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1、-卫生微生物 重点总结-第 27 页卫生微生物学重点总结第一章 绪论卫生微生物学(Sanitary Microbiology)研究微生物与其环境相互作用的规律、对人类健康的影响以及应对方略的科学。微生物所在的环境包括大气、土壤、水、光照、生物及非生物物质等有机和无机环境。目的研究如何影响人类健康，生产和生活，以及如何采取有效措施来预防和消除其危害，并利用这些规律来为人类的生产，生活，保护环境和生态平衡服务研究非致病微生物原因非致病微生物是地球上微生物主要组成（致病只占总量0.01%）。两者一般同时存在，要研究致病微生物必须考虑它与非致病微生物间相互作用规律；非致病微生物和致病微生物之间可以相互
2、演变；非致病微生物常用作致病微生物的指示代表；非致病微生物很多具有降解有害物质作用，可净化环境；非致病微生物是食品变质主要原因。医学微生物学致病微生物与机体之间的关系，以个体为主，寻找病因。卫生微生物学微生物（致病、非致病微生物）与外界环境之间的关系，以预防为主，着眼于对群体健康的影响区别卫生微生物医学微生物研究对象致病微生物,病毒非致病微生物病原微生物研究内容微生物与其生境之间关系病原微生物与机体的作用(感染,免疫等)研究范围群体个体研究目的预防,扬利避害寻找病因,治疗检验方法定性、定量、分型定性第二章 微生物生态生态学（ecology）研究生物系统与其环境（生物环境：种内，种间；非生物环境
3、：土壤，水，空气，温度，湿度，阳光）条件间相互关系，相互作用规律的科学。生态系统（ecosystem）地球上一切生物彼此之间以及与环境之间相互联系，在长期的历史进化中，形成了相互适应，相互制约的生存关系，生物群落与其生活环境存在着密切的关系，组成的统一体范围可大可小。包括开放系统，自我调控系统，总是趋于动态平衡。演替在特定生态系统中不同生物群落相继更替的过程先驱生物：最先进入环境的生物。生态平衡（ecological balance）生态系统各组成部分的内部或相互之间，在长期发展演化过程中，通过相互制约、转化、补偿、交换及适应而建立起来的一种相互协调的动态平衡关系。生态系统结构功能稳定状态物质
4、、能量的输入输出;干扰因素;耐受的限度;自我调节物质循环环境中的无机营养元素在生物群落作用下，经过吸收同化和复杂的不同形式有机物的转化，最后仍以简单无机物状态归还于环境的循环，称为生态系统中的物质循环。（三个生物功能群：生产者，消费者，分解者）光能，二氧化碳，无机物生产者有机物消费者有机物分解者光能，二氧化碳，无机物微生物生态学（microbial ecology）研究微生物与其所在环境和群落之间相互关系的科学即微生物群体与周围环境的生物和非生物因素的相互关系的科学。微生态学(Microecology) 研究人类、动物及植物与其正常微生物群相互关系的学科。研究内容正常微生物群与宿主之间的关系；
5、正常微生物群中群落之间的关系；正常微生物群和宿主与大环境之间的关系个体（individual）是指具有一定功能的生物体。种群(population)相同多个个体；群落（community）各种生物种群聚集在一起，形成一个群落生境（habitat）微生物生存外环境局部小空间称为微小生境龛（niche）也称为生态位。微生物在生境中所处的位置,具有功能的涵义土壤生境特征微生物生存与繁殖的理想场所；微生物最稳定的生境；人类活动影响大微生物生态特征代谢旺盛、繁殖迅速种多量大；菌种资源库；易形成抗逆结构：芽孢、孢子、荚膜；微生物间关系复杂；是微生物主要来源水的生境特征良好的溶剂；营养丰富；生物生境复杂；生
6、物生存的主要，重要生存环境。水微生物生态特征多数为革兰阴性菌；常具有鞭毛、纤毛等与水中生活相适应的结构特征；具有附着生长及相互聚合的特性；受环境影响大空气微生物生态特征营养匮乏，仅可提供微生物生存场所；只是微生物的暂居地；空气中无固有微生物，来源于水、土壤、动植物等。食品微生物生态特征营养丰富、水分、酸碱度等合适，微生物能在其中大量繁殖。微生物在食品中的生长，极易对食品环境本身产生影响，从而影响微生物种群微生物生态研究内容环境对微生物种群、数量分布、增殖速度及活力影响。微生物群体结构稳定性及可修饰性。微生物群体对环境功能。微生物与其生存环境之间、与其他各种生物之间相互关系、作用和演变规律最小因
