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1、-细胞生物学习题整合-第 45 页习题一 细胞生物学研究内容及发展简史一、选择题1.研究细胞中染色体的结构、行为及其与遗传效应关系的细胞生物学分支学科称为 C A细胞形态学 B细胞生理学 C细胞遗传学 D细胞动力学 E细胞病理学2. 在1975年有人将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得能分泌单克隆抗体的杂交瘤，这种单克隆抗体制备技术的发明者是 A 柯勒(Kohler) B奥林斯(Olins) C罗伯逊(Roberson) D桑格(Sanger) E尼伦伯格3.最早发现细胞并对其进行命名的学者是 A A虎克(RHook) B列文虎克(ALeewenhook) C布朗(RBrown) D弗莱明(w
2、F1emming) E达尔文(C.Darvin)4.细胞学说的创始人是 B A. 沃森(watson)和克里克(Crick) B施来登(Schleiden)和施旺(Schwann) C. 虎克(RHook)和列文虎克 (ALeewenhook) D普金耶(Purkinje)和冯莫尔(Von Moh) E博韦里(Boveri)和萨顿(Sutton)5.最早观察到活细胞的学者是 D A布朗 B弗莱明 C虎克(RHook) D列文虎克(ALeewenhook) E达尔文6.在1858年提出“细胞来自细胞”这一著名论断并著有细胞病理学一书的学者是 C A雷马克(Remark) B.弗莱明 C魏尔肖(V
3、irchow) D布朗 E.施莱登7.最早发现细胞核的学者是 D A弗莱明 B，虎克 c列文虎克 D布朗 E达尔文8.最早自制显微镜并用于观察细胞的学者是 B A施莱登和施旺 B虎克和列文虎克 c沃森和克里克 D普金耶和冯莫尔 E博韦里和萨顿9.最早发现细胞的遗传物质DNA分子为双螺旋结构的学者是 C A博韦里和萨顿 B普金耶和冯奠尔 c沃森和克里克 D施莱登和施旺 E虎克和列文虎克10.最早提出“遗传的染色体学说”，将染色体的行为同孟德尔的遗传因子联系起来的学者为 D A普金耶和冯莫尔 B施莱登和施旺 C沃森和克里克 D博韦里和萨顿 E虎克和列文虎克11.在1894年，奥尔待曼(A1tman
4、n)首次发现了下列哪种细胞器 C A.中心体 B高尔基体 c线粒体 D内质网 E纺锤体12.细胞遗传学的创始人是 B A孟德尔(MendeI) B摩尔根(Morgan) c魏尔肖 D弗莱明 E博韦里13. 活细胞的基本生命活动有 E A.生长发育和分裂增殖 B衰老与死亡 C遗传变异和 D A+B EA+B+C 14在1902年不谋而合地提出“染色体遗传理论”，将染色体的行为同孟德尔遗传因子联系起来的学者有 _B A摩尔根 B博韦里(Boveri)和萨顿(Sutton) C哈里森 DA+B EB+C15现代的细胞生物学在哪些层次上来研究细胞的生命活动 E A分子水平 B亚细胞水平 C细胞整体水平
5、 D组织水平 EA+B+C16在1944年首次证实DNA分子为细胞的遗传物质的学者是 C A沃森 B克里克 c埃弗里(Avery) D褐尔根(FeMLpn) E摩尔棍17最早发现细胞无丝分裂现象(即在1841年发现鸡胚血细胞的直接分裂)的学者是 B A弗莱明 B雷马克(Remak) C范贝尼登(VanBbneden) D斯特拉斯伯格(Strassburger) E福尔根18. 最早发现细胞有丝分裂现象(即在1880年发现动物细胞的间接分裂)的学者是 B A.福尔根 B弗莱明 C.雷马克 D范贝尼登 E斯特拉斯伯格19最早观察到细胞的减数分裂现象(即在1883年发现动物细胞的减效分裂)的学者是
6、A A范贝尼登 B斯特拉斯伯格 C.雷马克 D弗莱明 E博韦里20在1909年创建组织培养技术，从而为细胞生理学研究提供有利条件的学者是 B A摩尔根 B哈里森(Harrison) C克劳德(Cloude) D卡斯帕森(Casperson) E布拉克特(Brachet)21在1936年首次应用紫外分光光度计测定细胞中DNA含量的学者是 D A沃森 E哈里森 C.克劳德(Cloude) D卡斯柏森(Casperson) E布拉克特(Brachet)22在1940年首次应用甲基绿-派洛宁染色方法来测定细胞中DNA与RNA的含量及分布的学者是 E A克里克 B哈里森 C克劳德(Cloude) D卡斯
7、帕森(Casperson) E布拉克特(Brachet)23. 在1943年应用高速离心机将活细胞中的细胞核及线粒体、叶绿体等细胞器分离出来分别研究其生理活性的是 C A埃弗里 B哈里森 C.克劳德 D卡斯帕森 E布拉克待24. 关于原核细胞的遗传物质，下列哪项叙述有误 A A常为一条线形的DNA分子 D分布在核区 C. 其DNA裸露而无组蛋白结合D其遗传信息的转录和翻译同时进行 E控制细胞的代谢、生长和繁殖25. 关于支原体，下列哪项叙述有误 D A为最小的细胞 B为能独立生活的最小生命单位 C为介于病毒和细菌之间的单细胞生物 D其环形双链DNA常分布在核区 E可引起尿道炎等多种疾病26.
