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1、-植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根)-第 2 页植物基因组DNA提取试剂盒1 取植物新鲜组织约100 mg或干重组织约30 mg，加入液氮充分研磨。2 将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 L 65预热缓冲液GP1的离心管中（实验前在预热的GP1中加入巯基乙醇，使其终浓度为0.1%），迅速颠倒混匀后，将离心管放在65水浴20 min，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。3 加入700 L氯仿，充分混匀，12,000 rpm（13,400g）离心5 min。 注：若提取富含多酚或淀粉的植物组织，可在第3步前，用酚：氯仿/1:1进行等体积抽提。4 小心的将上一步所得水层上相转入一个新的离心管
2、中，加入700 L缓冲液GP2，充分混匀。5 将混匀的液体转入吸附柱CB3中，12,000 rpm（13,400g）离心30 s，弃掉废液。（吸附柱容积为700L左右，可分次加入离心。）6 向吸附柱CB3中加入500 L缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（13,400g）离心30 s，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。7 向吸附柱CB3中加入600 L漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（13,400g）离心30 s，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。8 重复操作步骤7。9 将吸附柱CB3放回收集管中，12,000 rp
3、m（13,400g）离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中的乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。10 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 L洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，12,000 rpm（13,400g）离心2 min，将溶液收集到离心管中。 注意：洗脱缓冲液体积不应少于50 L，体积过小影响回收率。洗脱液的PH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内（可以用NaOH将水的pH值调到此范围），pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20，以防DNA降解。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2 min，12,000 rpm（13,400g）离心2 min。