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1、氯化汞与家兔急性肾功能不全【摘要】目的 学习用氯化汞复制急性肾功能不全的动物模型；观察急性肾功能不全时蛋白尿、 血肌酐、肾酚红排泄率的变化， 并根据实验结果分析和讨论致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。方法 本次实验共分为两大组，肾衰组和对照组。 用分光光度计测量吸光度的方法算出血肌酐、尿肌酐和酚红排出量，然后再通过计算公式计算出肌酐清除率和酚红排泄率。结果 肾衰模型组家兔肾脏体积变大，颜色较浅，外表出现颗粒，体重比正常组重得多，血清肌酐41.7mg% ，尿肌酐 12.25mg% ；对照组血清肌酐7.97mg% ，尿肌酐 2.25mg% ，酚红排泄率 50% 。结论 急性肾功能不全会引
2、肾小管上皮细胞受损，从而导致起肾小管的重吸收功能障碍和分泌功能障碍。【实验原理 】肾脏是一个多功能的器官，具有排泄、调节、内分泌等功能。引起急性肾功能不全主要原因有肾前性、肾性、肾后性三种。氯化汞是重金属盐，家兔皮下或肌肉注射 10g/L 氯化汞，可引起以肾小管坏死为主的急性肾功能不全。急性肾功能不全临床分为少尿型和非少尿型两种，前者多见。少尿型一般出现少尿甚至无尿，等渗尿，尿钠浓度高，尿常规可发现血尿，镜检有多种细胞并有管型颗粒管型和细胞管型等 。血液尿素氮 BUN 和血浆肌酐进行性升高，肌酐从尿中排出障碍，尿肌酐 / 血肌酐 40有明显的区别。急性肾功能不全评价的病理生理学指标有内生肌酐清
3、除率、尿肌酐/ 血肌酐比值、肾脏酚红排泄率、钠排泄分数等，本实验主要测定酚红排泄率、内生肌酐清除率、尿肌酐 / 血肌酐比值及肾形态学的改变。【关键词 】 急性肾功能不全酚红排泄率血清肌酐尿肌酐【材料和方法 】1、材料：家兔；分光光度计，离心机，恒温水浴箱；氯化汞，氨基甲酸乙酯，酚红， NaOH ，醋酸，碱性苦味酸，肌酐标准应用液，生理盐水，葡萄糖。2、方法2.1 本组作为对照组兔则皮下或肌肉注射等量的生理盐水。麻醉固定将氨基甲酸乙酯以5ml/kg 的体重剂量由兔耳缘静脉内缓慢注入。待精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 5 页
4、麻醉后，将家兔仰卧固定于兔手术台上，先后固定四肢及兔头。膀胱插管用止血钳提起膀胱至腹外， 用两把止血钳相距对称地夹住膀胱顶，用手术在膀胱顶剪一个纵行小口，将膀胱插管插入， 用一棉线将膀胱壁道。 完成上述操作后，将膀胱插管平放在耻骨处，引流管自然垂下，管口低于膀胱水平。采血 用干净且干燥的小注射器在家兔心尖部位刺入抽血，大约抽取3ml 血液。将抽取的血液置于干净且干燥的小试管中备用。采集尿液酚红排泄率的测定1从耳缘静脉快速注入6g/L 酚红 0.5ml 并计时；从耳缘静脉缓慢注入30mL葡萄糖溶液。2采集 15min 后的尿液，尿液移入250ml 的量筒内，加入100/L NaOH5ml ，使之
5、显色。加蒸馏水至250ml，搅拌均匀。3用比色法定性测定酚红排泄率。肌酐测定（1）血清肌酐测定将采集到的血液静置10min 后，3000r/min 离心 15min，小心吸取血清置于另一干净试管中，侧血肌酐用。 取硬质试管 3 支编号，分别为空白管、标准管及测定管。加样，混匀，37水浴30mn ，用于分光光度计以波长510nm ，空白管调零，读 OD值。然后，各管加50% 乙酸溶液两滴，放置6min 后，再测定 OD1值。按下式计算血清肌酐Crp ： Crpmg% =OD 测OD1 测/OD 标 OD1 标*0.01*0.2*100 （2）尿肌酐测定加样，混匀，放10min 后加蒸馏水 6.0
6、ml ，摇匀，用分光光度计以波长 530nm ，空白管调零，读OD值。按下式计算尿肌酐 Cru ：精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页，共 5 页 Crumg% =OD 测【实验结果 】计算：1、肾衰组：血清肌酐41.7 ；尿肌酐 12.25；尿肌酐 / 血清肌酐为 0.29, 。通过定性比色法，酚红排泄率为5% 以下。肾脏体积变大，颜色较暗，外表出现颗粒，体重比正常组重得多。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 5 页2、对照组：血清肌酐7.97 ；尿肌酐 2.
7、25； 尿肌酐 / 血清肌酐为 0.28。通过定性比色法，酚红排泄率为50% 。肾脏外形饱满，质地柔软，肾切面包膜光滑，整体色泽明亮。正常组肾衰组【讨论】1. 模型组的尿肌酐降低， 血肌酐高， 主要是因为氯化汞为重金属，它能破坏肾小管的上皮细胞， 导致肾血管强烈收缩， 肾血管收缩后会使肾血流量下降，肾血流量的减少又会使肾小球滤过率下降，从而引起了少尿无尿； 另外未清除的肌酐在体内潴留增多从而使血肌酐升高。2模型组的酚红排泄率明显低于对照组，其主要原因是氯化汞这种重金属盐可以损伤肾小管上皮细胞， 从而使肾小管的重吸收障碍和分泌功能障碍，酚红作为大分子物质不能被肾小球滤过， 但是由于肾小管上皮细胞
8、的损伤，最终导致酚红从肾小管分泌出来的量减少，酚红的排泄率低。3模型组的肾脏颜色较正常组淡，外表有颗粒。其主要原因是氯化汞毒物引起肾血管的收缩，肾血流量下降，从而引起组织细胞缺氧，ATP合成减少，影响了钠泵功能， 进而导致钠排除障碍； 细胞内钠离子浓度升高， 细胞内渗透压相对细胞外液高， 从而使水进入细胞内； 所以大量的水钠潴留引起了细胞水肿，肾脏水肿后导致肾脏的重量增加，肾脏系数升高。【结论】急性肾功能不全会引肾小管上皮细胞受损，从而导致起肾小管的重吸收功能障碍和分泌功能障碍。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 5 页【参考文献 】1. 机能学实验教程陆源，林国华，杨午鸣主编第二版2. 朱大年，主编。生理学。第七版。北京：人民卫生出版社，2009。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 5 页