7、子定律基本核心：任何生物的生物量决定于所存在环境中该生物生长所需的最低浓度营养，适用于“稳定状态”的环境耐受性定律每种生物生长繁殖只能耐受一定范围的生态因子，生态因子在数量和质量上的不足或过多均可影响微生物的存亡。耐受限度生物对生态因子所能耐受的最大值和最小值之间的范围综合作用定律将谢氏耐受定律与利比西的限制因子定律结合起来的产物。含义一个生物或一群生物的生存和繁殖取决于综合环境（非生物和生物因素）微生物的特点体积小，殖率大，世代时间短，适应性强，生物细胞直接与环境接触，很容易受环境影响 变异(variation)的存在使遗传保守性与遗传变异性相互作用，使生物通过逐渐适应演化得以长期生存。生物
8、适应性(adaption)是指生物能适应在一定时间内的环境波动或剧变以保证其本身生活和生存的能力，分遗传，表型适应性。对人类有利保存的变异对生物有利比较快速极为缓慢的过程人的意识自然环境条件人工选择(artificial selection)驯化自然选择(natural selection) 1.互生关系 偏利共生（commensalism）指两种种群共同存在于一个生境中，其中一个获益，而另一个不受影响。兼性与专性厌氧菌互利共生（mutualism）指生活在同一生境的两种微生物互换产物，相互依赖，共同有利，在生理上形成一个整体。海藻与表面之附着菌；海藻供氧和有机物，菌供维生素和CO2。互惠共生
9、（synergism）两个种群的共同生存可以互相受益，但不是一种固定的关系，解除关系后双方都能独立存在。溶源性噬菌体与白喉杆菌，后者只有在溶源状态产毒 2.寄生关系（parasitism） 一种生物侵入到另一种生物体上，获得自己所需要的营养物质生长，使后者遭受损害。病毒与宿主细胞，菌体与宿主细菌3.拮抗关系（amensalism）一种微生物产生某种物质干扰其他微生物的代谢活动；也称偏害共栖。真菌产抗生素抑制细菌生长4.捕食关系（predation）一种种群被另一种种群吞食。原虫吞噬细菌5.竞争关系（competition）两个种群共同生活于同一环境中，因需要相同的生长因子或其他环境条件而发生的
10、争夺现象。小核草履虫与大核草履虫6.种间共处（neutralism）指两种生物同时生存于同一栖息场所内，但互不影响，不发生生态关系（至少没有直接的生态关系）。 甲寄生于乙，并有害于乙-+寄 生 甲捕杀或吞食乙中一些个体-+捕 食 对甲有害，对乙无利也无害0-拮 抗 彼此相互抑制-竞 争 彼此互相有利非专性+互惠共生 彼此互相有利，专性+互利共生 对甲有利，对乙无利也无害0+偏利共生 两物种彼此互不影响00种间共处种群乙种群甲关系特点作用结果作用名称微生物对所生活环境完全适应才能保持生态平衡。打破生态平衡，发生生态失调(ecological disturbance)生态失调常导致微生物种群演替，
11、然后形成新的生态平衡。微生物在人体内的正常菌群与机体的生命活动和免疫功能密切相关。微生态失衡菌群失调症（dysbacteriosis）第三章 环境中微生物的主要类群原核：1.细菌（bacteria） 种属 分布 危害葡萄球菌属（Staphylococcus）医院内、空气、水、土壤、化妆品、物品和食品医院内感染、食物中毒、空气污染、化脓性感染及医药品化妆品污染链球菌属（Streptococcus）自然界、水、乳、尘埃（空气）化脓性感染、食物中毒、超敏反应性疾病、水与空气污染埃希菌属（Escherichia）、沙门菌属（Salmonella）广泛，土壤、水、腐物、医药品、化妆品、食品和粪便腹泻、肠
12、道内感染、食物中毒、食品变败、水和医药品化妆品污染志贺菌属（Shigella）粪便、水、土壤、食品细菌性痢疾霍乱弧菌（V.cholera）水源、食物霍乱副溶血性弧菌（V. parahemolyticus）水、海产品腹泻、食物中毒和食品变败破伤风梭菌（Cl. tetani）土壤、粪便破伤风肉毒梭菌（Cl. botulinum）土壤、海洋沉淀物和动物性食品肉毒中毒白喉杆菌（C. diphtheriae）空气、飞沫白喉结核分枝杆菌（M. tuberculosis）空气、物体表面结核病耶尔森菌属（Yersinia）动物及其污染物、排泄物鼠疫、腹泻和食物中毒布鲁杆菌属（Brucella）动物粪便、尿、乳
