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1、-病理技术卫生考试常考固定液与特殊染色总结-第 7 页单纯固定液甲醛：能固定类脂和脂类，但必须冷冻切。也可固定高尔基体、线粒。是糖的保护剂。体除去甲醛色素的方法：Verocay法，乙醇配氨水；Schride法。重铬酸钾：高尔基体和线粒体固定，组织几乎不收缩，染色质保存差。Zenker，Helly，Maximov，Regaud。苦味酸：易燃易爆，强酸，糖类；可以软化皮肤，易于切片。不宜用火棉胶包埋。 70%乙醇中加浓氨水去除固定产生的黄色。 三氯醋酸：SUSa液的主要成分，使蛋白沉淀，良好的脱钙剂。升汞：针状结晶，组织收缩明显。不能固定类脂和糖类。可固定蛋白，固定后需用碘液脱汞乙醇：固定兼有脱水
2、作用，糖原的固定，纤维蛋白和弹性纤维固定。浓度80-95%。醋酸：固定染色体，清楚的显示细胞核，但组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白。铬酸：核蛋白固定良好，可固定高尔基体和线粒体，宜避光保存。不能固定脂肪。固定后流水冲洗大于24h。饿酸：脂肪和内脂，线粒体和内质网的固定，电镜研究的必须固定剂。临用前几天配制。延长固定时间，脆性增加，对染色不力。1%高锰酸钾脱碘，固定后流水冲洗12-24h。丙酮：酶组织化学。丙酮对组织块的收缩作用强于乙醇，对糖原无固定作用。异丙醇：是乙醇良好的替代品，组织收缩小，硬化作用较弱；不能再用于火棉胶的包埋。叔丁醇：脱水后可不经透明，直接浸蜡。电镜标本中常用作中间
3、脱水剂。环氧己烷：不引起组织收缩和硬化，常用于植物标本制作，价格贵。四氢呋喃：既是脱水剂，又可以作为封片溶媒。环己酮：代替乙醇作脱水剂和随后的浸蜡和包埋。混合固定液B-5固定液：固定淋巴组织，配方无水醋酸钠-升汞-甲醛，染色前脱汞处理；Muller液：媒染和硬化神经组织，需常更换液体，固定作用缓慢。Bouin液：结缔组织染色，用于三色染色较理想，对脂肪的固定较好；核着色鲜明，细胞质比较差。不适宜长期固定（12-24h）。固定后组织被染成黄色需用70%-80%乙醇洗涤。Orth：胚胎，神经，脂肪均可。需在暗处固定24h。Carnoy液：胞质和胞核，染色体，糖原保存，尼氏体；不能保存脂类。Hell
4、y固定液：含有氧化剂和还原剂，临时配制，久置失效。PFG：肽类抗原固定，用于免疫电镜研究。PLP和PLPD（含有过碘酸钠）：富含糖类组织的固定。Rossman：固定糖原好；Zenker固定液：形态学研究常用固定液。不适宜固定含血量较多的标本，脾肾；对免疫球蛋白效果最好，对病毒包涵体固定也较好。不能用金属容易盛放，也不能用金属镊子夹取组织块。固定后流水冲洗12H，在70%乙醇脱水时加入碘脱汞。PATH染色用该液固定。嗜铬细胞染色；三色染色。中性缓冲甲醛液：为免疫组化最常用。24h内为宜中性甲醛液：为最常用的固定液。4%多聚甲醛：光镜、电镜免疫组织化学，用于电镜时，戊二醛需新配。乙醇-甲醛：皮下组
5、织中肥大细胞乙醚-乙醇：用于细胞涂片固定甲醛-钙液：脂肪组织和免疫组织化学特殊染色结缔组织的染色：Mallory三色染色 胶原、网状纤维蓝色，软骨、粘液、淀粉样物质淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维、酸性颗粒红色，髓鞘和红细胞呈橘红色。Masson三色染色 胶原纤维呈蓝（甲苯胺蓝）或绿（亮绿）色，肌纤维呈红色，红细胞橘红色。显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法 胶原纤维呈红色，网状纤维黑色，弹性纤维绿色，肌肉和红细胞呈淡黄色。胶原纤维染色：Van Gieson苦味酸酸性品红法 胶原纤维呈鲜红色，肌纤维和细胞胞质、红细胞呈黄色，胞核呈蓝褐色。特点是易褪色和对比度差。天狼星红（Sirius）苦味酸染色法
6、：胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。网状纤维染色：Gordon-sweets银氨液染色法/James染色 网状纤维黑色，胞核红色（核固红复染），胶原纤维黄棕色，胞质淡红色。Gomori银染法：网状纤维黑色，胶原纤维红色，背景黄色。弹性纤维染色 Gomori醛复红染色法 甲醛生理盐水固定，深紫色；维多利亚蓝染色：蓝色，核红色。显示弹性纤维和胶原纤维双重染色法：维多利亚蓝和丽春红S 弹性纤维蓝绿色，胶原纤维红色，背景淡黄色。横纹肌染色：Mallory磷钨酸苏木精染色法【PTAH】 胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、肌纤维均呈蓝色，胶原、网状纤维，软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色，粗弹性纤维有
