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1、现在学习的是第1页，共28页基础知识：基础知识：水体中的微生物主要来源于土壤、以及人类和动水体中的微生物主要来源于土壤、以及人类和动物的排泄物。物的排泄物。其中，能够引起疾病的微生物称之为病原微生物。其中，能够引起疾病的微生物称之为病原微生物。与水有关的微生物感染疾病主要有：霍乱、伤寒与水有关的微生物感染疾病主要有：霍乱、伤寒、沙眼、血吸虫病、军团病等。、沙眼、血吸虫病、军团病等。目前，目前，80%的疾病都与水有关。的疾病都与水有关。现在学习的是第2页，共28页水中常见的病原细菌：水中常见的病原细菌：1 致病性大肠杆菌致病性大肠杆菌 2 伤寒杆菌伤寒杆菌（沙门氏菌）（沙门氏菌）3 痢疾杆菌痢疾
2、杆菌（志贺氏菌）（志贺氏菌）4 霍乱弧菌霍乱弧菌 5 军团菌军团菌 6 粪链球菌粪链球菌现在学习的是第3页，共28页水中常见的病毒：水中常见的病毒：1 肠道病毒（脊髓灰质炎病毒等）肠道病毒（脊髓灰质炎病毒等）2 肝炎病毒肝炎病毒 3 轮状病毒轮状病毒 4 冠状病毒（冠状病毒（SARS）现在学习的是第4页，共28页水中常见的病原性原生动物及寄生虫：水中常见的病原性原生动物及寄生虫：1 隐孢子虫和贾第鞭毛虫（两虫）隐孢子虫和贾第鞭毛虫（两虫）2 溶组织内阿米巴（痢疾阿米巴）溶组织内阿米巴（痢疾阿米巴）3 蛔虫蛔虫 4 血吸虫血吸虫现在学习的是第5页，共28页第二节第二节 水质生物学指标水质生物学指
3、标p 水质生物学指标用来评价水中的病原性微生物，预防流行性水质生物学指标用来评价水中的病原性微生物，预防流行性传染病爆发。传染病爆发。p 对每种病原微生物进行检测是不切实际的。对每种病原微生物进行检测是不切实际的。p 研究发现，水中病原微生物主要来源于人畜粪便。因此检研究发现，水中病原微生物主要来源于人畜粪便。因此检查人畜粪便中通常存在的微生物，作为评价水受粪便污染的查人畜粪便中通常存在的微生物，作为评价水受粪便污染的程度。程度。p 这样的微生物称作指示微生物。这样的微生物称作指示微生物。现在学习的是第6页，共28页第二节第二节 水质生物学指标水质生物学指标几种常用的指示微生物几种常用的指示微
4、生物p 病原细菌指示微生物：病原细菌指示微生物：细菌总数细菌总数;大肠菌群；粪大肠菌群大肠菌群；粪大肠菌群;粪链球菌粪链球菌;梭菌梭菌/产产气荚膜梭菌气荚膜梭菌p 病毒指示微生物：病毒指示微生物：SC噬菌体；噬菌体；F-RNA噬菌体；脆弱拟杆菌噬菌体噬菌体；脆弱拟杆菌噬菌体;脊髓脊髓灰质炎病毒灰质炎病毒p 病原性原生动物：病原性原生动物：隐孢子虫、贾第鞭毛虫隐孢子虫、贾第鞭毛虫现在学习的是第7页，共28页为何选择大肠菌群作为病原细菌指示微生物？为何选择大肠菌群作为病原细菌指示微生物？（1 1）大肠菌群的生理习性与大部分病原菌相似，并且）大肠菌群的生理习性与大部分病原菌相似，并且外界存活时间基本
5、一致；外界存活时间基本一致；（2 2）大肠菌群在人粪便中数量很大。）大肠菌群在人粪便中数量很大。（3 3）检验技术不复杂。）检验技术不复杂。大肠菌群大肠菌群第二节第二节 水质生物学指标水质生物学指标现在学习的是第8页，共28页大肠菌群的形态和生理特性大肠菌群的形态和生理特性1 1 种类种类 （1 1）大肠埃希氏杆菌（最为常见）大肠埃希氏杆菌（最为常见）Escherichia coliEscherichia coli；E.coli E.coli （2 2）产气杆菌）产气杆菌 （3 3）枸橼酸盐杆菌）枸橼酸盐杆菌 （4 4）副大肠杆菌）副大肠杆菌第二节第二节 水质生物学指标水质生物学指标 大肠菌群