13、汁和空气布氏病炭疽芽孢杆菌（B.anthracis）土壤、空气皮肤、肠及肺炭疽嗜肺军团菌（L. pneumophila）土壤、污水和空气军团病铜绿假单胞菌(P. ueruginosu）土壤、空气、水、食品、医药品、化妆品、院内人体院内感染、食品变败、医药化妆品水污染柠檬酸杆菌属（Citrobacter）人与动物的粪便、土壤、水、污水、食物环境污染、食品变败及机会感染克雷伯菌属（Klebsiella）自然界，土壤、水、谷类、粪便和临床用品院内感染、环境感染及食品变败肠杆菌属（Enterbacter）水、污水、土壤、蔬菜、食品和化妆品食品变败、环境污染欧文菌属（Erwina）植物、水果和蔬菜植物致
14、病、水果蔬菜腐烂沙雷菌属（Serratia）土壤、水、植物表面、食品、鱼类、动物消化道食品变败、院内感染及植物病害迟钝爱德华菌（Edwardsiella）鱼类、水生动物和动物肠道鱼红病、肺气肿腐败病、人伤口感染及腹泻变形杆菌属（Proteus）土壤、污水、动物性食品、人与动物的肠道人类腐败性感染、食物中毒及腹泻2.放线菌（Actinomycetes）细胞壁含有胞壁酸，对抗生素敏感;无性繁殖（菌丝断裂、形成分生孢子或孢子囊的形式）;多数为腐生菌，人工培养比较困难;分解有机物;部分能产生抗生素 链霉菌属（Streptomyces）最高等的放线菌，孢子在固体培养基上萌发后长出向培养基内生长的营养菌丝
15、，表面生长的气生菌丝。分布土壤;作用分解有机物、生产抗菌素诺卡菌属（Nocardia）在固体培养基上生长时，只有营养菌丝，气生菌丝只有很薄一层或无，通过菌丝断裂形成孢子繁殖。(化脓性感染,降解烃,转化氰)小单孢菌属（Micromonospora）不形成气生菌丝，繁殖时从营养菌丝上长出孢子梗，梗的顶端着生一个分生孢子,分布土壤、污泥,作用分解有机物、产生抗菌素 3.鞘细菌（sheathed bacteria）单细胞连成的丝状体细菌,丝状体外包围一层由有机物或无机物组成鞘套 球衣菌（Sphaerotilus）细胞串成丝状，丝状体外包有鞘套;分解有机物的能力强;活性污泥曝气池常见菌，但数量过多引起污
16、泥膨胀铁细菌属（Crenothrix）带鞘的丝状菌，但丝状体多不分枝;能将低铁氧化为高铁(铁质水管蚀、塞 )四、滑动细菌不借鞭毛而靠菌体蠕动进行滑动的一类细菌。分布淡水、海水;贝氏硫菌属（Beggiatoa）硫循环;噬纤维菌属（Cytophaya）纤解五蓝细菌（blue bacteria）光合型微生物，光合色素主要叶绿素及藻蓝素，有的还含有藻红/黄素，分布淡水、海水；过量增殖：水华，赤潮，水体富营养化，铜绿微囊藻（M. aeruginosa）曲鱼腥藻（A. contorta）真核（真核细胞核，核膜，核仁，细胞器完整）一、真菌（fungi）进化程度高于细菌，演化与放线菌无关。 细胞结构和繁殖方式
17、类似于藻类；但不含叶绿素、不光合作用，腐生或寄生。不同于原生生物细胞壁；与细菌细胞壁区别-几丁质、无肽聚糖；分布生物体内；偏酸性和渗透压高的环境；可发酵、制药等、但人类疾患、动植物病害，霉变、霉烂。 （酵母菌属（Saccharomyces）细胞卵圆形，时球形或香肠状，发酵及变败；假丝酵母属-食用、工业；红酵母属-污染、致病；球拟酵母属；毕赤酵母属-酱油、酒变败）二霉菌曲霉属（Aspergillus）有横隔膜；多细胞丝状体；典型结构为孢子穗；分布土壤、空气、谷物；酿造、食品和制药、分解有机物能力极强；但霉变、产毒。青霉属(Penicillium）与曲霉类似，但孢子穗形态不同；帚状枝重要鉴定特征。
18、 抗生素及变败 。镰刀菌属工业及产毒。交链孢霉属是土壤、空气和工业材料上常见腐生霉菌。芽枝霉属引起食品霉变、污染谷物、纺织品、皮革、纸张和橡胶等。根霉属分解有机物能力强，在酿造、生物制品领域应用较多。毛霉属分解淀粉、蛋白质能力强，常用于发酵工业；也是环境物质循环中的常见菌。木霉属分布腐烂木材、植物残体、种子，土壤和空气；可纤维素酶、维生素B2 、抗生素；但栽培蘑菇的劲敌。三、藻类（algae）形态多样；单细胞或多细胞；丝状体者有横隔膜；与高等植物相同，亦行光合作用。原生动物（protozoa）单细胞低等动物；在环境中分布广；寄生或共生，更多腐生；在活性污泥法处理污水中吞噬细菌；无细胞壁；通过细
