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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 生化考研重点学问总结第一章单糖:6 多糖与碘显色,至少需要的葡萄糖残基数唾液淀粉酶激活剂:Cl-几个典型非仍原糖:蔗糖、糖原、淀粉形成 N-糖肽键的单糖或衍生物是:其次章油脂几个非饱和脂肪酸双键数:油酸: 1亚油酸: 2 亚麻酸: 3 人不能自身合成的必需脂肪酸: 亚油酸、亚麻酸四种脂类转运脂蛋白:CM:乳糜微粒,转运外源性三酰甘油酯 VLDL:极低密度脂蛋白,转运内源性三酰甘 油酯LDL:低密度脂蛋白,转运内源性胆固醇 HDL:高密度脂蛋白,转运外源性胆固醇第三章 氨基酸与蛋白质几种主要氨基酸及三字母缩写两特别: Pro、Gly 芳香: 酪(
2、 Tyr )色( Trp/Try ,吸光最强 )苯( Phe)八种必需氨基酸:甲携来一本亮色书,Met/Val/Lys/Ile/Phe/Leu/Trp/Thr 侧链为羟基氨基酸:苏( Thr )丝( Ser )酪( Tyr )酸性氨基酸:天( Asp)谷( Glu) 对应两酰胺:Asn、Gln碱性氨基酸:赖( Lys)精( Arg)组( His )其它: 丙氨酸( Ala )名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - PI PI 的运算: PI=(PK1+PK2) /2=PK1+PKRCOOH/2=PK2+PKR NH2/2
3、 PH的运算: PH=PK1+Lg(R/R +)=PK2+Lg(R-/R)PH =7 的水中溶蛋白,PH=6,就该蛋白 PIPI 时有 R蛋白二级结构 螺旋: Sn=3.6 13,存在 Pro 时不形成 螺旋,右手螺旋 折叠: 同/ 反向,肽键中H与 O成氢键,轴距0.35nm 转角: 转角处为 Gly超二级结构: 无规卷曲、结构域三级结构: 作用力( 二硫键、疏水作用力、氢键、静电离子键、范德华力)蛋白结构分析N端分析法: FDNB( Sanger)、 PITC(Edman)、 DNS-Cl(丹磺酰氯)、氨肽酶法C端分析法: 羧肽酶法、无水肼解法 羧肽酶 A:不能水解C端为 Lys、 Arg
4、、Pro 的肽键; 羧肽酶 B:能水解 C端为 Lys 、Arg 的肽键; C端倒数其次位是 Pro 时, A、 B 都不能水解打开二硫键:仍原法(巯基化合物,碘乙酸爱护)、氧化法(过甲酸)专一切断: 胰蛋白酶( Lys 、Arg-COOH肽键); CNBr(Met-COOH肽键);胰凝乳蛋白酶();显色反应Follin 酚: 蓝色,酚基( Tyr )、吲哚基( Trp ),组分( CuSO 4+磷钼酸)Millon:红色,酚基( Tyr ),组分( HgNO 3+Hg(NO 3)2)坂口反应: 红色,胍基( Arg ),组分( 萘酚,NaClO)黄色反应: 黄色,芳香氨基酸,组分(浓 HNO
5、 3)双缩脲反应:紫红色,肽键,多肽,组分(NaOH+CuSO 4)乙醛酸反应:紫色,吲哚基(Trp )几种重要氨基酸供应活性甲基的:S-腺苷 Met 形成 N-糖肽键的: Asp 胶原蛋白中含量高的氨基酸:Gly 、Ala 、Pro、HO-Pro、 HO-Lys 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 蛋白分别纯化技术:透析、超滤;密度梯度离心;凝胶过滤;PI 法、盐析、有机溶剂法;电泳、离子交换;吸附层析;亲和层析 凝胶过滤大分子先出,凝胶电泳相反:机理 分子运动速度打算因素:大小、电荷量、外形 蛋白离子交换层析与洗
