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1、2.2.2动动物物细细胞融合与胞融合与单单克克隆抗体隆抗体动物细胞融合动物细胞融合1、过程：、过程：细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞物理法、物理法、化学法化学法灭活的病毒灭活的病毒仙台病毒仙台病毒疱疹病毒疱疹病毒2、用途：、用途：制备单克隆抗体制备单克隆抗体小鼠骨髓瘤细小鼠骨髓瘤细胞胞小鼠小鼠B淋巴细胞淋巴细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞筛选筛选（特定的选择（特定的选择性培养基）性培养基）增殖增殖单克隆抗体单克隆抗体体外培养体外培养注射到小鼠腹腔注射到小鼠腹腔1.概念2.结束标志：3.促融方法：4.过程:5.意义:一、动物细胞融合一、动物细胞融合物理法物理法化学法化学法生物法：生物法：灭活的病毒灭
2、活的病毒细胞核融合细胞核融合如图如图2-23突破了有性杂交方法的局限，突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能使远缘杂交成为可能植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原理原理细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、植物体细胞的全能植物体细胞的全能性性细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞融合的方法细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导去除细胞壁后诱导原生质体融合原生质体融合使细胞分散后诱使细胞分散后诱导细胞融合导细胞融合诱导方法诱导方法物理（离心、振荡、物理（离心、振荡、电刺激）电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙
3、二醇）物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒灭活的病毒结果结果获得杂种植株获得杂种植株获得杂种细胞获得杂种细胞二、单克隆抗体二、单克隆抗体1传统抗体的获得传统抗体的获得 (1)方法：方法：向动物体内反复注射某种向动物体内反复注射某种_，使动物产生使动物产生_；从动物从动物_中分离所中分离所需抗体。需抗体。(2)缺陷：缺陷：_、纯度低、纯度低、_差。差。抗原抗原抗体抗体血清血清产量低量低特异性特异性2单克隆抗体的制克隆抗体的制备特异性强、灵敏度高、并可能大量制备特异性强、灵敏度高、并可能大量制备(1)基础基础 由单个由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形
4、成细胞群，这一细胞群所产生隆），形成细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。单克隆抗体。B淋巴细胞的特点：淋巴细胞的特点：（1）感染病原体后，形成相应的）感染病原体后，形成相应的B淋巴淋巴细胞；细胞；（2）每一个）每一个B淋巴细胞增殖分化成的浆淋巴细胞增殖分化成的浆细胞只分泌一种特异性抗体；细胞只分泌一种特异性抗体；（3）一个）一个B淋巴细胞不能无限增殖。淋巴细胞不能无限增殖。骨髓瘤细胞的特点骨髓瘤细胞的特点 骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外骨髓瘤细胞是一种癌细胞，它能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。培养条件下无限增殖
5、，但不能产生抗体。杂交瘤细胞的特点：杂交瘤细胞的特点：杂交瘤细胞继承了双亲的遗传物质，不瘤细胞继承了双亲的遗传物质，不仅具有仅具有B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力；淋巴细胞分泌特异性抗体的能力；还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下无限增殖的能力。殖的能力。（2）过程：）过程：脾脾骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B淋巴淋巴细胞胞杂交瘤交瘤细胞胞增殖增殖产生抗体产生抗体克隆化克隆化抗体抗体体外培养体外培养小鼠腹腔小鼠腹腔细胞培养液胞培养液腹水腹水3单克隆抗体的克隆抗体的应用用(1)优点：点：_、_、产量大。量大。(2)应用用作作为诊断断试剂，具有准确、，具有准确、_、简易、易、_的的优点。点。用于用于_和和_。特异性特异性强强灵敏度高灵敏度高高效高效快速快速治治疗疾病疾病运运载药物物P52生物技术资料卡