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1、关于生理活动活体染色现在学习的是第1页，共26页今天实验内容 细胞的渗透现象细胞生理活动 巨噬细胞吞噬 动、植物细胞的液泡系活体染色实验分组：自由组合，每组2-4人。值日分组：7组现在学习的是第2页，共26页 实验前确定实验用具、药品是否齐全 检查实验用具是否清洁、无污染，这是实验成功的首要条件 实验过程中尽量保持安静 多动手多动脑，不局限于要求的实验内容 实验结束后清理实验台、清洗实验用具 离开实验室前检查实验用具是否齐全 值日生清理实验台、水池、地面实验注意事项现在学习的是第3页，共26页 1.11.1细胞的渗透现象细胞的渗透现象现在学习的是第4页，共26页 细胞膜是细胞与环境进行物质交换
2、的选择性屏障。细细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择性屏障。细胞膜具有通透性胞膜具有通透性,是半透膜。是半透膜。细胞内外存在渗透压差时水分子总是从渗透压低细胞内外存在渗透压差时水分子总是从渗透压低处扩散到渗透压高处，这种现象称为处扩散到渗透压高处，这种现象称为渗透渗透。渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。作用是细胞膜的主要功能之一。当细胞处于低渗溶液中时，水分进入细胞当细胞处于低渗溶液中时，水分进入细胞,可使细胞可使细胞胀破胀破.当细胞处于高渗溶液中时，细胞失水，原当细胞处于高渗溶液中时，细胞失水，原生质浓缩，细胞皱缩。生质浓缩，细胞皱缩。实验原理现在学习的是第5页，共26页细胞的渗透现象现
3、在学习的是第6页，共26页植物细胞与外界水溶液构成的渗透系统细胞膜细胞膜液泡质液泡质液泡膜液泡膜原生质层原生质层质壁分离当外界溶液浓度大于细胞液浓度时细胞失水发生收缩,由于细胞伸缩性小不能随原生质浓缩变形,细胞膜与细胞壁之间出现分离.质壁分离的复原:当外界溶液浓度小于细胞液浓度的时候，水可进入细胞,使细胞恢复原来状态现在学习的是第7页，共26页实验准备材料:洋葱、家兔红细胞悬液、1%鸡红细胞悬液、小白鼠仪器和器材:显微镜、眼科剪子、眼科镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸试剂:500U/ml肝素、0.4%1.2%和4%的氯化钠水溶液、含有台酚蓝6%淀粉肉汤 现在学习的是第8页，共26页动物细胞的渗透现
4、象1.2%NaCl盖片、观察盖片、观察盖片、观察盖片、观察0.4%NaCl一滴兔红细胞悬液一滴兔红细胞悬液一滴兔红细胞悬液一滴兔红细胞悬液一滴兔红细胞悬液一滴兔红细胞悬液盖片、观察盖片、观察实验操作现在学习的是第9页，共26页植物细胞的渗透现象一小块洋葱表皮一小块洋葱表皮一滴清水一滴清水盖片、观察盖片、观察盖片、观察盖片、观察一小块洋葱表皮一小块洋葱表皮4%NaCl取下盖玻片，在一侧滴清水，取下盖玻片，在一侧滴清水，另一侧吸出另一侧吸出观察质壁分离复原观察质壁分离复原现在学习的是第10页，共26页1.2 1.2 巨噬细胞的吞噬巨噬细胞的吞噬现在学习的是第11页，共26页单核细胞：由骨髓生成，在
5、血液内仅生活单核细胞：由骨髓生成，在血液内仅生活3 34 4天，即进入天，即进入肝、脾、肺和淋巴等组织转变为巨噬细胞。变为巨噬细胞肝、脾、肺和淋巴等组织转变为巨噬细胞。变为巨噬细胞后，体积加大，溶酶体增多，吞噬和消化能力也增强。后，体积加大，溶酶体增多，吞噬和消化能力也增强。巨噬细胞吞噬对象：病毒、疟原虫和细菌等。巨噬细胞吞噬对象：病毒、疟原虫和细菌等。巨噬细胞还参与激活淋巴细胞的特异免疫功能。巨噬细胞还参与激活淋巴细胞的特异免疫功能。巨噬细胞能够识别和杀伤肿瘤细胞，清除衰老与损伤细胞巨噬细胞能够识别和杀伤肿瘤细胞，清除衰老与损伤细胞实验原理白细胞白细胞机体的防御细胞机体的防御细胞粒细胞系粒细
6、胞系单核细胞系单核细胞系淋巴细胞系淋巴细胞系现在学习的是第12页，共26页巨噬细胞吞噬过程由于趋化作用向异物游走由于趋化作用向异物游走 伸出伪足包绕异物伸出伪足包绕异物 内吞作用将异物吞入细胞内吞作用将异物吞入细胞 吞噬泡与溶酶体融合吞噬泡与溶酶体融合 异物被消化异物被消化现在学习的是第13页，共26页实验操作实验前两天每天向小白鼠腹腔注射淀粉肉汤（台酚实验前两天每天向小白鼠腹腔注射淀粉肉汤（台酚蓝），实验前蓝），实验前30分钟腹腔注入分钟腹腔注入 1ml 鸡红细胞悬液鸡红细胞悬液处死、剖开腹腔处死、剖开腹腔1ml 生理盐水生理盐水搅拌取腹腔液搅拌取腹腔液滴片观察滴片观察现在学习的是第14页，