19、胞器完成摄食、呼吸、排泄、生殖等功能；虽为单细胞生物，结构复杂，是一个独立而完整机体；大多异养；可形成休眠体。鞭毛纲运动细胞器是鞭毛，体表有角质膜以维持形态；肉足纲运动器官为肉足，也是捕捉食物的细胞器；纤毛纲运动，摄食细胞器是纤毛；每个细胞有大，小细胞核；接合生殖，横分裂生殖；异养型，分游泳型和固着型 ；孢子纲某些有鞭毛或伪足；复杂生活史；常为寄生，环境中少见）非细胞型微生物不具细胞结构，仅为一团遗传物质被蛋白质壳包裹而形成的颗粒。 病毒（virus）特点-结构简单；专性寄生；抵抗力特殊室内空气来自人体，室外肠道为主，主要来自污水；水-主要来自人、畜粪便及污水，多肠道内病毒，可来自土壤，可吸附
20、悬浮固体物，高度蓄积于底泥；土壤-土壤中病毒可吸附于颗粒内而延长存活时间；食品-病毒性疾病-型传染性肝炎和胃肠炎；贝类生活环境污染贝类对病毒具有过滤富集作用第四章 研究和检测方法1.卫生微生物检验与医学微生物检验的区别与特点?2.样品的采集原则 ？3.影响采样代表性的因素有哪些？4.怎样使采样具有针对性？5.样品采集后为什么要尽快送检？6.怎样保护样品中的待检微生物？7.样品中抑菌物质去除方法有哪些？8.样品的处理策略（目的）与方法9.怎样浓缩样品中的微生物？10.环境中的微生物数量低,怎样提高检出率？卫生微生物检测的特点 检测对象多病原+非致病和条件致病微生物；特别是能反映环境、食品、健康相
21、关产品等样品卫生质量的卫生指示微生物检测范围广人体，空气，土壤，水食品等检测方法敏感检测数量很低的致病微生物定量测定和分型检测以探明感染性疾病的传染源、传播途径、流行情况卫生微生物检测的基本原则 生物安全个人防护；防标本和环境污染 -无菌操作、恰当处理污染废弃物 代表性样品种类；采样量，部位，时间；采样随机和均匀性；按批号抽样采样方案的类型防污染避免采样时外界微生物对样品新污染：采样用具、容器需严格灭菌，以无菌操作采样。防杀菌避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新抑菌物质：容器是否残留消毒剂，采样工具未冷却细标记注意对样品的详细标记：样品名称,编号,采样时间,采样者,检测项目尽快送检应（一般不超
22、过34小时）送检，减少待测微生物死亡，防止微生物繁殖对计数结果影响。保护待检微生物温度调节，加入保护剂，去除其他不利于待测微生物生存因素，低温运送培养基 ：分离病毒的组织块可放于50%甘油缓冲液中（pH8.0）5；也可用由0.5%水解乳蛋白，2%小牛血清，青、链霉素各500u/ml，制霉菌素50u/ml组成的溶液保存。分离鼠疫菌等革兰染色阴性菌多用卡布半固体培养基运送，用磷酸盐缓冲液处理过的棉棒采样，插入培养基底部，拧紧管口螺旋盖运送。pH；蛋白质；抑制剂抑制非目的微生物；渗透压；气体遵循完善的样品交接制度送往实验室的样品，必须附有样品送检单，实验室收到样品应按送检单逐项核对，检查样品是否符合
23、检验要求，确证无误方可签收待检。实验室检验原则相应的硬件条件和设备；具有合格检验人员；标准/公认的检验方法；实验室质量控制（实验室环境不应影响检验结果的准确性工作区与办公区分开；工作面积应满足检验工作的需要；温度、湿度、照度、噪声和洁净度等应符合工作要求；整体布局应采用单方向工作流程，避免交叉污染；一般样品检验：洁净区（超净工作台或洁净实验室）；病原微生物分离鉴定；应有检测不同病原菌的相应的条件和设备）微生物按其是否致病、致病力强弱、危害人体严重性、传染性大小、当地人群免疫水平、有无免疫制剂和特效治疗药物等可分成不同危害等级。危害等级I(低个体危害，低群体危害)不会导致健康工作者和动物致病的细