6、脱: 凝胶电泳三效应:电荷、分子筛、浓度效应 蛋白含量测定 测 N: 凯氏定氮、紫外吸光、双缩脲吸光、福林酚显色吸光 测 M: 沉降离心、凝胶过滤(凝胶排阻层析)、SDS-PAGE 凯氏定氮: HNO 2 反应,生成的 N2 中氨基酸占 1/2 其它 分别二硫基的肽段可用:SDS-PAGE 几个主要氨基酸的 PI 值:几种重要蛋白:镰刀贫血病:Glu Val ,第 6 位 与烷化剂(碘乙酸)反应的氨基酸:Cys(半胱氨酸)第四章 酶学 酶活化中心组成:结合部位、催化部位 运算: 活力单位( IU、Kat )、比活力( IU/mg)、转化数 / 转化周期、米氏方程各可逆抑制作用的动力学特点:Km
7、、Vmax 与丝氨酸羟基共价不CN 几个抑制作用:竞争抑制( 丙二酸对琥珀酸脱氢酶);有有机磷(可逆 ); CO、CN(作用于Cytaa 3);不行逆抑制(重金属、有机砷、化物、硫化物、CO)酶促反应初速度与E 、 T有关以“ 三点结合” 模型作用的酶:甘油激酶酶的专一性 专一水解葡萄糖形成的二酯键的酶:以 O2为直接氢受体的氧化酶:别构酶VC氧化酶、细胞色素氧化酶名师归纳总结 两独立功能部位:活性中心、变构中心第 3 页,共 12 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 动力学曲线:S 型, 其它为双曲线具有效应: 协同效应、变构效应 典型代表 血红蛋白
8、: 协同效应、波尔效应、变构效应酶分别纯化要求: 纯化倍数高、回收率高 纯化倍数 =比活力 / 纯化前总比活力回收率 =活力单位数 / 纯化前活力单位数方法: 同蛋白质竞争性抑制剂:增S 可减弱抑制作用尿黑酸氧化酶遗传缺陷)患尿黑酸症的病人是由于:缺少尿黑酸氧化酶(第五章核酸反向互补配对:ACG-CGT(U)N-苷键: ( C1-C5),嘌呤( N9-C1),嘧啶( N1-C1)SnRNA:核仁不均一 RNA,功能( 促进转录、 )核酸分别技术 凝胶电泳: 三效应、分子运动速度打算因素 见蛋白质离子交换层析:阳离子交换层析,核苷酸脱下次序:UGCA 阴离子交换层析,核苷酸脱下次序:CAUG 亲
9、和层析: 可用亲和层析法分别的核酸:mRNA(PolyA 尾) DNA 测序三法:加减法(Sanger 、 1975),化学断裂法,双脱氧终止法(Sanger 、1977、原理 )不能形成两性离子的核苷酸是 UMP: 缘由cNMP 最重要的 cNMP:cAMP、cGMP cAMP:其次信使cAMP分子内有: 环化的磷酸二酯键cAMP与 cGMP:生物作用并不是完全相反第六章 分子生物学与基因工程名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 基因组学启动子组成 3 部分: 识别部位( -35 、CG/CAAT),结合部位(-10
10、 、TATA),转录起始点高度重复序列:卫星 DNA、小卫星 DNA、微卫星 DNA 原核生物基因重叠类型:基因家族按特点分三类:简洁多基因家族、复杂多基因家族、发育调控的复杂多基因家 族基因家族按组成分三类:DNA复制DNA复制方式: 线性 (眼型), 环状 【 (大肠杆菌)、滚环(病毒质粒)、D型(线粒体、叶绿体)】DNA复制需引物: 转录不需引物 原核 DNA聚合酶功能: 损耗修复、校正、合成 DNA 基因工程酶RNase:RNaseA嘧啶 3 5 、RNaseT1(G的 3 5)、 RNaseT2(A 的 3 5)DNA连接酶所需能量:原核 ATP、真核 NAD+ 转移水解 DNA-R