7、共26页现在学习的是第15页，共26页现在学习的是第16页，共26页液泡系的活体染色现在学习的是第17页，共26页 细胞内凡是由膜包裹的小泡和液泡，除线粒体和质体外，细胞内凡是由膜包裹的小泡和液泡，除线粒体和质体外，都属于液泡系，都由单层膜包围。都属于液泡系，都由单层膜包围。种类：动植物细胞都含有液泡，共有约种类：动植物细胞都含有液泡，共有约1313种，有些为植种，有些为植物细胞所特有。物细胞所特有。高尔基液泡、收缩泡、包被小泡：溶酶体、圆球体、糊粉粒：含各种水解酶，功能是消化，由内膜系统生成；微体：过氧化物酶体、乙醛酸循环体，特殊代谢酶系；消化泡、吞噬泡、残体：与胞吞作用相关；中央液泡：由起
8、源于内质网的小泡合并而成。现在学习的是第18页，共26页 动物细胞高尔基区的液泡主要功能是蛋白质的浓缩与凝结，动物细胞高尔基区的液泡主要功能是蛋白质的浓缩与凝结，软骨细胞软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体，能合成与分泌软骨粘蛋白及胶原纤维等，因而液泡体，能合成与分泌软骨粘蛋白及胶原纤维等，因而液泡系发达。系发达。植物细胞幼期，液泡很小，但随着细胞生长，液泡长植物细胞幼期，液泡很小，但随着细胞生长，液泡长大。小液泡逐渐大。小液泡逐渐合并合并为大液泡，位于细胞中央，占有为大液泡，位于细胞中央，占有大部分的细胞体积。植物细胞的大液泡主要成分为水
9、，大部分的细胞体积。植物细胞的大液泡主要成分为水，起渗透调节作用起渗透调节作用。液泡中溶解的溶质种类繁多，其来源与质膜、内质网、液泡中溶解的溶质种类繁多，其来源与质膜、内质网、高尔基器关系密切高尔基器关系密切。现在学习的是第19页，共26页 活体染色是能使生活的细胞或组织特异性着色，但对活样品活体染色是能使生活的细胞或组织特异性着色，但对活样品又没有毒害作用的一种染色方法，其目的是显示生活细胞内又没有毒害作用的一种染色方法，其目的是显示生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命活动，也不产生任何物理、的某些结构，而不影响细胞的生命活动，也不产生任何物理、化学变化，不会引起细胞死亡。并非任何染料均
10、可用于活体化学变化，不会引起细胞死亡。并非任何染料均可用于活体染色，理论上应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，染色，理论上应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，且使用时需要配成稀淡的溶液。且使用时需要配成稀淡的溶液。詹纳斯绿詹纳斯绿B(Janus green B)和中性红和中性红(neutral red)是活是活体染色剂中最重要的染料，对于线粒体和液泡系的染色分别体染色剂中最重要的染料，对于线粒体和液泡系的染色分别具有专一性。具有专一性。中性红只将液泡系染成红色，在细胞处于生中性红只将液泡系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色活状态时，细胞质及核不被染色。詹纳斯绿詹纳斯绿B
11、是一种活体是一种活体染色剂，专一用于线粒体的染色。它可以和线粒体中的细胞染色剂，专一用于线粒体的染色。它可以和线粒体中的细胞色素色素C氧化酶结合，从而出现蓝绿色氧化酶结合，从而出现蓝绿色。现在学习的是第20页，共26页现在学习的是第21页，共26页 一小块胸骨剑突 中性红 10min 吸去染液 加一滴Ringer 盖片观察 一块洋葱内表皮 中性红-詹纳斯绿B 30min 盖片观察现在学习的是第22页，共26页处死蟾蜍的方法处死蟾蜍的方法：左手握住蟾蜍的身体和四肢，使其腹部贴左手握住蟾蜍的身体和四肢，使其腹部贴着掌心，食指压住蟾蜍头部前端使其尽量着掌心，食指压住蟾蜍头部前端使其尽量腹屈。在头与躯干之间可触及一凹陷腹屈。在头与躯干之间可触及一凹陷(即枕即枕骨大孔所在处骨大孔所在处)，右手持解剖针直插入此凹陷，右手持解剖针直插入此凹陷约约2 mm2 mm，将针尖转向头侧插入颅腔捣毁脑，将针尖转向头侧插入颅腔捣毁脑组织。将解剖针向尾侧刺入脊椎管内捣毁组织。将解剖针向尾侧刺入脊椎管内捣毁其脊髓。直至其四肢伸直、肌肉松驰为止其脊髓。直至其四肢伸直、肌肉松驰为止。现在学习的是第23页，共26页现在学习的是第24页，共26页洋葱表皮细胞质壁分离的显微照片现在学习的是第25页，共26页感谢大家观看感谢大家观看现在学习的是第26页，共26页