24、菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子(中等个体危害，有限群体危害)能引起人或动物发病，但一般情况下对健康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。III(高个体危害，低群体危害)能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原体(高个体危害，高群体危害)能引起人类或动物非常严重疾病，一般不能治愈，容易直接或间接或因偶然接触传播的病原体。实验室生物安全与管理很重视?科研课题跨专业；安全管理不重视；技术操作不规范；人员配备不严；健康监测不到位；执行制度不认真
25、实验室生物危害微生物医学实验室研究过程中病原微生物对人、环境、生态和社会造成危害和污染实验室生物安全为避免微生物和医学实验室中在进行各种有危害或有潜在危害的生物因子活动过程中，可能对人、环境和社会造成的危害或潜在危害，而采取的防护措施（硬件）和管理措施（软件），达到对人、环境和社会的安全防护目的主要考虑实验室生物安全防护，即实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护设施、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象的感染，确保周围环境不受实验对象的污染。基础(p1)实验室一级生物安全水平（ABSL-1)
26、;基础实验室二级;防护实验室三级;最高防护实验室四级甲类传染病鼠疫、霍乱乙类传染病传染性非典型肺炎、艾滋病、病毒性肝炎、脊髓灰质炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、流行性出血热、狂犬病、流行性乙型脑炎、登革热、炭疽丙类传染病流行性感冒，黑热病，手足口病传染性非典型肺炎、肺炭疽和人感染高致病性禽流感，采取甲类传染病预防、控制措施根据病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为四类第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动
27、物与动物间传播的微生物。 第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。 抑菌物质去除方法中和法，滤膜过滤法，稀释法，吸附法指示微生物（indicator microorganism）是在常规卫生监测中，用以指示样品卫生状况及安全性的（非致病）微生物（或细菌） 类型菌落总数（Aerobic Plate Count）（细菌、霉菌和酵母菌数）-菌落总数是指
28、被检样品的单位重量(g)、容积(ml)、表面积(cm2)或体积(m3)内，所含有的能在某种培养基上经一定条件、一定时间培养后长出的菌落数量，以菌落形成单位数（colony forming unit ，cfu）；用于判定检样被微生物污染的程度或动态观察。也是某些样品的卫生限量标准。常用标准平板计数法(standard plate-counting method)和表面涂布法（Spatula Method ） 标准平板计数法表面涂布法不透明培养基-+菌落生长处琼脂表面+琼脂内琼脂表面加样量1ml0.1ml误差大样分散方式混匀涂布营养琼脂培养基的配方及培养基的消毒方法？倾注培养法与表面涂布法的区别与
29、优缺点？大肠菌群、粪链球菌（fecal Strptococcus Fs）、产气荚膜梭菌大肠菌群（coliform group）是一群能在3537C、24小时内发酵乳糖产酸产气的、需氧或兼性厌氧的、革兰阴性的无芽胞杆菌。是存在于人和温血动物肠道中的一大群菌。检品受人，畜粪便污染状况，间接反映肠道病原微生物存在；埃希氏菌属(Escherichae)克雷伯氏菌属(Klebsiella)肠杆菌属(Enterobacter)枸橼酸杆菌属（Citrobacter）Serratia(沙雷菌属)；Proteus （变形杆菌属）根据生长温度的差异，将能在37C生长的称为总大肠菌群，而在44.5C仍能生长的大肠菌
