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1、低温诱导染色体加倍,1、学习低温诱导植物染色体数目加倍的 方法 2、理解低温诱导植物细胞染色体数目加 倍的作用机制,一.实验目的,低温和秋水仙素相似，处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，导致分裂后期染色体不能移向两极，细胞加大而不分裂，着丝点分裂后的染色体仍在一个细胞中，使细胞中的染色体数目加倍。,二.实验原理,选怎样的材料进行该实验？ 对材料要进行怎样的处理？,思考？,实验材料,三.实验材料用具,培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜，载玻片、盖玻片、冰箱，无水酒精，冰醋酸，体积分数为15的盐酸溶液，体积分数为95的酒精溶液，改良苯酚品红染液,注意：盐酸有刺激性和腐蚀性，应小心
2、使用，避免与皮肤和眼睛接触。,实验用具,一）根尖的培养,把洋葱放在盛满水的广口瓶上，让它的底部接触瓶内的水面，室温培养3-5d。,四.实验过程,二）低温诱导,当根长到lcm时，把数个装置连同 材料分成3份： 第一份放入冰箱内0低温下培养 第二份放入冰箱内4低温下培养 最后一份仍留在25下培养 各处理36h,三)取材、固定根尖,剪取以上3种处理的根尖，每个根尖为0.51cm，分别放入卡诺氏固定液中浸泡1520min，然后用体积分数95酒精冲洗2次，贴好标签,卡诺氏固定液作用是什么？ 杀死细胞，固定根尖形态，维持染色体结构的完整性，使细胞分裂固定在某一个时期。,四）制作装片,取固定好的根尖，依次进
3、行： 1.解离：滴加3-4滴解离液进行3-5min的解离 2.漂洗：用清水在载玻片上漂洗5次，约10min 3.染色：滴加3-4滴改良苯酚品红染液进行3-5min 4.制片：加一滴清水在根尖上，盖上盖玻片,注：染色时间要严格控制，不足时染色体看不清，染色过度，染色体一团糟，无法分辨,五）观察装片,先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相，再换上高倍镜并调节细准焦螺旋和反光镜，使物像清晰，仔细观察，辨认哪些细胞发生染色体数目变化,设计实验表格：,五.实验结果,1.体积分数为15%的盐酸溶液在本实验中起什么作用？体积分数为95%的酒精又起什么作用？ 2. 秋水仙素与低温诱导染色体数目加倍，这两种方法在原理上有什么 异同？,讨论：,谢谢,