8、关于病毒，下列四项叙述有误 B A为一大类非细胞生命体 B其遗传物质均为DNA C需寄生在细胞中才能生存和繁殖 D分为动物病毒、植物病毒和细菌病毒3类 E主要由蛋白质外壳包围核酸分子构成27. 利用不同性质有机染料可对细胞中不同成分选择性染色，下列哪种结果有误 C A碘液可使口腔上皮细胞的细胞质和细胞核呈深浅不同的棕黄色B吉姆萨染液可使细胞核或染色体呈紫红色或桔红色 C甲基绿可使RNA分子呈蓝绿色 D派洛宁可使RNA分子呈红色 E苏木精可使细胞内核酸呈蓝色28. 下列哪种细胞器为非膜相结构 A A核搪体 B内质网 C线粒体 D.溶酶体 E.高尔基体29. 下列哪种细胞器为膜相结构 E A中心体
9、 B纺锤体 C染色体 D.核糖体 E.线粒体30. 关于真核细胞的遗传物质，下列哪项叙述有误 B A为多条DNA分子 B均分布在细胞核中 C. 其DNA分子常与组蛋白结合形成染色质D在细胞生命活动的不同阶段有不同的形态 E. 载有种类繁多的基因31. 福尔根反应(Feulgen reaction)是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内 E A. 蛋白的分布与定位 B脂肪的分布与定位 C酸性磷酸酶的分布与定位 DRNA的分布与定位 EDNA的分布与定位32. 在人体及动物体内呈游离状态的细胞一般呈 E A梭形 B扁平状 C.柱状 D星芒状 E球形33. 下列哪一类细胞一般呈梭形 B A神经细
10、胞 B.肌肉细胞 C.血细胞 D上皮细胞34. 目前所知的最小细胞是 D A球菌 B杆菌 C.衣原体 D支原体 E：立克次体35. 关于原核细胞的特征，下列哪项叙述有误 B A. 无真正的细胞核 B其DNA分子常与组蛋白结合 C.以无丝分裂方式增殖D内膜系统简单 E体积较小(110m)36. 下列哪项不是原核细胞 D A. 大肠杆菌 B. 肺炎环菌 C. 支原体 D. 真菌 E. 蓝藻37. 关于真核细胞，下列哪项叙述有误 C A有真正的细胞核 B有多条DNA分子并与组蛋白构成染色质C. 基因表达的转录和翻译过程同时进行 D体积放大(10一100m) E膜性细胞器发达二、填空题1细胞生物学是从
11、 细胞 、 亚细胞 和 分子 等3个水平上研究细胞生命活动的科学。2细胞是人体和其他生物体 结构 与 功能 的基本单位。3细胞最初由 虎克 在 1665 年首先发现的。4细胞分裂增殖的方式包括 无丝 分裂、 有丝 分裂和 减数 分裂等5细胞遗传学是由 细胞学 和 遗传学 相结合以后逐渐形成的细胞生物学分支。6. 在1902年提出的“染色体遗传理论”将 染色体 的行为与孟德尔的 遗传因子 联系了起来。7. 1944年埃沃端(Avery)以微生物的 转化 实验证实了 DNA 是遗传物质。81910年摩尔根(Morgan)证明 基因 位于 染色体 上，提出了 基因学说 。91953年 沃森 和 克里
12、克 共同提出了DNA分子的 双螺旋 结构模型。10.细胞生物学的发展大致可分为 细胞的发现 、 细胞学说的建立 、 细胞学的经典时期 和 实验细胞学与细胞学的分支及其发展 等几个阶段。11. 1838年， 施莱登 和 施旺 提出了，认为细胞是一切动植物的基本单位。12. 虎克在他1665年发表的 显微图谱 一书中首次描述了细胞。13. 80年代以来，细胞生物学着重 分子 水平上探索细胞的生命活动规律，故又称为 分子细胞生物学 。14. 细胞中含量最多的4种化学元素是 C 、 H 、 O 和 N 。15细胞中的生物大分子一般包括 蛋白质 、 核酸 和 糖 等。16水是细胞中最主要的成分，它以 游
13、离态 和 结合态 两种形式存在，而无机盐在细胞中是以 离子 状态存在，故又被称为 电解质 17. DNA分子的主要功能是遗传信息的 贮存 、 复制 和 转录 。18. 真核细胞染色质或染色体的主要化学成分有 DNA 和 蛋白质 。19. 真核细胞增殖的方式为 有丝分裂 和 减数分裂 ，而原核细胞主要以 无丝分裂 方式分裂增殖。20. 核糖体可分为 游离核糖体 和 结合核糖体 两类。21. 内质网可根据是否附着核糖体分为 粗面内质网 和 光面内质网 两类。22. 基因的表达分遗传信息的 转录 和 翻译 两个阶段。三、 名词解释1细胞生物学 ：(cell biology)利用现代技术和手段从整体水