30、群称粪大肠菌（主要成员是埃希氏菌属菌。 利用大肠杆菌产生的葡萄糖苷酸酶，分解吲哚葡萄糖苷酸，产生有色物质，而使大肠杆菌菌落显色，对大肠杆菌数进行测定）产气荚膜梭菌（Clostirdia）是一类能还原亚硫酸盐为硫化物、厌氧生长的、革兰阳性梭状芽胞杆菌。是人和动物，特别是食草动物肠道内的常住菌，数量少于大肠杆菌，每克粪便约为105106。由于能形成芽孢，有较强抵抗力，若样品中产气荚膜梭菌被大量检出而大肠菌群数量很少时，则表示样品曾受过粪便污染，即有陈旧性污染。常被作为水或土壤指标菌其它指示菌间接反映相关致病菌存在的可能性不得检出的致病菌沙门菌与志贺菌-粪口感染性疾病和食物中毒；金黄色葡萄球菌-化脓
31、，败血症，肠毒素-食物中毒；铜绿假单胞菌-创口感染，外科特定菌，泳池；破伤风梭菌-土壤，外创病毒（包括噬菌体）间接反映肠道病毒存在 检出意义大肠杆菌耐热大肠菌群总大肠菌群选择指示微生物总原则数量大易于检出；检验方法简单、经济、方便；有一定代表性，其数量变化能反映样品卫生状况及安全性 作为粪便污染指示菌的条件有哪些？大量存在于人及温血动物肠道，未被粪便污染样品中无此种菌存在在外环境中抵抗力，包括对消毒剂抵抗力与肠道致病菌大致相似或稍强在外环境中不繁殖，存活时间与肠道致病菌大致相似或稍长；检验方法简便，易于定量计数为什么常常通过检测指示微生物反映样品卫生安全性？ 致病微生物种类多，检测方法各异，对
32、样品卫生安全性作出评价时，不可能分别检测各种微生物致病微生物的数量少，而检测方法灵敏度不高；或者受到检测量限制，可能导致假阴性结果 分离、鉴定致病微生物需时长，不能满足实际工作需要分离、鉴定致病微生物费用高，而且对人员的技术要求也相对较高08版大肠菌群MPN计数较03版优势操作更简单，适合批量检测；检出概率大；可修复已损伤的细胞；采取增菌液接种，减少认为误差 大肠菌群在结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）上的生长情况-典型菌落：紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5mm或更大。与大肠菌群PetrifilmTM测试片计数法方法一致；大肠杆菌蓝色带气泡的菌落/大肠菌群红色带气泡的菌落 卫
33、生微生物样品特点数量低-浓缩；细菌受损-复苏；杂菌多-选择性增菌和分离样品混匀使样品具有代表性；样品中待测微生物释放浓缩方式沉淀法细菌可通过普通离心机离心沉淀而浓缩，或者通过差速离心，去除杂质，收集菌体，达到浓缩的目的。病毒浓缩需采用高速或超速离心机过滤法是将样品在负压或正压作用下，通过孔径为0.45m滤膜，细菌被阻留在膜上，而达到浓缩目的。样品中的病毒可通过膜的静电吸附浓缩。还可消除样品中的抑制剂对后续培养的影响吸附沉淀法可分特异性和非特异性吸附；非特异性吸附如利用加入化学制剂，形成沉淀，细菌被共沉淀的方法；而特异性吸附则是利用配体与受体的亲和力，吸附待检微生物，如为浓缩检样中的流感病毒，利
34、用该病毒具有血凝素，可与红细胞结合特点，将检品中加入红细胞吸附病毒，低速离心收集红细胞复苏环境样品中微生物，因经受冷、热、脱水干燥、辐照、高渗透压或消毒剂作用，可能引起亚致死性损伤，受损伤微生物用一般的培养方法不易培养，需预先进行复苏或修复，才能进行检测基本方法在细菌繁殖之前，将其置于无选择性压力的培养环境中，一般降低培养温度培养一定时间后，再进行检验选择性增菌与分离物理方法主要通过调节培养的温度、气体条件和光照，进行选择性增菌与分离的方法；化学方法利用目的微生物的特定生理功能在分离培养基中加入抑制其他微生物生长和显示目的微生物化学制剂，配制成选择性鉴别培养基，达到对目的微生物增菌分离的目的
35、定量计数法倾注平板计数法主要用于细菌，霉菌，酵母菌菌落总数，用基本透明培养基。表面涂布计数法使用的培养基不透明；需对计数的菌落再进行证实试验；因倾注溶化的热琼脂对待检菌有损伤的情况 。MPN法样品中混其他细菌，无法用平板；对被检菌数量少样品进行选择性计数；大肠菌群，粪大肠菌群，产气荚膜梭菌计数比浊法将菌悬浊液-硫酸钡标准浊度-推断（药敏试验）分型鉴定的方法噬菌体分型/细菌素分型/耐药谱分型/血清学分型/质粒图谱分型第七章 水微生物食品中致病菌污染的检测策略程序？pH水中微生物适宜范围pH6.5-8.5，自然水pH值相适；海水pH7.58.5，微生物生长最适pH7.2-7.6 静水压水深每增加1