11、NA中的 RNA的酶: RNaseH、逆转录酶(有 RNaseH活性)牛脾磷酸二酯酶水解 RNA所得产物: 5磷酸切开,产生 3单磷酸核苷蛇毒磷酸二酯酶水解 RNA所得产物: 3-OH 切开,产生 5单磷酸核苷核酸合成酶:DDDP(依靠 DNA的 DNA聚合酶)、 RDDP(依靠 RNA的 DNA聚合酶)、 DDRP(依靠 DNA的 RNA聚合酶)RNAPol2: RNAPolB,合成 hnRNA,分布在核质中RNA用强碱水解产生:2 - 核苷酸、 3- 核苷酸混合物限制内切酶切割特点:4-8bp 、6bp 主要,成黏性、平齐末端,成回文序列,甲基化难切tRNA 结构含稀有碱基最多:D(二氢尿
12、嘧啶)、 (假尿嘧啶)、I (次黄嘌呤)四环四臂五区:D臂、 T C臂、氨基酸臂(受体臂)、反密码子臂二级: 三叶草三级: 倒 L 基因表达名师归纳总结 DNA重组过程中DNA连接四方式: 粘性末端连接、同聚物加尾法、加连接物连接法、加第 5 页,共 12 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - DNA接头连接法转位: 三类转位因子【(插入序列IS )、转座子( Tn)、可转座噬菌体】,转位后遗传效应(突变、产生新基因、染色体畸变)转录: 转录 5端常见起始核苷酸是G、A,原核终止子在终止位点前有PolyU 翻译: 参加肽链延长的因子(EF-Tu、EF-T
13、S、移位酶 /G 因子),肽基转移酶催化组分( 23SrRNA),蛋白合成时生成肽键的能量来自 高能酯键水解转录抑制剂:利福平、利迪链霉素、放线素 D、 - 鹅膏蕈碱翻译抑制剂:抗生素 (氯霉素、链霉素、卡那霉素、新霉素、四环素、土霉素) 机理干扰素 (使起始因子 eIF2 磷酸化失活 ), 毒素 (抑制真核肽链延长)基因工程基因工程载体:必备条件 (自主复制、有标志基因便于挑选、易引入受体细胞、酶切位点少、 M大可携带大片基因)常用载体 (质粒、病毒、噬菌体、人工大染色体 改造而来 )DNA文库: 含某种生物体全部被转录成 mRNA的全部基因序列密码子起始密码子:原核 (AUG、GUG、 U
14、UG,对应 fMet )真核 (AUG,对应 Met) 起始 tRNA: tRNA Met、tRNA fMet终止密码子:UAA、UAG、UGA 无义密码子:UAA、UAG、UGA 线粒体中三种特别密码子:UGA-色氨酸原核 RF1识别的密码子:UAA、UAX RF2识别的密码子:UAA、UGA 密码子性质:不重叠、特别性、通用性、简并性、连续性、摇摆性 摇摆性: A-U,U-A、G,C-G,G-C、U,I- A、U、C 其它SnRNA功能: RNA成熟加工、与染色质结合、调剂基因活性多拷贝基因有:组蛋白基因、3 种印迹法对应检测对象:S-DNA、N-RNA、W-Pro Tm的影响三因素:C三
15、 G、盐浓度( Na +)、 DNA均一性(均一窄)Tm=(C+G)% 0.41+69.3 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 第七章 维生素与激素几种重要酶的辅酶脱羧酶: 酮酸脱羧酶(TPP/VB1)、氨基酸脱羧酶(磷酸吡哆醛(VB6) 磷酸吡哆醛:氨基酸脱羧酶、转氨酶 的辅酶以 FAD为辅酶的酶: 二氢硫辛酰胺脱氢酶、脂酰辅酶 磷酸甘油脱氢酶羧化酶的辅酶:生物素( VB7)VB12:钴胺素(参加甲基转移)氧化仍原酶的辅酶:NAD+ 以 NADP为辅酶的酶: 苹果酸酶、 6-p-G 脱氢酶以 FAK为辅酶的酶: 脂
