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1、关于常用培养基的制备第1页,讲稿共15张,创作于星期日熟悉培养基制备的基本程序会制备常用的培养基 实训目标高压蒸气灭菌器、电热干燥箱、电炉、天平、量筒、漏斗、试管、培养皿、烧杯、三角烧瓶、等 仪器材料第2页,讲稿共15张,创作于星期日方法步骤(一)肉汤培养基(一)肉汤培养基(二)琼脂培养基(二)琼脂培养基(三)半固体培养基(三)半固体培养基(四)血液琼脂培养基(四)血液琼脂培养基第3页,讲稿共15张,创作于星期日制备培养基制备培养基 方法步骤方法步骤计算称量溶化调PH分装灭菌无菌检验备用(一)肉汤培养基(一)肉汤培养基(二)琼脂培养基(二)琼脂培养基(三)半固体培养基(三)半固体培养基(四)血
2、液琼脂培养基(四)血液琼脂培养基第4页,讲稿共15张,创作于星期日(一)肉汤培养基(一)肉汤培养基1成分 牛肉膏35g,蛋白胨10g,氯化钠5g,蒸馏水1000ml。2制法 将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠加蒸馏水后,加热溶解。矫正pH至7.47.6,过滤分装。置高压蒸气灭菌器内,121.3灭菌20min即成。3用途 可供一般细菌生长,同时也是制作一般培养基的基础原料。供营养要求较高的细菌分离培养,亦可供溶血性的观察和保存菌种。第5页,讲稿共15张,创作于星期日(二)固体琼脂培养基(二)固体琼脂培养基1计算:计算:1000 ml蒸馏水中应加营养琼脂粉31.3g,再根据培养基的需要量确定营养琼脂粉的用量
3、。营养琼脂粉的量=31.315n/1000(g)其中:15代表一个平板需要营养琼脂约15 ml;n代表要做的培养基平板的数量 第6页,讲稿共15张,创作于星期日2称量:用普通天平准确称量出营养琼脂粉的量,用量筒量出相应的 蒸馏水的量,要尽量准确。第7页,讲稿共15张,创作于星期日3溶化:将营养琼脂粉和蒸馏水倒入搪瓷缸中,于电炉上加热溶化,边加热边搅拌,沸腾时立即从电炉上拿下,等泡沫消失后再放在电炉上加热,注意不能让琼脂溢出,煮沸23次。第8页,讲稿共15张,创作于星期日4分装:倒平板或倒试管若做平板培养基应倒于培养皿中,每板约15ml左右,以刚好覆盖平皿底为易。若做斜面培养基应倒入试管中,量为
4、试管的1/3第9页,讲稿共15张,创作于星期日包扎:包扎:包扎:包扎:加塞后,试管通常每加塞后,试管通常每加塞后,试管通常每加塞后,试管通常每7 7支一起,包上一层牛皮纸或两层报纸,用线支一起,包上一层牛皮纸或两层报纸,用线支一起,包上一层牛皮纸或两层报纸,用线支一起,包上一层牛皮纸或两层报纸,用线绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。绳扎紧。三角瓶加塞后也用牛皮纸包扎。以活结形式扎紧,以便使用时容易解开。以活结形式扎紧,以便使用时容易解开。以活结形式扎紧,以便使用时容易解开。以活结形式扎紧,以便使用时容易解开。用记号笔注明
5、培养基名称、配制日期、配制人或实验组。用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组。用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组。用记号笔注明培养基名称、配制日期、配制人或实验组。灭菌时包牛皮纸灭菌时包牛皮纸灭菌时包牛皮纸灭菌时包牛皮纸第10页,讲稿共15张,创作于星期日5灭菌:用高压灭菌器灭菌包扎好,直立放入内筒中,在121.3灭菌20-30min。灭菌完毕后,将平板培养基拿出平放于桌面,凝固前勿动;将试管培养基摆成斜面,凝固前勿动。第11页,讲稿共15张,创作于星期日6无菌检验:随机抽取几个平板或试管培养基于温箱中培养24小时,若无菌 生长则为合格。7备用:将合格的培养基放入冰箱,在0-4中保存备用。第12页,讲稿共15张,创作于星期日(三)半固体培养基(三)半固体培养基肉汤培养基中加入0.3%0.5%琼脂粉制成,用于菌种的保存或观察细菌的运动性。第13页,讲稿共15张,创作于星期日(四)血液琼脂培养基(四)血液琼脂培养基将灭菌的营养琼脂冷至4550,以无菌操作,加入5%10%的无菌血液(或脱纤维血),然后倾注平皿或分装试管制成斜面。第14页,讲稿共15张,创作于星期日感感谢谢大大家家观观看看第15页,讲稿共15张,创作于星期日