36、0米，静水压就增加一个大气压，90%的海水静水压大于100个大气压影响分布类群因素温度、静水压、光照、溶解氧、氢离子强度、化学物质和营养物质水中细菌总特点有鞭毛，能运动，聚集性，粘附性，营养要求低，多为革兰阴性（原因-阴性菌外膜比阳性菌更能适应营养成分稀薄的水环境，使细菌本身重要水解酶被保留在胞质中，不致被分泌和丢失到水环境中，并且能从水中吸收重要营养物质。另外外膜的脂多糖（LPS）还可阻止某些有毒分子如脂肪酸和抗菌素） 来源固有微生物/外来微生物（下雨，自然沉降，生活，农业，工业，医院污水，灌溉，雨水冲刷）种类细菌、真菌、病毒、藻类和原生动物分布不均匀；与水量、水体类型、层次、污染状况、季节
37、等各种因素影响有关，垂直分布富营养化水体内氮和磷等营养物质增加导致浮游生物异常增殖，使水体透明度下降、溶解氧降低，严重时还伴有鱼类和高等水生生物的大量死亡过程水华淡水藻类，赤潮海水浮游生物地下水由于土壤过滤，营养成分和氧相对较少，细菌也比地面水少，主要为无色杆菌属、黄杆菌属海水占地面总水量97%，海洋中盐含量高、渗透压大、温度低，静水力很高（特点菌体小，革兰阴性菌多，大多具鞭毛，多兼性厌氧菌，蛋白质分解能力强，糖分解能力低；具嗜盐性，无盐不长，少数能在淡水中生长；大部分具嗜低温性， 1225生长较好， 30时很少能够生长；营养要求低；多形性；发光性）卫生学意义引起介水传染病，污染食品引起感染，
38、引起食品腐败变质 粪便污染指示菌条件 1在污染的水中有致病菌存在时，指示菌亦应存在2不存在于未污染水中3指示菌在数量上应大于致病菌数量4在水中生存寿命要比致病菌长，并对消毒剂有相同的抵抗力5指示菌的密度应与污染程度有一定的相关6作为微生物学标准，应适用于各种水源7指示菌的特性应是稳定的，在水中不能繁殖8检测方法简单、能定量、准确性高、需时短饮用水卫生细菌学指标菌落总数将1ml水样接种在营养琼脂培养基中，于37经1824h后，生长出细菌菌落总数。判断水质污染程度，但不能说明污染来源大肠菌群一群需氧或兼性厌氧能在37培养24h内发酵乳糖产酸，产气革兰阴性无芽孢杆菌（粪便污染指示菌）大肠菌群数 1L
39、/100ml水中所含大肠菌群数，表示水被粪便污染程度，间接表明有肠道致病菌存在可能性大肠菌群测定方法有哪些？ 总大肠菌群能在37C生长，在44.5C仍能生长的大肠菌群称为耐热大肠菌群或粪大肠菌群表示近期污染，且来源于温血动物肠道，主要成员埃希氏菌属菌粪大肠菌群近期污染；大肠菌群-水样中间触及会更高肠球菌/粪链球菌肠道中常住的菌种之一，他的存在可提示有粪便污染 粪链球菌在人及各种动物粪便中的含量不同，在人类少于粪大肠菌群，而动物则多于粪大肠菌群。因此判别水污染的来源时可参考粪大肠菌群/粪链球菌（FC/FS）比值来评价。FC/FS 4.1-家庭污水，FC/FS（ 0.7 ， 4.1 ）-混合污染，
40、FC/FS0.7-畜禽污染产气荚膜梭菌能形成芽孢，外环境存活时间长，检出提示远期污染生活饮用水卫生标准100毫升水中总大肠菌群不得检出；粪大肠菌群不得检出；每毫升水中细菌菌落数不得超过100个肠道病毒特点排毒量大，时间长，存活时间久，抵抗力强，儿童易感染，剂量较低手足口病四季均可发病，好发于夏秋季节；以儿童为主，常发于幼托机构，呈流行趋势，粪口途径、经水传播、呼吸道；手掌、脚掌，有时臀部皮疹或水泡水中病毒的检验浓缩第一步浓集-浓缩：100升水；调pH3.5+AlCl3(0.005mol/L）；正压过滤；3%牛肉浸膏-0.05mol/L甘AApH9.5洗脱第二步浓集pH3.5絮凝，搅拌15min
41、沙门菌属Salmonella是一群符合肠杆菌科定义并与其血清学相关的革兰氏阴性、需氧、无芽孢杆菌。菌种繁多，血清型2500，我国 200。多数对动物致病。少数对人类致病。有些对人和动物均致病防治原则致病菌预防的三大原则：消灭或控制传染源，切断传染途径，保护易感人群；早发现、早隔离和早治疗病人并选用敏感药物治疗（氯霉素），查出带菌者，对感染动物进行处理；加强粪便、水源和食品卫生管理；疫苗志贺菌属 Shigella人类细菌性痢疾的病原菌，俗称痢疾杆菌。当前细菌性疾痢仍然在世界很多国家流行代表细菌痢疾杆菌；所致疾病细菌性痢疾，我国常见福氏志贺菌，宋内志贺菌来源仅为人，经粪口途径致病性急性慢性细菌性痢
