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1、1，CDER 评审官指南（1994年 11月）对用于评估系统适应性的典型参数进行了定义和讨论。2，欧洲药典和美国药典有这方面的具体要求吗?在药典上没看到啊?我们出口欧洲和美国的:对照品一份连续进样56 针,计算 RSD,样品称取 2 份,每份进样 2 针最后回标对照品是什么意思?我们对照品一般是6 个月标一次的.没错,美国药典有具体要求.最后回标对照品指的是进完样品后,再进一针对照品,明白了吗?呵呵,你们工作没做好.最后你指的应该是工作对照品每隔6 个月复标一次.应该是指你的分析时间超过几小时后必须进一针对照品吧,如果你只有一个样品,而且很快能分析完,就不必再进对照品了,是吗?朋友5 定性依据
2、的是保留时间。定量依据的是与对照品的比对。HPLC 中常用的定量方法（主要以峰面积为基础），有：外标一点法，外标两点法，外标标准曲线，内标一点法，内标两点法，内标标准曲线；归一化法在一定的条件下也可以用作定量。6 降低流速，可以使两物质的保留时间显著延长，也就是两物质在柱上的保留增强，因此两物质的分离度应会有一定的提高，但是由于保留时间变长所有纵向扩散会明显增加，表现为色谱峰变宽。分离度增加可以减少干扰峰对样品的干扰，但是流速慢会使峰变宽，使柱效明显下降，延长了分析时间。所以色谱方法的目标，使分离度达到1.5以上，尽可能的提高分析速度。名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 1 页，
3、共 7 页 -高效液相色谱定量分析外表一点法的主要误差来源是什么?1、称样2、液相系统（进样）3、方法设计，系统适用性、精密度、线性范围.耐用性ICH Q2A 和 ICH Q2B 对耐用性是有论述的，它衡量的是分析方法在细微的变化下不受影响的能力。该实验应当是在分析方法开发过程中进行的，对实验结果进行讨论和/或递交。如果观察到有影响，需提供代表性仪器输出（如色谱图）。保留温度的作用是在程序升温达到一个平台保留一段平衡时间,可以起到缓冲和稳定作用,主要是平衡时间.当然是要逐级稀释啦，有标准规定一次稀释不能超过100 倍的对，在稀释倍数很大的情况下，由于现在移液器的精密度的影响，必须采用逐步稀释来
4、减小误差！被稀释溶液取样的绝对误差对稀释后溶液浓度相对误差的贡献大小问题。如果注意到无论是体积还是质量，取样的时候都是产生的绝对误差就明白了。稀释 100 倍，取 1ml 浓溶液稀释到100ml，如果取样误差是0.02ml，那么会造成稀释后稀溶液浓度存在2%的相对误差。如果你分2 次，每次稀释10 倍，那么你每次要取10ml 浓溶液，稀释到100ml，取样误差这时候仍然是0.02ml，那么每次带来的稀溶液相对误差就只有千分之二，两次就算命苦最终被叠加了，也只有千分之四，远小于一次稀释的百分之二。哦，当然，如果你分2 次的时候是每次取1ml，稀释到10ml，那么你的相对误差反倒是百分之四，更不准
5、了。所以逐级稀释并不一定就更好，更好的前提是每次稀释后体积相同。或者进行上面的误差计算看看结果色谱峰的纯度：就是峰里面没有包埋了其他物质的峰.很多以前做的方法,用现在的柱效高的柱子做,结果原来的峰变成了两个峰.所以现在做色谱含量方法都应该做个峰纯度的检测,不过以前(甚至现在)认为,只要线性、回收率、重现性、阴性(中药的阴性很多都没意义)实验能做出来并达到要求就代表峰是纯的了.名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 2 页，共 7 页 -加标回收实验;是化学分析中常用的实验方法,也是重要的质控手段,回收率是判定分析结果准确度的量化指标。加标实验及回收率的计算并不复杂,加标方式可根据不同
6、项目、不同分析方法和不同的需要灵活掌握,回收率的计算也各不相同,通常回收率(记作 R)计算的定义公式：R=（加标试样测定值-试样测定值）/加标量 100 通常要求在 90%-110%1 加标实验的一般原则(1)一致原则：样品与加标样同时按同一操作步骤和方法测定,保证实验条件一致。为提高准确度,样品和加标样可分别进行平行测试。(2)可比原则：加标样中原始样品的取样体积、稀释倍数及测试体积,尽可能与样品测试时一致。(3)相近原则：加标量应与样品中相应待测物含量相近,一般为试样含量的0.52 倍,加标后的总量不超过测定上限,如含量小于检出下限时,可按检出限量加标。(4)不变原则：加标物的浓度宜高,加
7、标体积宜小,一般不超过原始试样体积的1%,保持样品的基体不变(5)适用原则：容易实施,便于回收率计算。在进行质量研究的过程中，一项重要的工作就是要对质量标准中所涉及到的分析方法进行方法学验证，以保证所用的分析方法确实能够用于在研药品的质量控制。为规范对各种分析方法的验证要求，我国已于2005 年颁布了分析方法验证的指导原则。该指导原则对需要验证的分析方法及验证的具体指标做了比较详细的阐述。但是文中未涉及各具体指标在验证时的可接受标准，国际上已颁布的指导原则中也未发现相关的要求。另一方面，大多数药品研发单位在进行质量研究时，已逐步认识到分析方法验证的必要性与重要性，大都也在按照指导原则的要求进行
8、分析方法验证，但验证完后却因没有一个明确的可接受标准，而难以判断该分析方法是否符合要求。本文结合国外一些大型药品研发企业在此方面的要求，提出了在对含量测定方法进行验证时的可接受标准，供国内的药品研发单位在进行研究时参考。1准确度该指标主要是通过回收率来反映。验证时一般要求分别配制浓度为80、100和 120的供试品溶液各三份，分别测定其含量，将实测值与理论值比较，计算回收率。可接受的标准为：各浓度下的平均回收率均应在98.0%-102.0%之间，9 个回收率数据的相对标准差（RSD）应不大于 2.0%。2线性线性一般通过线性回归方程的形式来表示。具体的验证方法为：在 80至 120的浓度范围内
