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1、关于实验二温度和对酶活性的影响第1页，讲稿共9张，创作于星期日 实验目的实验目的 1、了解温度对酶活性的影响；2、了解酶活性的最适pH及掌握一种检测最适pH的方法 第2页，讲稿共9张，创作于星期日 实验原理实验原理 酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为为 3740，植物酶的最适温度为，植物酶的最适温度为5060。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些。酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到酶的干燥制剂，虽加热到100，其活性并无明显改变，但在，其活
2、性并无明显改变，但在100的溶液中却很快地完全失的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按去活性。低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不显颜色，麦芽糖遇碘其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不显颜色，麦芽糖遇碘也不显色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判也不显色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。断。酶的活力受环境酶的
3、活力受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适的影响极为显著。不同酶的最适pH值不同。本实验观察值不同。本实验观察pH对对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pH约为约为6.8。第3页，讲稿共9张，创作于星期日实验试剂实验试剂1、0.2%淀粉的淀粉的0.3%氯化钠溶液氯化钠溶液 2、淀粉酶或稀释、淀粉酶或稀释50100倍的唾液倍的唾液 用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释入量筒并稀释50-100倍，倍，(稀释倍数可根据各人唾液淀粉酶活性调整稀释倍数可根据各人唾液淀
4、粉酶活性调整)混匀混匀备用。备用。3、碘化钾、碘化钾-碘溶液碘溶液 第4页，讲稿共9张，创作于星期日实验器材实验器材 1、试管及试管架 2、恒温水浴 3、冰浴 4、沸水浴第5页，讲稿共9张，创作于星期日 取取 3支试管，编号后按下表加入试剂支试管，编号后按下表加入试剂:1、温度对酶活性的影响、温度对酶活性的影响管号管号淀粉溶液淀粉溶液（ml）淀粉酶淀粉酶（ml）煮沸的淀粉煮沸的淀粉酶（酶（ml）11.5121.5131.51第6页，讲稿共9张，创作于星期日 各取不同各取不同pH的缓冲液的缓冲液3ml，分注入，分注入4支带支带有编号码的试管中，随后于每个试管中添加有编号码的试管中，随后于每个试管
5、中添加0.5%淀淀粉溶液粉溶液2ml和淀粉酶和淀粉酶2ml。将各试管内容物混匀，。将各试管内容物混匀，并依次置于并依次置于37恒温水浴中保温。恒温水浴中保温。每隔每隔1分钟由第分钟由第3管取出一滴混合液，置于管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加白瓷板上，加1小滴碘化钾碘溶液，检验小滴碘化钾碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管依次添加向所有试管依次添加12滴碘化钾碘溶液。滴碘化钾碘溶液。观察各试管中物质呈现的颜色，分析观察各试管中物质呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。对唾液淀粉酶活性的影响。锥形瓶号锥形瓶号 0.2mol/L磷
6、磷酸氢二钠酸氢二钠（ml）0.1mol/L柠檬酸柠檬酸（ml）pH 15.15 4.85 5.0 26.05 3.95 5.8 37.72 2.28 6.8 49.72 0.28 8.0 取取4个个50ml锥形瓶，并编号。用移液管按锥形瓶，并编号。用移液管按下表添加下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠柠檬酸溶液制备檬酸溶液制备pH5.08.0的四种缓冲液。的四种缓冲液。2、pH对酶活性的影响对酶活性的影响第7页，讲稿共9张，创作于星期日 注意事项注意事项 1加入酶液后，要充分摇匀，保证酶液与加入酶液后，要充分摇匀，保证酶液与全部淀粉液接触反应，得到理想的颜色梯度全部淀粉液接触反应，得到理想的颜色梯度变化。变化。2取混合液前，应将试管内溶液充分混匀，取混合液前，应将试管内溶液充分混匀，取出试液后，取出试液后，立即放回试管中一起保温。立即放回试管中一起保温。第8页，讲稿共9张，创作于星期日感感谢谢大大家家观观看看第9页，讲稿共9张，创作于星期日