42、疾-脓血粘液便传染性强，高热大肠埃希菌肠道正常菌群，多数不致病，为G-短小杆菌，多数有周身鞭毛、普通菌毛和性菌毛。EMB平板-紫黑色有金属光泽；SS平板-红色菌落，个体比志贺大；具有菌体，荚膜，鞭毛抗原，是血清学分型依据致病性集聚性粘附上皮细胞，阻止液体吸收小儿顽固性腹泻、旅行者腹泻：呕吐，脱水，低热小肠EAEC菌毛、Vero毒素、内毒素，中断蛋白质合成，使肠上皮细胞死亡脱落任何年龄，出血性结肠炎：水样便，大量出血，剧烈腹痛，低热或无，可并发溶血性尿毒综合征大肠EHEC质粒介导粘附和破坏上皮细胞流行性婴儿腹泻，水样便，恶心，呕吐，发热小肠EPEC质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞婴幼儿和成人
43、痢疾症状：水样便，少量血便，腹痛大肠EIECLT和（或）ST肠毒素，大量分泌液体和电解质婴幼儿，旅行者腹泻 水样便，恶心，呕吐，腹痛，低热小肠ETEC致病机制疾病与症状部位血清型菌株霍乱菌经水，粪口途径传播，怕热，不耐酸，鱼虾，贝类常见致病霍乱弧菌突破胃酸屏障，进入小肠；穿过肠黏膜的黏液层；在小肠的碱性环境下大量繁殖，并产生霍乱肠毒素，引起的分泌性腹泻临床表现起病急；剧烈上吐下泻（米泔样腹泻物）；大量水分和电解质丧失；低容量性休克及心力不齐和肾衰竭（死亡率高达60%）防治控制传染源：隔离病人，治疗无症状携带者；切断传播途径：做好“三管（水源、粪便、食物）一灭（灭蝇）”，养成良好的卫生习惯；提高
44、易感者免疫力；治疗霍乱的关键-及时补液副溶血性弧菌（V. parahemolyticus）存在于近海海水、海底沉积物和海产品中，是沿海地区食物中毒中最常见的一种病原菌特点嗜盐、畏酸、怕热、耐低温高渗，无盐不长，36%NaCl生长迅速；0.5%或8% 停止生长；海水中能存活47日以上，淡水中生存12日；对酸敏感，在1%醋酸中或50%的食醋中1分钟死亡；不耐热，56、5分钟即可杀死，90、1分钟灭活；对低温及高浓度氯化钠抵抗力甚强 ；夏秋季沿海地区引起食物中毒和急性腹泻的主要病原菌；少量带菌食物，适宜温度34小时，细菌可急增至中毒数量；进食肉类或蔬菜而致病者，多因食物容器或砧板污染所引起致病力与其
45、溶血能力平行，致病性菌株能溶解人及家兔红细胞（高盐），称为“神奈川”试验阳性。血平板上可见溶血环临床表现潜伏期多为10小时左右，一般840小时，主要症状有恶心、呕吐、上腹部阵发性剧烈腹痛、频繁腹泻、洗肉水样或带粘液便，无里急后重，每日56次，体温39空肠弯曲菌在42生长；传染源：病人/带菌者/动物；密切接触、粪口传播；引发婴幼儿急性肠炎小肠结肠炎耶尔森菌嗜冷性,主要宿主-猪,其污染情况不能用大肠菌群数推断气单胞菌低热或不发热腹泻呈水样稀便，有腹痛而无里急后重，个别类似霍乱，外创感染邻单胞菌属只有一个种-类志贺邻单胞菌，常见于助产分娩婴儿，病死率高达70钩端螺旋体人畜共患传染病；传染源：鼠类和猪
46、；传播途径：疫水传播，接触传播；人群易感性：普遍易感。病后对同型钩体有免疫力，型间无交叉免疫，故可再次感染溶组织内阿米巴引起阿米巴痢疾；在肠壁、肝、肺、脑、泌尿生殖道和其他部位形成溃疡或脓肿 水微生物污染的预防？水体自净指天然水体受到污染后，在无人为处理的条件下，借水体自身的能力使之得到净化的过程，在自净过程中包括稀释、沉降、扩散等物理作用，氧化、还原、分解、凝聚等化学作用以及生物学作用。 怎样进行污水处理？消除水微生物的危害？污水三级处理一级处理是通过机械处理，如格栅、沉淀或气浮，去除污水中所含的石块、砂石和脂肪、油脂等二级处理是生物处理，污水中的污染物在微生物的作用下被降解和转化为污泥三级处理是污水的深度处理，它包括营养物的去除和通过加氯、紫外辐射或臭氧技术对污水进行消毒需氧处理细菌在通氧条件下将水中有机物氧化分解为无害小分子无机物的污水处理方法活性污泥是由细菌、真菌、原生动物及有机、无机物组成的絮凝体，在氧化分解有机物中起主要作用，主体-菌胶团，优势菌：有荚膜的生枝动胶菌（zoo-gloea ramigra）有吸附，絮凝沉淀，分解功能。细菌分泌胶状物质将细菌粘合在一起形成团块，被包在胶质中的细菌可防止被原生动物吞噬。由于其他微生物在其上栖息，并粘附悬浮颗粒，使活性污泥絮状