14、平、超微结构水平和分子水平等不同层次上研究细胞生命活动及其基本规律的科学。其主要任务是搞活细胞内各部分的超微结构及分子组成、各种结构的基本功能、结构与功能的关系在此基础上，阐明细胞的增殖与分化、生长与代谢、遗传与变异、衰老与死亡等基本生命现象的本质和规律。2分子细胞生物学：(moIecular cell biology)主要从分子水平上来研究细胞的结构与功能以及各种生命活动规律的学科。它代表了现代细胞生物学发展的主流和水平，是细胞生物学发展的最新阶段，故当今的细胞生物学也常被称为分子细胞生物学。3细胞生理学 ：(cytoPhysiology)研究细胞中物质代谢与能量代谢、物质的摄取与分泌、信导
15、传导、生长发育等生命活动基本过程及规律的细胞生物学分支学科，是较早形成的学科之一4细胞遗传学：(cytogenetics)主要以分裂期细胞遗传物质的存在形式染色体为对象，研究其形态、结构、行为及其与细胞遗传变异的关系的学科，是细胞生物学的一个重要的分支。从历史上看，该学科是细胞学与遗传学相结合而形成的。5细胞学说：(cell theory)18381839年由德国植物学家施莱登(MJSchleiden)和动物学家施旺(MJ. Schwann)共同提出的关于一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞来自细胞，细胞是一切动植物的基本单位的著名理论。细胞学说确立的依据是1838年施莱登发表的植物发生论和1
16、839年施旺发表的关于动植物的结构和生长的一致性等两篇论文，他们提出的论点分别是“细胞是构成植物的基本单位”、“动植物都是细胞的集合体”。四、问答题1.细胞生物学的研究内容有哪些? 现代细胞生物学的研究内容十分广泛，主要包括细胞膜与胞内膜的结构与功能、各种细胞器的超微结构与功能、细胞核的结构与功能、染色体的结构与基因表达细胞骨架体系、细胞增殖及调控、细胞分化及调控、细胞的衰老与凋亡、细胞通讯与细胞社会学、细胞的起源与进化以及细胞工程等方面。2.细胞生物学的形成与发展经历了哪几个阶段?细胞的发现；细胞学说的建立；经典细胞学阶段(细胞学的经典时期)；实验细胞学时期；细胞生物学阶段；细胞分子生物学阶
17、段。3.试比较真核细胞与原核细胞的差异。作为较原始类型的原核细胞与进化状态真核细胞相比，在结构上、功能上的差异十分明显，表现在以下多个方面：原核细胞无真正的细胞核，遗传物质无核膜包被，而是散在分布或相对集中分布于细胞的一定区域，形成所谓的核区或拟核；而真核细胞具有完整的细胞核，遗传物质有核膜包被，还具有明显的核仁等构造。原核细胞的遗传物质DNA分子一般仅一条，而且不与蛋白质结合，呈裸露状态；而真核细胞的DNA分子常有多条，且要与蛋白质结合成染色质或染色体等构造。原核细胞无内膜系统，缺乏线粒体、高尔基体、内质网和溶酶体等膜性细胞器，而真核细胞具有由内质问、高尔基体、溶酶体及核膜等构成的发达的内膜
18、系统。原核细胞中不存在细胞骨架系统，无微管、微丝、中间纤维等非膜性细胞器；而真核细胞具有由微管、微丝和中等纤维等构成的细胞骨架系统。原核细胞基因表达的两个基本过程即转录和翻译向时进行，而真核细胞中遗传信息的转录和翻译过程具有明显的阶段性和区域性其转录在细胞核中进行，所合成的mRNA要离开细胞核在细胞质中进行蛋白质合成(翻译)。原该细胞的增殖无明显周期性，以无丝分裂的方式进行；而真核细胞的增殖以有丝分裂方式进行，周期性很强。原核细胞体积较小，而真核细胞体积较大。原核细胞之中有不少的病原微生物，而真核细胞则是构成人体和动植物体的基本单位。4.细胞学说的主要内容有哪些？细胞是有机体，一切动植物都是由