6、大肠菌群现在学习的是第9页，共28页 大肠埃希氏杆菌大肠埃希氏杆菌特性特性 兼性好氧革兰氏阴性菌，无芽孢，两兼性好氧革兰氏阴性菌，无芽孢，两端钝圆短杆菌。大小约端钝圆短杆菌。大小约0.50.82.03.0微米。生长温度微米。生长温度1046摄氏度，适宜摄氏度，适宜温度温度37摄氏度，生长摄氏度，生长pH范围范围4.59.0，适，适宜的宜的pH为中性。能分解葡萄糖、甘露醇、为中性。能分解葡萄糖、甘露醇、乳糖等多种碳水化合物，并产酸产气，所乳糖等多种碳水化合物，并产酸产气，所产生的产生的CO2/H2为为1:1。远藤氏培养基上。远藤氏培养基上菌落呈红色、带金属光泽，直径约菌落呈红色、带金属光泽，直径
7、约23mm。第二节第二节 水质生物学指标水质生物学指标 大肠菌群大肠菌群现在学习的是第10页，共28页贾第虫病贾第虫病蓝氏贾第鞭毛虫所致蓝氏贾第鞭毛虫所致贾第虫滋养体贾第虫滋养体虫群隔离虫群隔离免疫缺陷及免疫功能低下者易发生严重感染免疫缺陷及免疫功能低下者易发生严重感染现在学习的是第11页，共28页症状：腹泻症状：腹泻96%、上腹痛、上腹痛61%、疲、疲乏乏72%、体重减轻、体重减轻62%、恶心、恶心60%、稀便稀便57%、腹胀、腹胀42%、发热、发热17%急性患者：暴发性腹泻、水样便、急性患者：暴发性腹泻、水样便、恶臭、腹痛等。恶臭、腹痛等。慢性患者：多见，周期性稀便，很慢性患者：多见，周期
8、性稀便，很 臭，反复发作。臭，反复发作。儿童较易感染，可出现脂肪痢。儿童较易感染，可出现脂肪痢。亚急性患者：间歇性稀便，腹痛等。亚急性患者：间歇性稀便，腹痛等。现在学习的是第12页，共28页隐孢子虫病隐孢子虫病隐孢子虫所致隐孢子虫所致寄生部位：寄生部位：人及哺乳动物的人及哺乳动物的 肠上皮细胞及呼肠上皮细胞及呼 吸道上皮细胞吸道上皮细胞感染途径：感染途径：经口误食被污染的食物或饮水经口误食被污染的食物或饮水感染期：卵囊感染期：卵囊现在学习的是第13页，共28页4.临床表现临床表现免疫功能缺陷型隐孢子虫病免疫功能缺陷型隐孢子虫病：症状多而重，持续时间长，直症状多而重，持续时间长，直 至死亡。多有
9、严重腹泻与吸收至死亡。多有严重腹泻与吸收 不良。不良。霍乱样水泻最常见，数霍乱样水泻最常见，数 十次十次/日。有脱水及酸中毒，体日。有脱水及酸中毒，体 重重 ，恶病质。，恶病质。现在学习的是第14页，共28页免疫功能正常型隐孢子虫病免疫功能正常型隐孢子虫病：自限性腹泻，自限性腹泻，510次次/日，可自日，可自 愈。大便量多，水样愈。大便量多，水样/粘液稀便，粘液稀便，无血便。无血便。可伴有上腹部疼痛、可伴有上腹部疼痛、恶心、呕吐、腹胀、厌食、体重恶心、呕吐、腹胀、厌食、体重 减轻等。少数可发热，头疼，婴减轻等。少数可发热，头疼，婴 幼儿可出现脱水及酸中毒。幼儿可出现脱水及酸中毒。现在学习的是第
