 C.土霉素土
40、霉素 D.链霉素链霉素 E.维生素维生素C 第129页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 2、中中国国药药典典(2010年年版版)测测定定头头孢孢菌菌素素类类药药物物的的含量时，多数采用的方法是含量时，多数采用的方法是 A.微生物法微生物法 B.碘量法碘量法 C.汞量法汞量法 D.正相高效液相色谱法正相高效液相色谱法 E.反相高效液相色谱法反相高效液相色谱法第130页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 3、能发生重氮化能发生重氮化-偶合反应的抗生素类药物是偶合反应的抗生素类药物是 A.青霉素青霉素 B.庆大霉素庆大霉素 C.苄星青霉素苄星青霉素 D.盐酸四环素盐
41、酸四环素 E.普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素第131页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 4、四环素在酸性条件下的降解产物是四环素在酸性条件下的降解产物是 A.差向四环素差向四环素 B.脱水四环素脱水四环素 C.异四环素异四环素 D.去甲四环素去甲四环素 E.去甲氧四环素去甲氧四环素第132页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 5、庆庆大大霉霉素素和和链链霉霉素素可可以以发发生生Molisch反反应应，因因为它们分子结构中含有为它们分子结构中含有 A.羰基羰基 B.五碳糖或六碳糖五碳糖或六碳糖 C.羧基羧基 D.羟基羟基 E.氨基氨基第133页，讲稿共148张，创
42、作于星期一练习与思考A型题型题 6、麦芽酚与硫酸铁铵作用显示的颜色是、麦芽酚与硫酸铁铵作用显示的颜色是 A.紫红色紫红色 B.黄色黄色 C.橙红色橙红色 D.绿色绿色 E.蓝紫色蓝紫色第134页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 7、盐盐酸酸四四环环素素中中有有关关物物质质的的检检查查在在中中国国药药典典2010版版中采用的方法是中采用的方法是 A.GC-MS B.IR C.HPLC D.UV E.TLC第135页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 8、能能区区别别链链霉霉素素和和庆庆大大霉霉素素，为为链链霉霉素素特特有有的的鉴别反应是鉴别反应是 A.茚三酮反应
43、茚三酮反应 B.三氯化锑反应三氯化锑反应 C.坂口反应坂口反应 D.硫色素反应硫色素反应 E.N-甲基葡萄糖胺反应甲基葡萄糖胺反应第136页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 9、青青霉霉素素在在碱碱性性或或青青霉霉素素酶酶作作用用下下发发生生降降解解反反应的产物是应的产物是 A.青霉烯酸青霉烯酸 B.青霉醛青霉醛 C.青霉酸青霉酸 D.青霉噻唑酸青霉噻唑酸 E.青霉胺青霉胺第137页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 10、四环素在碱性溶液中发生降解的产物是、四环素在碱性溶液中发生降解的产物是 A.异四环素异四环素 B.青霉烯酸青霉烯酸 C.差向脱水四环素差向
44、脱水四环素 D.脱水四环素脱水四环素 E.差向四环素差向四环素第138页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 11、可发生、可发生N-甲基葡萄糖胺反应的药物是甲基葡萄糖胺反应的药物是 A.硫酸奎宁硫酸奎宁 B.硫酸阿托品硫酸阿托品 C.盐酸美他环素盐酸美他环素 D.青霉素钠青霉素钠 E.硫酸庆大霉素硫酸庆大霉素第139页，讲稿共148张，创作于星期一练习与思考A型题型题 12、具有、具有6-APA母核结构的药物是母核结构的药物是 A.氨苄西林钠氨苄西林钠 B.头孢他啶头孢他啶 C.盐酸金霉素盐酸金霉素 D.硫酸庆大霉素硫酸庆大霉素 E.氢化可的松氢化可的松第140页，讲稿共148
45、张，创作于星期一练习与思考A型题型题 13、在紫外区无吸收的药物是、在紫外区无吸收的药物是 A.青霉素钠青霉素钠 B.盐酸土霉素盐酸土霉素 C.盐酸金霉素盐酸金霉素 D.硫酸庆大霉素硫酸庆大霉素 E.硫酸链霉素硫酸链霉素第141页，讲稿共148张，创作于星期一B型题型题 A.青霉素青霉素 B.链霉素链霉素 C.两者均能两者均能 D.两者均不能两者均不能 1Kober反应反应 2.羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应 3.坂口反应坂口反应 4.N-甲基葡萄糖胺反应甲基葡萄糖胺反应 5.在酸性溶液中水解在酸性溶液中水解DABBC第142页，讲稿共148张，创作于星期一B型题型题 A.链霉素链霉素 B.庆大霉素
46、庆大霉素 C.两者均可两者均可 D.两者均不可两者均不可 6.用用Kober反应反应 7.用坂口反应用坂口反应 8.用麦芽酚反应用麦芽酚反应 9.用三氯化铁反应用三氯化铁反应 10.用茚三酮反应用茚三酮反应DADAC第143页，讲稿共148张，创作于星期一B型题型题 A.茚三酮反应茚三酮反应 B.麦芽酚反应麦芽酚反应 C.坂口反应坂口反应 D.三氯化铁反应三氯化铁反应 E.羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应 11金霉素金霉素 12庆大霉素庆大霉素 13青霉素青霉素DEA第144页，讲稿共148张，创作于星期一B型题型题 A.三氯化铁反应三氯化铁反应 B.硫色素反应硫色素反应 C.羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应
47、 D.丙二酰脲反应丙二酰脲反应 E.麦芽酚反应麦芽酚反应 14.阿莫西林阿莫西林 15.硫酸链霉素硫酸链霉素 16.盐酸四环素盐酸四环素 17.维生素维生素B1 18.苯巴比妥苯巴比妥CEBAD第145页，讲稿共148张，创作于星期一X型题型题 1、能和茚三酮发生呈色反应的物质有、能和茚三酮发生呈色反应的物质有 A链霉素链霉素 B庆大霉素庆大霉素 C土霉素土霉素 D氨基酸氨基酸 E苯巴比妥苯巴比妥第146页，讲稿共148张，创作于星期一X型题型题 2、美他环素具有以下特点、美他环素具有以下特点 A临床上应用硫酸美他环素临床上应用硫酸美他环素 B临床上应用盐酸美他环素临床上应用盐酸美他环素 C二甲氨基显弱碱性二甲氨基显弱碱性 D与酸和碱均能生成相应的盐与酸和碱均能生成相应的盐 E酚羟基和烯醇型羟基显弱酸性酚羟基和烯醇型羟基显弱酸性第147页，讲稿共148张，创作于星期一感感谢谢大大家家观观看看第148页，讲稿共148张，创作于星期一