19、细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成。每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命，又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益。新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。习题二 细胞生物学研究方法一、选择题1. 扫描隧道显微镜(scanning tunnelng microscope，STM)是IBM苏黎世实验室在1981年发明的一种能有效探测微观结构表面形貌的仪器。这一成果获1986年诺贝尔物理学奖。这一发明的科学家是 EA比宁(Binning) B罗勒(Rohrer) C格伯(Gerber) D怀布尔(Weible) EA+B+C+D2. 在光学显微镜下所观察到的组织或细胞结构一般称为
20、AA显微结构 B超微结构 C亚显微结构 D分子结构3. 研究细胞的超微结构一般要利用下列哪种技术 BA光学显微镜技术 B电子显微镜技术 C. x射线衍射技术 E.电泳技术4. 适于观察细胞复杂网络如内质网膜系统、细胞骨架系统的三维结构的显微镜是 EA普通光境 B荧光显微镜 C相差显微镜 D暗视野显微镜 E共焦激光扫描显微镜5. 光学显微镜的分辨率(最小分辨距离)可达 BA0.lm B0.2m C0.3m D0.4m E6. 关于扫描隧道显微镜(STM)，下列哪项叙述错误 CA. STM是IBM苏黎世实验室的Binning等人在1981年发明的 C 仅可在真空条件下工作B为扫描探针显微镜的一种具
21、有高分辨本领 E可直接观察到DNA、RNA和蛋白等生物大分子D依杯一极细的金属针尖在标本表面扫描来探测标本的形貌7. 在普通光镜下可以观察到的细胞结构是B A核孔 B核仁 C.溶酶体 D核糖体 E微丝二、填空题1. 细胞生物学研究中常用的光镜有 普通显微镜 、 暗视野显微镜 、 相差显微镜 、 荧光显微镜 和 倒置显微镜 等。2电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为 透射电镜 和 扫描电镜 两类。3. 细胞培养一般分为 原代培养 和 传代培养 两种情况4细胞组分的分级分离方法有 超速离心法 、 层析法 和 电泳法 等5利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有 差速离心法 和 密度梯度离
22、心法 。6.常用于促进细胞融合的物质是 灭火仙台病毒 和 聚乙二醇 。7普通离心机、高速离心机、超速离心机的转速一般分别为 8000rmin 、 800025000rmin和 2500085000rmin 。8由小鼠骨髓瘤细胞与某一B细胞融合后形成的 杂交瘤 细胞克隆所产生的抗体称 单克隆抗体 。9. 人及动物细胞培养所用合成培养基中除含多种 氨基酸 、 维生素 和 无机盐 外，一般还需加入 小牛血清 。10. 光学显微镜的分辨率(R)可达到 m ，其计算公式为。11. 细胞生物学研究中常用的真核细胞系有 HeLa细胞系 、 BHK21细胞系 和 CHO细胞系 等。12. 两个不同类细胞融合时
23、先形成具有双核的 异核体 ，经有丝分裂后才形成 杂种细胞 。13. 单个细胞经有丝分裂形成的 细胞群 称为一个 克隆 。14透射电镜观察的组织细胞标本在超薄切片之前常用 戊二醛 和 四氧化锇 双重固定。15扫描电镜观察的组织细胞标本制备程序一般是 固定 、 脱水 、 干燥 和 镀膜 。16. 适合于观察活细胞的光镜有 相差显微镜 、 暗视野显微镜 和 倒置显微镜 等三、 名词解释1细胞系(cell line)：可在体外培养条件下连续传代(无限制地传代)的细胞群。其细胞的特点是染色体数目明显改变，一般呈亚二倍体或非整倍体；失去一般体细胞具有的接触抑制的特性而具有癌细胞的特点，容易传代培养。例如细
