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1、谷氨酸发酵实验报告前言:谷氨酸发酵试验是一个基础性的实验,但涉及的内容比较广泛,对学生意义很大。该实验是第一次做,我们做是有了钱一组的少许经验,担仍有很多不足。该实验报告将对其中的错误进行分析,同时分析实验结果,对实验提出意见和建议。关键字:谷氨酸1、实验内容该实验是系列实验,包括以下七个小实验:实验一谷氨酸菌种的制备及扩大培养实验二发酵罐结构以及空消实验三发酵培养基制备及实消实验四谷氨酸发酵过程控制实验五谷氨酸发酵过程中复原糖的测定实验六发酵过程中谷氨酸含量的测定实验七谷氨酸的等电回收及结晶实验具体内容在课件中很详细,再次不详加说明。2、试验中的误差及错误微生物实验需要很好的设备,否则很难将
2、实验做好, 仪器将直接决定实验是否成功。能否有产物生成,是否被污染等。仪器的气密性所用仪器的气密性还可以,保证在空消和实消时能够消毒彻底,精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 6 页保证实验过程中的调控。2.1.2 PH 计所用的仪器 PH计不准不能实时测定和调节PH值。 只能在取液时做测定,不能做到及时调节。对结果及军中的生长有影响。2.1.3 搅拌机由于在实验中误将玻璃棒掉进了发酵罐中,使得不能用搅拌进行混匀,只能用气体混匀,所以过程中有很多气泡。2.2 操作引起的误差2.2.1 配比时加水过多,在一定量的情况下由于实消时
3、产生的水过多是体积过大,浓度过低。对效果产生影响。对于发酵试验, 一定要保证实验过程中的状态, PH 、温度、压力、气泡的量等在一定的范围内。3、实验数据及处理复原糖复原糖的标准曲线制作:glc 的含量 mg 0 OD值0 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 6 页GLc 的标准曲线y = 1.4375x - 0.0303R2 = 0.9916-0.100.10.20.30.40.50.600.10.20.30.40.5的含量OD值OD 值线性 (OD值)发酵液中复原糖的含量的测定:时间吸收值1 吸收值 2 吸收值 3 平均
4、值 Y 糖含量 mg 样品中糖的含量mg/ml 5-29-20:45 稀释 400 倍23:45 5-30-02:45 5:45 有问题6:45 7:45 8:45 有问题9:45 有问题10:45 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 6 页11:45 有问题12:45 稀释 333 倍13:45 14:45 15:45 16:45 图表标题y = -0.0262x + 1.382R2 = 0.752500.20.40.60.811.21.41.61.80510152025时间/h葡萄糖含量含量/ (g/ml)线性 ( 含量
5、/(g/ml)谷氨酸GLu标准曲线Glu 的含量 mg OD值 1 OD值 2 #DIV/0! 0 0 0 0 0 0 20 60 60 40 120 120 60 180 180 80 240 240 100 300 300 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 6 页Glu的标准曲线y = 0.0036x - 0.0971R2 = 0.9514-0.200.20.40.60.810100200300Glu的含量OD值系列1线性 ( 系列1)实验过程中 Glu 含量的测定值如下忽高忽低 :Glu-t0200400600051
6、015t/hGlu系列14、实验结果分析5.1 对于葡萄糖标注曲线很准确,实时测定虽然有一定的波动,但是总体的趋势是正确的。5.2 对于谷氨酸的标准曲线,我深有体会,做了十几遍,但是仍有不足,还需要继续改正。整组数据已接近正确,可以使用。对时间6:45:00 7:45 8:45 9:45 10:45 11:45 12:45 13:45 14:45 对应 PH 6 7 7 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 6 页于实时定量的谷氨酸测量,波动很大,基本上没有规律。 原因很多:测量不准确, 最主要的原因是没有得到充分的搅拌发酵罐
7、中有一根玻璃棒,无发使用搅拌 ,取样的随机性很大,测量结果的波动时一定的。6、心得谈谈实验的了解我最了解的莫过于谷氨酸标准曲线的制作。因为我做了几十遍。但是最后一组的实验结果仅仅是勉强可以,仍有很多的不足。结合我的经验谈谈对它的看法。取液是要用取样枪,因为移液管的误差比较大。在所都的液体都加入后在摇动,将试管放到试管架上一起摇动,一起加热,一起冷却。热浴时要调控好时间, 因为时间对反应的程度影响很大。一般热浴 20mins,冷却 10mins。还有原定的体积太小了,在测定吸光值时无法得到充分的润洗。所以体积应该增大。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 6 页