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1、根系活力的测定TTC法,制作人:刘新 单 位:生命科学学院 植物生理学教研室,一、实验目的,H2O 无机盐,合成氨基酸和植物激素(ABA、CTK、GA等),根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量,测定根系活力,为植物营养研究提供依据。,理解植物根系活力的内涵 掌握根系活力测定的原理与方法,二、实验原理,氯化三苯基四氮唑(TTC)是标准氧化电位为80mV的氧化还原物质,溶于水中成为无色溶液,但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙 (TTF)。,生成的TTF比较稳定,不会被空气中的氧自动氧化,TTC,TTF,根系活力,脱氢酶,丙二酸 碘乙酸,琥珀酸 延胡索酸 苹果酸,(无色,
2、溶于水),(红色,不溶于水),三、实验材料,水培或砂培小麦、玉米等植物根系。,四、实验步骤制作TTC标准曲线,吸取0.25mL TTC加入10mL容量瓶,Na2S2O4,加少许Na2S2O4,乙酸乙酯,乙酸乙酯定容,0.25mL,0.50mL,1.00mL,1.50mL,2.00mL,乙酸乙酯作参比,测定485nm下光密度值,绘制标准曲线,四、实验步骤测定根系活力,0.5g根尖样品 0.4TTC和磷酸缓冲液的等量混合液10ml 根充分浸没于溶液中 37下暗保温13h 加入1mol/L硫酸2ml,取出根吸干水分,与34ml乙酸乙酯和少量石英砂在研钵内磨碎,红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到10ml,空白试验作参比测485nm下吸光度,与此同时做一空白实验,先加硫酸,再加根样品,其他操作同上,查标准曲线,求四氮唑还原量,五、实验结果,六、思考题,1.植物的根与地上部分有何关系? 2.反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、苹果酸各起何作用? 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位?为什么? 4.为什么要以杀死根系作为空白对照?,