24、胞生物学研究中常用的HeLa细胞系(由人宫颈癌细胞培养而成)、CHO细胞系(由中国仓鼠卵巢细胞培养而成)、BHK21细胞系(仓鼠幼鼠肾成纤维细胞)和3T3细胞系(来源于小鼠胚胎细胞).2. 细胞培养(cell culture)：使离体细胞在实验室人工模拟机体内的条件下(如合适的温度、全面的营养物质等)生长发育、分裂增殖的一项重要的细胞生物学研究技术。通过细胞培养可获得大量细胞作为研究所需的材料，如细胞增殖周期及调控、细胞癌变机理与衰老、基因表达与控制细胞杂交等多个方面的研究都离不开细胞培养。可分为原代培养相传代培养两个阶段或两种类型。3. 原代培养(primary culture)：指从机体组
25、织中取材后接种到培养基中所进行的细胞培养，即直接取材于机体组织的细胞培养。所形成的细胞称原代细胞，它是在体外培养任何一种体细胞所必须经历的阶段相传代培养的基础。也就是说，任何动物和人体细胞的培养均需从原代细胞培养做起。一般来说，胎儿的肾、肺、卵巢、精巢、肌肉与肿瘤等组织的细胞较易培养，而神经细胞较难培养。4. 传代培养(sub-cuture)：简称传代，指当原代培养的细胞在培养瓶中生长、增殖到一定密度后，一分为二或以其他比例分装或转移到2个以上的培养瓶中所进行的再培养。在培养过程中，要使细胞能够在容积中正常地生长和繁殖需要经常进行培养细胞的传代，所以传代培养可多次进行。适应在体外培养条件下持续
26、传代培养的细胞称为传代细胞。传代累积的次数就是细胞的代数。一般来讲，原代培养的细胞传至10代就不易传下去了，其生长出现停滞且大多数细胞衰老死亡，只有权少数细胞能存活下来并继续传代40一50次。在此过程中，细胞保持染色体数目稳定和接触抑制行为。当细胞传至50代以后又会出现“危机”不能传下去了，但其中少数发生突变，获得了癌变细胞特性,细胞有可能无限制地传下去，如HeLa细胞株。5. 原位杂交(in situ hybridization)：利用放射性同位素或非放射性物质(如地高辛或生物素)标记的核酸探针与玻片上的细胞核中或染色体上的某种核昔酸顺序或基因进行杂交以确定该基因位点的一种重要技术。其基本程
27、序是，先制备组织切片或染色体玻片标本和所需的核酸探针，再将玻片加热使细胞核或染色体中的DNA变性成单链状态，滴加含有探针的缓冲液至玻片上在适当的条件下进行杂交，最后用放射自显影或免疫显色、酶促显色反应显示目标基因或核吱顺序所在位点。6. 超薄切片技术：利用专门的切片机将细胞样品切割成透射电镜观察所需的30-70nm厚的薄片称为超薄切片（一个细胞可被切成100200片）。7. 负染技术：用重金属盐（如磷钨酸钠、醋酸铀等）对铺展在载网上的样品进行染色，使整个载网都铺上一层重金属盐，而有凸出颗粒的地方则没有染料沉积。这样在图像中背景是黑色的，而未被包埋的样品颗粒则透明光亮。这种染色即为负染色技术，也
28、即只染背景而不染样品，与光学显微镜样品的染色正好相反。 8. 冷冻断裂和冷冻蚀刻技术：（1）快速冷冻 （2）低温真空断裂 （3）蚀刻：断裂显示出镶嵌在膜脂中的蛋白质颗粒，由于冰在真空中的升华可进一步增强“浮雕”的蚀刻效果 （4）复型：用铂、金等金属和碳分别进行倾斜和垂直喷镀，消化样品 （5）电镜观察：收集复型膜于载网上进行电镜观察。9. 光学显微镜(light microscope)：简称光镜是一种利用光线照明，将微小物体形成放大影像的精密光学仪器，由光学放大系统相机械系统两部分组成。光学放大系统由物镜、目镜和镜筒组成，其核心是物镜和目镜中的两组透镜。其放大成像的机理是先由物镜形成效大的实像。
29、再由目镜进一步放大成虚像，最后在人眼中形成实像。光学显微镜是细胞生物学研究中的一种十分重要的工具，从虎克研制的第一台简陋的光镜起到现在已经经历了300多年的发展历史，其性能不断完善。现代的光学显微镜已成为包含普通显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、倒置显微镜及万能显微镜等多个系列的庞大家族。10. 荧光显微镜(fluorescence microscope)：利用一定波长的紫外线作为激发光源照射被检标本，使标本中的荧光物质受激发后产生的荧光经放大成像系统成像，这种特殊的光镜就称为荧光显微镜。在其光学系统中照明光线要经过两组滤光片：第一组滤光片位于光源相标本之间，只透过能激发特殊荧光染料发出荧光的
