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1、关于影响血型鉴定常见的问题及处理方法第一页，讲稿共三十二页哦v准确的血型鉴定是临床安全有效输血的重要保证，使输血的成分能在受着体内有效存活，无不良反应，即输入的红细胞在受着体内必须不凝集不溶血，输入的血浆成分不导致受者自身红细胞显著破坏，才能使受者获得恢复健康所需的血液。第二页，讲稿共三十二页哦ABO定型试验中常见的问题：一、标本问题二、试剂问题三、实验者操作技术的错误四、红细胞标本问题五、血清标本的问题第三页，讲稿共三十二页哦一、标本问题一、标本问题 血型鉴定血液标本的严格要求是安全输血的关键性措施之一，首先对标本进行科学管理，确保标本一一对应防止“张冠李戴”。1.所用标本要能够恰当反映受血
2、者目前的免疫学状态。v 2.受血者配血试验的血标本必须是输血前3天内采集的。v 3.如果受血者需要再次输注红细胞，尤其是受血者最后一次输注红细胞间隔了24小时，应重新采集一份血样进行交叉配血试验，防止新的不规则抗体产生。第四页，讲稿共三十二页哦二、试剂问题二、试剂问题v 血型定型试剂是做好定型的基础。现在单克隆试剂是通过杂交瘤技术生产的，其效价、特异性、亲和力都较人血清有很大进步，但试剂的运输、贮存等条件不适可导致试剂变质失效，造成鉴定错误。在实验前进行试剂外观、效价等项目质量控制。不同抗凝剂的血液制备的标准红细胞质量也不同，各实验室依据要求正确配制红细胞浓度。第五页，讲稿共三十二页哦第六页，
3、讲稿共三十二页哦v2.造成假阳性结果原因：第七页，讲稿共三十二页哦v1.患者近期接受了大量ABO血型相容但不同型的红细胞，如骨髓移植患者，或非O型人接受O型红细胞。v2.某些ABO基因变异的个体或ABO亚型红细胞，一些白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗A、抗B试剂未能出现预期的凝集反应。第八页，讲稿共三十二页哦v3.红细胞获得性或遗传性的异常，如获得性B抗原红细胞或Tn/T多凝集红细胞，人血清抗A、抗B试剂可能与这些异常的红细胞反应。v4.使用未洗涤的红细胞标本，其表面黏附的血浆或血清中含针对抗A、抗B试剂中染色剂或其他成分的抗体，出现假阳性反应。第九页，讲稿共三十二页哦v
4、5.患者血清中有高活性、高浓度冷自身抗体严重致敏自身红细胞，以至自发地发生凝集，而不是抗体试剂的特异性免疫反应所致。6.红细胞表面包被IgG类抗体 7.静脉输入高分子药物如甘露醇、右旋糖酐等，可导致红细胞成緍钱状。第十页，讲稿共三十二页哦五、血清标本的问题v1.纤维蛋白凝集的红细胞凝块被误认为是血液凝集，如使用血浆标本或未完全去除纤维蛋白的血清标本时出现假阳性。v2.免疫抑制疾病患者血清中ABO抗体减少或消失。老年人ABO抗体减弱。v3.新生儿6个月内婴儿血清中ABO抗体阴性或很弱，一般只测正定不测反定。第十一页，讲稿共三十二页哦v4.血清中不正常浓度和比例的蛋白质成分或高分子蛋白增多可引起非
5、特异凝集，如缗钱状红细胞的非特异凝集。v5.血清中含抗A、抗B以外的其他红细胞抗体，如抗M、抗I等。v6.患者接受了ABO血型不同的骨髓移植。第十二页，讲稿共三十二页哦v7.患者血清中含有针对红细胞保护剂的抗体。v8.ABO抗体被输入的液体稀释。第十三页，讲稿共三十二页哦结果分析和处理的基本步骤1.重新采集标本，以避免采集、标记、污染等错误。2.查询患者临床诊断、既往病史、输血史、用药史、骨髓移植史。3.彻底洗涤标本或试剂红细胞。4.应用抗AB、抗A1、或抗H检测红细胞。第十四页，讲稿共三十二页哦5.分析抗筛结果，确定结果是否受同种异型或自身冷抗体干扰。6.室温孵育30min后，离心观察结果，