16、酰辅酶 A 脱氢酶几种特定功能的维生素凝血维生素:VK,脂溶抗血维生素:VC,水溶含 A 的维生素: NAD+、NADP、FAD、CoASH VD:A 脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、线粒体体内活性最高的 VD是: 1,25- 二羟基胆钙化醇 1,25-(OH)2D3 两种 VD原: VD3( 7- 脱氢胆固醇),VD2(麦角固醇)VD3 的形成: 胆固醇 7- 脱氢胆固醇 VD3胰岛素等激素的受体是:含 N激素受体在激素作用下与腺苷酸环化酶的耦联是由 G蛋白 介导实现的蛋白质类激素受体位于:细胞质膜上类固醇激素受体位于:细胞内第八章 生物氧化肌肉或神经细胞储存能量的高能化合物是:磷酸肌酸( IP3 )
17、高能化合物有:磷酸肌酸、 1,3- 二磷酸甘油酸、磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)、生物合成中主要的仍原剂;NADPH,来源于 HMS(磷酸戊糖途径 / 磷酸己糖旁路)生物氧化过程中,ATP生成方式: 底物水平磷酸化、氧化磷酸化线粒体的嵴: 外表面与基质接触,含有氧化磷酸化组分名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - ATP合成酶F0F1-ATPase 是: 催化 ATP 合成的酶形式,一种膜结合复合物,单独存在时没 ATP酶活性F0:含 H +通道ATP合成机理细胞质脱下的一对氢进入线粒体的三方式:异柠檬酸穿梭、苹果酸穿梭、甘
18、油磷酸穿梭丙氨酸脱氢酶系的辅因子:TPP(VB1)、 CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、 Mg2+ 丙氨酸脱氢酶系的酶:丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶醛缩酶的底物是:F-1,6-2P 在 TCA、有氧呼吸链中产生的 第九章 糖代谢糖酵解 部位: 胞液ATP最多的是: - 酮戊二酸琥珀酸过程: 葡萄糖、糖元转变为丙酮酸三关键酶:己糖激酶: 包括(葡糖糖激酶、果糖激酶),不受 ATP/AMP的调剂磷酸果糖激酶:限速,主要激活剂(2,6- 二磷酸果糖),抑制剂(ATP、柠檬酸)丙酮酸激酶:受 ATP/AMP的抑制产能: 2ATP 醛缩酶的底物:F-1 ,6-P2 (1,6- 二
19、磷酸果糖) 糖代谢中既催化脱氢又催化脱羧的两种酶:异柠檬酸脱氢酶、6- 磷酸葡萄糖酸脱氢酶糖的有氧氧化丙酮酸乙酰辅酶 A:部位 :线粒体内膜丙酮酸脱氢酶系:3 酶( 丙酮酸脱羧酶、硫辛酸乙酰转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶)5 辅( TPP(VB1)、 CoASH、FAD、NAD+、硫辛酸、 Mg2+)TCA循环: 柠檬酸循环、 Krebs 循环调剂 TCA循环运转最主要的酶:异柠檬酸脱氢酶(限速)、- 酮戊二酸脱氢酶系部位: 线粒体基质、内膜名师归纳总结 酶: 柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶(限速)、- 酮戊二酸脱氢酶系第 8 页,共 12 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - -
20、- - - - 1 分子葡萄糖有氧氧化产生ATP数: 36(38)=2+6(4)+6+24 草酰乙酸来源三途径:苹果酸酶和苹果酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶、磷酸丙酮酸脱羧酶磷酸戊糖途径、磷酸己糖旁路 HMS 核糖的分解途径是:HMS 生物合成中除 ATP供能外合成糖仍需:UTP 合成脂肪仍需:GTP 生物合成的仍原力是 NADPH,来源是 HMS 反应部位总结糖酵解( EMP): 胞质TCA:线粒体基质、内膜氧化磷酸化: 线粒体内膜糖元代谢合成糖元时,葡萄糖先活化成:UDPG 植物合成淀粉时需:ADPG 合成蔗糖需: UDPG、6-P-G 糖异生第十章 脂代谢三酰甘油代谢分解代谢 - 氧化:反应部位
21、: 线粒体基质产物: 偶数碳( 乙酰 CoA)、奇数碳( 几个乙酰 CoA+1个丙酰 CoA)反应过程: 二步脱氢( 生成 1FADH2+1NADH)、产 ATP( 5 个)饱和脂肪酸分解 酮体生成部位: 肝内成分: 乙酰乙酸、- 羟丁酸、丙酮利用部位: 肝外,脑、肌名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 不饱和脂肪酸氧化分解:两特别酶: 顺- 反烯酯酰 CoA异构酶、顺 - 反- 羟酯酰 CoA异构酶1 分子软脂酸( 16C)完全氧化分解成 CO2、H2O生成 ATP数:脂肪酸合成脂肪酸合成代谢仍原力是 NADPH,来
22、源是 HMS 催化胞液脂肪酸合成的限速反应由 乙酰 CoA羧化 酶催化酰基载体为 ACP, - 氧化中酰基载体是 乙酰 CoA 磷脂代谢合成磷脂所需能量来自:CTP 胆固醇代谢在体内可直接合成胆固醇的化合物是:脂酰 CoA 第十一章 氨基酸与蛋白质代谢几种氨基酸生酮氨基酸:Leu、Lys 生糖氨基酸:除 Leu、Lys 外的生酮兼生糖氨基酸:Phe、Tyr 、 Trp、Thr 、I le 、Lys 可转变为乙酰 CoA的氨基酸:能与糖链发生糖基化的氨基酸:脱氨基氧化脱氨基:L-Glu 联合脱氨基:组织中嘌呤核苷酸循环:骨骼肌、心肌中直接排氨的动物:水生动物( 鱼 )、原生动物氨的代谢氨的储存与
23、转运:储存方式:转运方式: 丙氨酸 - 葡萄糖循环、谷氨酰胺- 谷氨酸循环 骨骼肌中脱氨基产生的氨通过什么途径转入肝脏:丙氨酸 - 葡萄糖循环氨的去路 - 鸟氨酸循环 (尿素循环 )名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 部位: 肝(线粒体、胞质)终产物: 尿素关键酶: 鸟氨酸循环生成尿素的前体是:Arg 产物 - 尿素中 N的来源: N2-Asp 个别氨基酸的代谢组胺的形成:His 脱羧 第十二章 核苷酸代谢核苷酸合成代谢 嘌呤碱基与嘧啶碱基中各原子来源嘌呤碱基 N1-Asp C2、 C8-C1(一碳单位)N3、 N
24、9-Gln C4、 C5、N7-Gly C6-CO2 嘧啶碱基C2-CO2 N3-Gln N1、 C4、C5、C6-Asp 脱氧核苷酸的合成 脱氧发生在 NDP(核苷二磷酸)水平 dTMP生成发生在 NMP水平 合成嘌呤需氨基酸:Asp、Gln、 Gly 合成嘧啶需氨基酸:Gln 、Asp 嘧啶核苷酸合成的重要中间产物是:OMP 核苷酸分解代谢嘌呤分解代谢名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页,共 12 页精选学习资料 - - - - - - - - - 人体嘌呤分解代谢主要终产物:尿酸人、猿以外哺乳动物嘌呤代谢终产物:尿囊素 代谢综合总结:名师归纳总结 联系糖、脂、蛋白三大物质代谢的关键物质是:乙酰 CoA、丙酮酸第 12 页,共 12 页氨甲蝶呤抑制:嘌呤核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸的从头合成- - - - - - -