30、光线；第二组滤光片位予标本和目镜之间，仅能透过激发出来的荧光。荧光显微镜可用于观察检测细胞中能与荧光染料特异结合的特殊蛋白、核酸或低含量的分子其标本染色简便、荧光图像色彩鲜亮，而且敏感度较高。11. 相差显微镜(Phase contrast microscope)：利用相差装置将透过细胞标本不同区域(其密度不同)的光波的光程差变成振幅差，从而使细胞内的各种结构之间呈现出清晰可见的明暗对比的特殊光镜。在结构上，这种光镜比普通光镜多出2个部件(即相差装置)其一是能使透过聚光器的光线形成空心光锥并聚焦到标本上的附加环形光阑，其二是位于物镜后焦面的相板(一种喷涂有相位膜和吸收膜的玻璃板)。相差显微镜对
31、于活细胞结构与功能的研究具有重要价值。12. 倒置显微镜(inverted microscope)：一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的活细胞生长及分裂状态的特殊显微镜。与普通光镜相比，其光源、聚光镜和物镜的位置是倒置的，即光源在上，物镜在载物台的下方。另外，其聚光镜和物镜有较长的工作距离，以方便放置有一定厚度的培养瓶。研究用倒置显微镜还配有恒温装置、显微照相、电视摄像或电影投影装置，以便记录培养细胞生长、分裂及其他活动的动态过程。暗视野显微镜(dark field microscope)：一种利用特殊的聚光器使照明光线斜射而不直接进入物镜，形成暗视野，那些经过标本散射的光线才能进入物镜放大，在
32、黑暗的背景中呈现标本明亮的轮廓。实际上在暗视野中看到的是标本的衍射光图像而并非物体本身，故不易分辨标本内部的微细结构。这种光镜适于观察活细胞或微粒的存在及运动状态，但不适合观察染色的标本13. 电子显微镜(electron microscope)：简称电镜，是利用波长很短的电子束作为照明源，通过电子流对细胞样品的透设或反射及电磁透镜的多级放大而在荧光屏上成像的大型精密仪器。作为细胞超微结构观察研究的最重要工具，电镜在细胞生物学领域获得了广泛应用。电镜的放大倍数最大可达100万倍，其分辨率比光镜高100一1000倍，达2一。现代电镜的类型较多，分透射电镜、扫描电镜、超高压电镜、分析电镜和扫描隧道
33、电镜等。14. 透射电子显微镜(transmission electron microscope，TEM)：简称透射电镜。是利用电子枪发出的高速电子束照射超薄的生物样品，收集透射电子流经电磁透镜的多级放大后成像的仪器。由于样品各部分对入射电子有不同的散射度，故可在荧光屏上形成不同电子密度(即浓淡差)的放大图像。这类电镜的放大倍数和分辨率可达较高水平。15. 扫描电子显微镜(scanning electron microscope，SEM)：简称扫描电镜。是种主要用于观察组织细胞表面或细胞内断面的电镜，其基本工作原理是从电子枪发出的电子束经电磁聚光镜汇聚成极细的电子探针，并在细胞样品表面逐点扫描
34、，收集样品表面产生的二次电子再经转换、放大，最终在荧光屏同步扣描成像。扫描电镜具有景深大、图像立体感强、样品制各简单、无需超薄切片以及电子束对样品的损伤小等优点但这种电镜的分辨率(约3nm)和放大倍数（几十万倍）不及透射电镜。16. 分辨率resolution：也称分辨本领。指显微镜或人眼在25cm的明视距离处分辨或区分被检物体细微结构的最小间隔，即两点间最小距离的能力。能够区分的两点间的距离越小，表示分辨率越高。显微镜的分辨率由物镜所决定，与其镜口率和光线的波长直接相关。人眼的分辨率约为100m，而光镜的分辨率最高可达，电镜的分辨率比光镜高100一1000倍，达202nm。17. 显微结构(