6、以检测弱的抗原抗体反应。7.做自身红细胞做对照，以确定自身抗体的干扰。第十五页，讲稿共三十二页哦ABO正反定不符的分类一、抗原表达减弱或丢失所致的ABO正反定不符 二、红细胞额外反应所致的ABO正反定不符三、意外的血清学反应所致的ABO正反定不符第十六页，讲稿共三十二页哦一、抗原表达减弱或丢失 所致的ABO正反定不符v常见的原因：1.ABO亚型红细胞2.白血病或其他恶性疾病患者的红细胞ABO抗原太弱，应用抗A、抗B试剂未能出现预期的凝集反应3.急性大出血第十七页，讲稿共三十二页哦v处理的方法：1.将抗A、抗B和抗A，B试剂与洗涤过的红细胞在室温或4 孵 育3 0 m i n，以 增 强 抗 原
7、、抗 体 的 结 合。2.用木瓜酶、菠萝蛋白酶处理红细胞，以增强抗原、抗体的结合。3.应用抗AB、抗A1、或抗H检测红细胞。第十八页，讲稿共三十二页哦4.用人血清抗A、抗B进行吸收放散试验，检测弱A、B抗原，且同时要做O型血吸收放散试验作对照。第十九页，讲稿共三十二页哦二、红细胞额外反应 所致的ABO正反定不符v常见的原因1.获得性B红细胞（类B）2.混合视野凝集(mf)3.红细胞被致敏第二十页，讲稿共三十二页哦获得性B红细胞的特征1.常出现在有肠道细菌进入血循环的疾病，也可发生在正常人；3.常伴有T和Tn多凝集红细胞出现(细菌感染时)；4.自身抗-B不与自身获得性B抗原反应(无自凝现象)第二
8、十一页，讲稿共三十二页哦获得性B红细胞的鉴定1.酸化血清抗-B试剂pH至6.0时，检测无凝集，即不与获得性B细胞反应2.乙酸酐处理能明显减弱其反应，但正常B细胞不受影响3.临床追踪，感染控制后“类B”现象消失第二十二页，讲稿共三十二页哦混合视野凝集v1.非O型人近期输用O型血；v2.骨髓移植后做血型；v3 A3(B3)细胞与抗A(抗-B)呈典型的混合视野凝集现象；v4.双精子受精（嵌合体）第二十三页，讲稿共三十二页哦红细胞被致敏v1.患HDN婴儿、存在自身免疫或同种异体免疫的成人，其红细胞严重包被IgG抗体分子；v2.与含一定蛋白质浓度的试剂（抗D、抗A、抗B）产生凝集；v3.处理方法：45
9、放散后，抗体解离，即可准确定型；第二十四页，讲稿共三十二页哦三、意外的血清学反应所致的ABO正反定不符常见的原因及处理方法：1.抗体太弱或消失如4-6个月幼儿，老年人、免疫抑制患者，应注意患者的年龄和临床诊断2.非正常高浓度的抗A、抗B可引起前带现象，导致假阴性，将血清稀释或用EDTA（2.5）处理可消除；第二十五页，讲稿共三十二页哦3.A2、A2B或其他ABO亚型，人血清中可能有抗A1，抗A1只凝集A1型红细胞而不凝集A2、O型红细胞；4.患者静脉输用了大量大分子药物等原因，可发生类似凝集现象，如缗钱状凝集，将血清用生理盐水稀释3倍或用盐水替换技术可消除；第二十六页，讲稿共三十二页哦5.冷自
10、身抗体 所有试剂及细胞37孵育,37下判读结果;将冷自身抗体在4吸收在做血型,将血清用0.01mol/L 二硫苏糖醇(DTT)处理完再定型；第二十七页，讲稿共三十二页哦6.自身免疫性温型抗体 正定被易被误认为AB型，反定易被误认为O型，用递增温度(22，37，45)洗涤红细胞后再做血型鉴定7.血清蛋白过高 试剂红细胞多呈假凝集，如肝脏疾病、MM等，加盐水稀释后凝集散开第二十八页，讲稿共三十二页哦Rh血型1.导致Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因(1)直抗(DAT)阳性；(2)标本抗凝不当，受检过程中出现凝血或出现纤维蛋白凝块，误判为阳性；(3)受检细胞与抗血清孵育的时间过长；(4)定型血清中含有事先未被检测的其他特异性抗体，造成假阳性定型结果；第二十九页，讲稿共三十二页哦v(5)多凝集细胞，造成定型的假阳性，如MM。v(6)检定用器材或抗体被污染，造成假阳性。v2.导致Rh血型鉴定可能出现假阴性的原因v(1)DAT强阳性。v(2)红细胞与血清比例失调。v(3)定型试剂漏加、错加、失效。v(4)观察不仔细v(5)弱D抗原第三十页，讲稿共三十二页哦(1)D：正常D抗原(2)弱D：抗原数量减少，表位基本完整,D抗原只是量的减少，无质的改变第三十一页，讲稿共三十二页哦感谢大家观看感谢大家观看第三十二页，讲稿共三十二页哦