10、15页，共28页第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法 主要内容：主要内容：1 细菌总数的测定细菌总数的测定 2 大肠菌群测定大肠菌群测定 1）发酵法）发酵法 2）滤膜法）滤膜法3）病毒监测方法（蚀斑检验法）病毒监测方法（蚀斑检验法）4）噬菌体监测方法（）噬菌体监测方法（ISO10705）5）原生动物的监测方法（）原生动物的监测方法（USEPA1623）现在学习的是第16页，共28页第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法 细菌总数的测定细菌总数的测定 将定量的水样接种将定量的水样接种于营养琼脂培养基中于营养琼脂培养基中，在，在37温度下培养温度下培养24hr后，计数生长
11、的后，计数生长的细菌菌落数，然后根细菌菌落数，然后根据接种的水样数量就据接种的水样数量就可算出每毫升水中的可算出每毫升水中的细菌数。细菌数。1ml1ml1ml1ml1ml1ml 原水原水9毫升无菌水毫升无菌水1ml1ml1mlCK对照对照先接种稀释水样先接种稀释水样 再倾注培养基再倾注培养基10-210-337培养培养现在学习的是第17页，共28页 大肠菌群的测定：发酵法大肠菌群的测定：发酵法第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法水样水样接种接种初步初步发酵发酵产酸产酸产气产气大肠菌群大肠菌群 厌氧芽孢杆菌厌氧芽孢杆菌 好氧芽孢杆菌好氧芽孢杆菌大肠菌群大肠菌群 好氧芽孢杆菌好氧芽孢
12、杆菌阳性管阳性管大肠菌群大肠菌群 革兰氏阴性无芽孢革兰氏阴性无芽孢革兰氏革兰氏染色染色产生产生 典型菌落典型菌落鉴别培养基鉴别培养基 平板分离平板分离产酸产酸产气产气复发酵复发酵三步：（三步：（1）初步发酵试验；初步发酵试验；（2）平板分离）平板分离；（3）复发酵试验）复发酵试验现在学习的是第18页，共28页 大肠菌群的测定：发酵法大肠菌群的测定：发酵法说明：说明：（1）采用含有乳糖的培养基，则分析结果不包括副大）采用含有乳糖的培养基，则分析结果不包括副大肠杆菌；采用葡萄藤或甘露醇培养基，则分析结果包括肠杆菌；采用葡萄藤或甘露醇培养基，则分析结果包括副大肠杆菌副大肠杆菌.因为副大肠杆菌分解乳糖
13、缓慢或不能分解因为副大肠杆菌分解乳糖缓慢或不能分解（2）我国一般采用乳糖培养基）我国一般采用乳糖培养基第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法现在学习的是第19页，共28页方法：将水样置于乳糖液体培养基中，方法：将水样置于乳糖液体培养基中，37培养培养24h，观察产酸和产气情况。，观察产酸和产气情况。如如产酸产气可初步确定有大肠菌群。产酸产气可初步确定有大肠菌群。产酸：溴甲酚紫作指示剂，培养基由紫色产酸：溴甲酚紫作指示剂，培养基由紫色 变为黄色。变为黄色。产气：杜氏小管顶端有气泡。产气：杜氏小管顶端有气泡。杜氏小管杜氏小管产酸产气的菌有产酸产气的菌有:1:1 大肠菌群大肠菌群;2;2