35、microscopic structure)：通过光学显微镜所观察到的样品的各种结构。如细胞的大小、外部形态以及细胞核、线粒体、高尔基体、中心体等内部构成都局于显微结构。18. 超微结构(ultrastructure)：也称为亚显微结构(submicroscopic structure)。指在电子显微镜下所观察到的细胞结构如细跑核、线粒体、高尔基体、中心体、核糖体、微管、微丝等细胞器的微细结构等。19. 共焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope，CLSM)：以单色激光作光源的一种特殊光学显微镜。其特点是：物镜和聚光镜互相共焦点(即两者同时聚焦到一
36、个点)，使得只有从标本焦面发出的光线聚焦成像，而焦面以外的漫射光不参加成份；以单色激光作为点光源并聚焦到标本焦平面上进行光点扫描，最后在荧光屏上清晰成依；改变焦平面，可获得细胞或原标本不同层次的图像，从而得到样品的三维图像。这种显微镜适于观察细胞内质网膜系统和细胞骨架系统等细胞内的复杂网络。20. 流式细胞分选计(flow cell sorter)：也称为流式细胞计(flow cytometer)。是种综合了激光、电脑、光学、流体力学和荧光细胞学等方面技术的高科技产品主要由光学系统、电子控制系统和数据处理系统等部分组成。作为一种精密的细胞测量与分离仪器，它可同时测量细胞的多个相关参数如细胞体积
37、、DNA的含量等，其测量速度可高达每秒钟5000个细胞，所分选出细胞的纯度可达99。流式细胞计已成为细胞生物学研究的重要工具。21. 克隆(clone)：在细胞生物学中，克隆指由单个细胞经有丝分裂形成的细胞群。通过细胞克隆的方法可制备出生物学性状均一的细胞系。四、问答题1.细胞生物学研究的方法有哪些？细胞生物学研究的方法很多,最常用的有显微技术,细胞培养技术和细胞工程技术等。2.电子显微镜与光学显微镜的主要区别是什么?电子显微镜是以电子束为照明源，通过电子流对样品的透射或反射及电磁透镜的多级放大后在荧光屏上成像的大型仪器，而光学显微镜则是利用可见光照明，将微小物体形成效大影像的光学仪器。概括起
38、来，电镜与光镜主要有以下几个方面的区别，照明源不同。电镜所用的照明源是电子枪发出的电子流，而光镜的照明源是可见光(日光或灯光)，由于电子流的波长远短于光波波长，故电镜的放大及分辨率显著地高于光镜。透镜不同。电镜中起放大作用的物镜是电磁透镜(能在中央部位产生磁场的环形电磁线圈)，而光镜的物镑则是玻璃磨制而成的光学透镜。电镜中的电磁透镜共有三组，分别与光镜中聚光镜、物境和目镜的功能相当。成像原理不同。在电镜中，作用于被检样品的电子束经电磁透镜放大后打到荧光屏上成像或作用于感光胶片成像。其电子浓淡的差别产生的机理是，电子束作用于被检样品时，入射电子与物质的原子发生碰撞产生散射，由于样品不同部位对电子
39、有不同散射度，故样品电子像以浓淡呈现。而光镜中样品的物像以亮度差呈现，它是由被检样品的不同结构吸收光线多少的不同所造成的。所用标本制备方式不同，电镜观察所用组织细胞标本的制备程序较复杂，技术难度和费用都较高，在取材、固定、脱水和包埋等环节上需要特殊的试剂和操作，最后还需将包埋好的组织块放入超薄切片机切成50一100nm厚的超薄标本片。而光镜观察的标本则一般置于载玻璃片上，如普通组织切片标本、细胞涂片标本、组织压片标本和细胞滴片标本等。3研究细胞的常用技术有哪些?观察细胞显微结构的光学显微镜技术；探索细胞超微结构的电子显微镜技术；研究蛋白质和核酸等生物大分子结构的x线伤射技术；用于分离细胞内不同
40、形态大小细胞器的离心技术；用于培养具有新性状细胞的细胞融合或杂交技术；使机体细胞能在体外长期生长繁殖的细胞培养技术；能对不同类型细胞进行分类并测其体积、DNA含量等数据的流式细胞光度术；利用放射性同位素对细胞中的DNA、RNA或蛋白质进行定位的放射自显影技术；用于探测基因组中某种基因是否存在、是否表达以及拷贝数多少的核酸分子杂交技术；能将细胞中的特定蛋白质或核酸分子进行分离纯化的层析技术和电泳技术等。4.试述细胞分离所用方法的基本原理?从多种细胞的悬液(如血液)分离不同细胞常用方法有离心分离法、亲和分离法和流式细胞计分离法等。离心法的原理是，不同种类的细胞，其大小、形态、密度、质量等物理性质不