7、时被染成微紫色，有缺血缺氧早期病变的心肌呈紫蓝色或棕黄色。糖类染色：过碘酸-schiff（PAS）染色法 糖原呈红色，细胞核呈蓝色。粘液物质（黏多糖）：Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法 中性粘液物质红色，酸性粘液物质蓝色，混合性粘液物质紫红色。爱先蓝（PH2.5）法 唾液酸及若硫酸化粘液物质及一般粘液呈蓝色，各种强硫酸化粘液物质不着色，胞核红色。schiff阿尔辛蓝地衣红慢性胃炎肠上皮化生，酸性黏多糖，棕色。爱先蓝（PH1.0）法 含硫酸粘液物质蓝色，非硫酸化酸性粘液物质不着色，复染后核红色。黑色素染色Masson-Fontana黑色素银浸染色法 黑色素及嗜银细胞颗粒呈黑色，胶
8、原纤维红色，背景浅黄色。Lillie亚铁染色法 黑色素暗绿色，背景浅绿或不着色，肌纤维和背景呈黄色。含铁血黄素染色Perls blue普鲁士蓝反应显示三价铁 蓝色，其他组织浅红色。胆色素染色法 避免使用含铬固定液三氯醋酸法 胆色素呈绿色，其他呈复染的红色或者黄色。高碘酸无色复红法 用于显示脂褐素。纤维蛋白染色Lendrum等MSB法 纤维蛋白呈红色，陈旧纤维蛋白呈紫色，核蓝色，红细胞黄色。Gram甲紫染色法 纤维蛋白蓝黑色，背景红色。淀粉样物质染色刚果红染色法 红色，核蓝色，偏光显微镜下呈苹果绿色双折光性。Jurgens甲紫法 淀粉样物质红色或者紫红色，核蓝色。真菌染色Grocott六氨银染色
9、法 菌丝和孢子黑褐色，核红色，背景淡绿色。高碘酸复红染色法 真菌紫红色，RBC浅黄色。同时用于染色脂褐素。细菌染色Gram碱性复红结晶紫染色法 革兰阳性菌紫色，阴性菌红色，核呈红色。Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法 抗酸杆菌呈红色，背景灰蓝色。基本染料是碱性复红。Warthin-starry胃幽门螺杆菌染色 黑色或棕黑色，背景淡黄色。螺旋体染色法Giemsa染色法 8-18h，蓝色到淡紫色，胞质蓝色，红细胞橘黄色。Ryu碳酸钠碱性复红法 红色。病毒包涵体染色Macchiavello包涵体染色法 麻疹和疱疹染色，红色。乙型肝炎表面抗原染色Shikata地衣红染色 HBSAg棕色，地衣红染
10、色液的PH1.2-1.6。醛复红改良染色法 HBsAg 紫色，结缔组织红色，RBC和基质黄色。维多利亚蓝染色法 12-24h 蓝绿色，核红色。神经组织染色神经细胞尼氏小体染色焦油紫染色（石蜡） 尼氏小体紫色，胶质细胞淡紫色，背景无色；硝化纤维切片法，尼氏小体淡紫色；冷冻切片法；Einarson倍酸青蓝染色法 尼氏小体黑蓝-紫色，核蓝色，背景浅灰色。甲苯胺蓝染色法 核淡蓝色，尼氏小体深蓝色，背景无色。神经纤维染色方法Homes神经纤维染色法 神经纤维黑色，背景灰紫色。Bielschowsky 神经纤维黑色，背景紫色。Von Brasunmubl神经纤维、扣结、老年斑染色法 神经纤维、扣结黑色，老
11、年斑染黑色，背景浅灰色。Eager退变神经纤维染色法 退变神经纤维黑色，背景浅棕色。神经髓鞘的染色方法Weigert Pal髓鞘染色法 髓鞘黑蓝色，背景浅灰色。Weil髓鞘染色法（石蜡切片）髓鞘黑蓝色，背景浅灰色。Kuitshitsky 石蜡、冰冻均可使用，硝化纤维均可，髓鞘黑蓝色，背景浅黄色。Luxol fast blue 髓鞘蓝色，核仁紫色，尼氏小体紫色。变色酸2R-亮色 神经髓鞘深红色，轴索和间质绿色，脱髓鞘纤维不着色。Marchi退变髓鞘染色法 退变髓鞘黑色，背景浅棕色。饿酸-萘胺染色法 变性髓鞘黑色，正常髓鞘红色，红细胞淡红色，结缔组织蓝色。神经胶质细胞染色法Cajal星形细胞染色法
12、（冷冻切片法） 原浆型和纤维星形细胞紫黑色。Naoumenko和Feigin 改良的Cajal（石蜡切片法）星形细胞黑紫色，背景粉红色。Weil和Davenport小胶质细胞和少突胶质细胞染色法 黑色，背景黄棕色。Naoumenko和Feigin小胶质细胞石蜡切片法 小胶质细胞黑色，背景灰色。神经内分泌细胞染色亲银反应 无需加入还原剂Lillie-Masson二胺银法 亲银颗粒细胞呈黑色，核红色，背景淡灰黄色。Gomori-Burtner六氨银法 亲银细胞呈黑色，背景浅红色。嗜银反应De grandi改良硝酸银法 嗜银细胞颗粒棕黑色，胞核红色。碱性重氮反应法 显示小肠和类癌嗜银细胞颗粒 嗜银细胞颗粒橘红色至红色，核蓝色，胞质黄色。嗜铬细胞染色 用含铬固定液固定 Giemsa改良染色法 嗜铬细胞红色至紫红色，皮质细胞呈蓝色，红细胞粉红色。Wiesel染色法 嗜铬细胞呈黄绿色，核红色，其他蓝色。肥大细胞染色 甲苯胺蓝改良染色法 肥大细胞颗粒红紫色，核蓝色。异染性细胞。 醛复红法 肥大细胞颗粒深紫色，RBC橘黄色，其他组织不同程度的黄色。DNA染色 Feulgen染色法 酸无解-无色品红法 DNA紫红色，胞质及其他成分绿色。 甲基绿-派洛宁法 胞质和核仁内的核糖核酸呈红紫色，核内的染色质脱氧核糖核酸呈绿色和蓝绿色。脂肪染色 苏丹III 需冰冻切片 中性脂肪橘红色，核蓝色。