14、 厌氧芽孢杆菌厌氧芽孢杆菌;3;3 好氧芽孢杆菌好氧芽孢杆菌第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法发酵法测定大肠菌群步骤：发酵法测定大肠菌群步骤：1 初步发酵试验初步发酵试验现在学习的是第20页，共28页（1）将第一步产酸产气的菌落划线接种在远藤氏培养基或伊红美兰培将第一步产酸产气的菌落划线接种在远藤氏培养基或伊红美兰培养基表面，养基表面，37培养培养24h，目的阻止厌氧芽孢杆菌生长。，目的阻止厌氧芽孢杆菌生长。（2）革兰氏染色）革兰氏染色 取有典型菌落特征的单个菌落进行革兰氏染色。取有典型菌落特征的单个菌落进行革兰氏染色。大肠菌群和好氧芽孢杆菌生长。同时大肠菌大肠菌群和好氧芽孢杆
15、菌生长。同时大肠菌群有特征性菌落出现。群有特征性菌落出现。发酵法测定大肠菌群步骤：发酵法测定大肠菌群步骤：2 平板分离平板分离第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法大肠菌群：革兰氏阴性菌、不生芽孢、好氧。大肠菌群：革兰氏阴性菌、不生芽孢、好氧。好氧芽孢杆菌：革兰氏阳性菌、生芽孢、好氧。好氧芽孢杆菌：革兰氏阳性菌、生芽孢、好氧。现在学习的是第21页，共28页 将可疑菌落（革兰氏阴性、大肠杆菌特征菌落）移接将可疑菌落（革兰氏阴性、大肠杆菌特征菌落）移接于乳糖液体培养基中，于乳糖液体培养基中，37培养培养24h。产酸产气者确定为有大肠菌群存在。产酸产气者确定为有大肠菌群存在。最后根据最后
16、根据有大肠菌群的阳性管数查表或通过公有大肠菌群的阳性管数查表或通过公式计算。式计算。发酵法测定大肠菌群步骤：发酵法测定大肠菌群步骤：3 复发酵试验复发酵试验第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法现在学习的是第22页，共28页现在学习的是第23页，共28页1、抽滤法过滤定量水样，将细菌截留在滤膜上。、抽滤法过滤定量水样，将细菌截留在滤膜上。2、将滤膜、将滤膜中没有细菌的一面贴在品红硫酸钠培养基或伊红美蓝固体中没有细菌的一面贴在品红硫酸钠培养基或伊红美蓝固体培养基上，以培育和获得单个菌落。培养基上，以培育和获得单个菌落。3、将滤膜上符合大肠菌群菌落特征的菌落进行革兰氏、将滤膜上符合大肠
17、菌群菌落特征的菌落进行革兰氏染色、镜检。染色、镜检。4、将革兰氏染色阴性无芽孢杆菌的菌落接种到含糖培养基、将革兰氏染色阴性无芽孢杆菌的菌落接种到含糖培养基中，根据产气与否来判断有无大肠菌群存在、中，根据产气与否来判断有无大肠菌群存在、5、根据滤膜上大肠菌落数和水样体积，计算结果。、根据滤膜上大肠菌落数和水样体积，计算结果。滤膜法测定大肠菌群步骤：滤膜法测定大肠菌群步骤：第三节第三节 水的卫生学检验方法水的卫生学检验方法现在学习的是第24页，共28页现在学习的是第25页，共28页生活饮用水的卫生学标准生活饮用水的卫生学标准（GB5749-2006）第三节第三节 水质生物学指标水质生物学指标常规指标常规指标:总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌群总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌群(MPN/100ml或或CFU/100ml)不得检出不得检出细菌总数细菌总数(CFU/100ml)100非常规指标非常规指标:贾第鞭毛虫贾第鞭毛虫(个个/10L)1隐孢子虫隐孢子虫(个个/10L)1现在学习的是第26页，共28页现在学习的是第27页，共28页现在学习的是第28页，共28页