41、同，在离心力的作用下，它们具有不同的沉降速率，从而得以分离。亲和法分离细胞是利用了一些细胞对玻璃或塑料具有较大的粘附力的特点。也可先将某种细胞的抗体结合到塑料或其他载体表面形成亲和表面，再使含待分离细胞的细胞悬液接触亲和表面使待分离细胞与抗体结合而留在亲相表面，最后，利用轻微振荡的办法将被粘附的细胞回收起来。也可用酶(如胶原酶)来消化分解基质(如胶原)，回收已得以分离的细胞。流式细胞术是最精确的细胞分离技术，其原理是，先将结合有荧光染料的抗体标记待分离细胞，再将细胞悬液注入流式细胞计，在该仪器中，细胞悬液被加压后从小孔径的喷嘴喷出后又经超声振荡作用变成含单个细胞的一连串液滴当细胞经过激光束时根
42、据其是否发荧光(即是否被荧光标记)而被充以负电荷或正电荷，最后当液墒通过强电场时，携带不同电荷的液滴分别朝不同方向偏转进入不同的分选收集容器中，这样获得要分离的细胞。5. 说明对细胞不同组分进行分离所用方法的基本原理？ 细胞内不同组分的分级分离的常用方法有超速离心法、层析法、电泳法等。超速离心技术可将细胞匀浆中的不同细胞器或生物大分子进行有效分离。因为不同形态、大小和密度的细胞器以及不同分子量的生物大分子在离心力作用下沉降速度各不相同。超速离心分离法又分差速离心相密度梯度离心两种。差速离心是一种较为简便的分离法，常用于细胞核和细胞器的分离因为在密度均一的介质中，颗粒越大沉降越快，反之则沉降较慢
43、。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开，而且所获得的分离组分往往不很纯。而密度梯度离心则是较为精细的分离于段，这种离心方法的关键是先在离心管中制备出蔗糖或氯化铯等介质的浓度梯度，并将细胞匀浆装在最上层，在此条件下离心，细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。呈密度梯度的介质可以稳定沉淀成分、防比对流混合。层析法是分离蛋白质的常用手段，其基本原理是不同的蛋白质分子其大小和所带电荷不同，当它们通过某种介质(基质)而与其发生相互作用时，会被不同程度地滞留或吸附，这样便使不同类型的蛋白质分子移动的快慢不同从而得以分离。如根据蛋白质的大小、所带电荷或持殊的化学基团选择不同的基质的层析，如
44、凝胶过滤校层析、离子交换树脂柱层析或亲和层等更可有效地分离不同的蛋白质。电泳法是分离蛋白质、核酸的有效方法，在细胞生物学研究领域有着广泛的应用。其基本原理是，不同种类的蛋白质或核酸所携带的净电荷的性质(正与负)或多少不同它们在一定强度的电场中会按所带净电荷、分子的大小和形状以不同速度在电场中移动，从而得以分离成不同的电泳带谱。习题三 细胞膜与细胞表面一、选择题1. 在1959年提出细胞膜结构的“单位膜模型”(unit membrane model)的学者是 AA罗伯逊 B辛格 c奥林斯 D克里克 E尼伦伯格2. 在1972年提出生物膜结构的液态镶嵌模型(fluidmasaic model)的学
45、者是 BA. 罗伯逊 B辛格 c克里克 D奥林斯 E鲁滨逊(肋bin：on)3. 膜脂不具有的分子运动是 CA侧向运动 B弯曲运动 C.跳跃运动 D.翻转运动 E.旋转运动4. 膜蛋白不具有的功能是 EA转运分子进出细胞 B接受环境信号并传递到胞内 C. 支持细胞骨架及细胞间质成分 D. 膜酶可催化细胞的某些化学反应 E使膜发生相变和相分离5. 能防止细脑膜流动性突然降低的脂类是 CA磷脂肌醇 B磷脂酰胞碱 C.胆固醇 D.磷脂酰丝氨酸 E.鞘磷脂6. 构成膜脂双分子层结构的脂类是 AA. 兼性分子 B.疏水性分子 C.极性分子 D.双极性分子 E.非极性分子7. 首先提出“脂双层中镶嵌着球形蛋白质”的生物膜模型是 BA片层结构模型 B.单位膜模型 C.液态镶嵌模型 D.晶格镶嵌模型 E板块镶嵌模型 8. 目前被广泛接受的生物膜分子结构模型是 CA片层结构模型 B单位膜模型 C液态镶嵌模型 D.晶格镶嵌模型 E板块镶嵌模型 9. 人红细胞膜ABO血型抗原的成分是 CA 磷脂 B.脂固醉 C.糖蛋白 D鞘糖脂 E镶嵌蛋白10. 能封闭上皮细胞间隙的连接方式称为 A