9、配制6 份浓度不同的供试液，分别测定其主峰的面积，计算相应的含量。以含量为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），进行线性回归分析。名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 3 页，共 7 页 -可接受的标准为：回归线的相关系数（R）不得小于 0.998，Y 轴截距应在100响应值的 2以内，响应因子的相对标准差应不大于2.0%。3精密度1）重复性配制 6 份相同浓度的供试品溶液，由一个分析人员在尽可能相同的条件下进行测试，所得 6 份供试液含量的相对标准差应不大于2.0%。2）中间精密度配制 6 份相同浓度的供试品溶液，分别由两个分析人员使用不同的仪器与试剂进行测试，所得12 个含量数据
10、的相对标准差应不大于2.0%。4专属性可接受的标准为：空白对照应无干扰，主成分与各有关物质应能完全分离，分离度不得小于 2.0。以二极管阵列检测器进行纯度分析时，主峰的纯度因子应大于 980。5检测限主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于3。6定量限主峰与噪音峰信号的强度比应不得小于10。另外，配制 6 份最低定量限浓度的溶液，所测 6 份溶液主峰的保留时间的相对标准差应不大于2.0%。7耐用性分别考察流动相比例变化 5、流动相 pH 值变化 0.2、柱温变化 5、流速相对值变化 20时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰与杂质峰必须达到基
11、线分离；各条件下的含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%。8、系统适应性配制 6 份相同浓度的供试品溶液进行分析，主峰峰面积的相对标准差应不大于 2.0%，主峰保留时间的相对标准差应不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于 2.0，主峰与杂质峰必须达到基线分离，主峰的理论塔板数应符合质量标准的规定。名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 4 页，共 7 页 -回收率 是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度，损失越少，回收率越高，如果作标液 1ppm，就是 1 毫克/升，而作出标准数据为0.99 毫克/升，就是说你的回收率是 99，这个与真实成分有密切的关系，说明方法的准
12、确度。意义就是回收率能反应该方法对我们测试的项目损失多少，当然回收率也有可能在 100%以上空白加标回收：在没有被测物质的空白样品基质中加入定量的标准物质，按样品的处理步骤分析，得到的结果与理论值的比值即为空白加标回收率。样品加标回收：相同的样品取两分，其中一份加入定量的待测成分标准物质；两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标回收率。加标回收率的测定,是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术.对于它的计算方法，文献中均给定了一个理论公式：加标回收率=(加标试样测定值试样测定值)加标量 100%名师资料总结-精品资
13、料欢迎下载-名师精心整理-第 5 页，共 7 页 -GMP 认证程序广州国健医药咨询服务有限公司提供专业的药品GMP 认证咨询服务。一、申请药品 GMP 认证企业应向省药品监管局领取药品 GMP 认证申请书，并按药品 GMP 认证管理办法的规定报送如下资料:1、药品生产许可证和营业执照（复印件）；2、药品生产管理和质量管理自查情况（包括企业概况、GMP 实施情况及培训情况）；3、药品生产企业（车间）的负责人、检验人员文化程度登记表；高、中、初级技术人员的比例情况表；4、药品生产企业（车间）生产的组织机构图（包括各组织部门的功能及相互关系，部门负责人）；5、药品生产企业（车间）生产的所有剂型和注
14、册品种表；6、药品生产企业（车间）的环境条件、仓储及总平面布置图；7、药品生产车间概况及工艺布局平面图（包括更衣室、盥洗间、人流和物料通道、气闸等，并标明空气洁净度等级,同时附洁净度级别测试报告、安全、环保、消防、卫生防疫、计量、医药专业设计等部门的验收意见）；8、所生产剂型或品种工艺流程图，并注明主要过程控制点；9、药品生产企业（车间）的关键工序、主要设备验证情况和检验仪器、仪表校验情况；10、药品生产企业（车间）生产管理、质量管理文件目录；11、新开办的药品生产企业（车间）申请GMP 认证，除报送上述2-10 项规定的资料外，还须报送开办的药品生产企业（车间）批准立项文件和拟生产的品种或剂型 3 批试生产记录；12、上述文件以 WORD 文档格式保存的软磁盘（1 张）。名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 6 页，共 7 页 -二、省药品监管局收到完整的申请资料之日起5 个工作日内，对申请资料进行初审，并决定是否进行现场审查（新建、改建、扩建的企业原则上都应现场审查）。三、省药品监管局对需进行现场审查的企业在完成资料初审后10 个工作日内进行现场审查，现场审查后5 个工作日内提出初审意见。四、将初审意见及申请资料报送国家药品监管局，待现场认证。参考资料：广州国健医药咨询服务有限公司名师资料总结-精品资料欢迎下载-名师精心整理-第 7 页，共 7 页 -