微生物复习(13页).doc

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1、-微生物复习-第 13 页绪论1. 什么是微生物？主要包括哪些类群?微生物: 微生物是形体微小、单细胞或个体结构简单的多细胞、甚或无细胞结构，用肉眼看不见或看不清的低等生物的总称。 非细胞型生物：病毒、亚病毒（类病毒、朊病毒、拟病毒） 原核微生物：细菌（真细菌、古生菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、支原体和衣原 体 。 真核微生物：真菌（酵母菌、霉菌、蕈菌）显微藻类、原生动物 2. 与其它生物相比微生物有哪五大特点？1.体积小、面积大；2.吸收多，转化快；3.生长旺，繁殖快；4.适应强，变异快；5.分布广，种类多。3. 微生物学的发展经历了几个阶段？各阶段的代表人物分别是谁？史前期朦胧

2、阶段（约8000年前-1676）特点：人们虽然没有看到微生物，但已经不自觉的利用有益微生物、防止有害微生物。中国古代：初创期-形态学时期（1676-1861）特点：这一时期微生物学的研究工作主要是对一些微生物进行形态描述。代表人物列文虎克：微生物学的先驱者奠基期-生理学时期（1861-1897）特点：这一时期的主要工作是查找各种病原微生物，把微生物学的研究从形态描述推进到生理学研究的新水平，建立了系列微生物学的分支学科。代表人物：巴斯德和科赫。发展期生化水平研究阶段特点：微生物学的研究进入分子水平，微生物学家的研究工作从上一时期的查找病原微生物转移到寻找各种有益微生物的代谢产物。代表人物E.B

3、chner生物化学奠基人成熟期分子生物学水平研究阶段特点：微生物学从一门应用学科发展为前沿基础学科，其研究工作进入分子水平，而微生物因其不同于高等动植物的生物学特性而成为分子生物学研究的主要对象。在应用研究方面，向着更自觉、更有效和可认为控制的方向发展，与遗传工程、细胞工程和酶工程紧密结合，成为新兴生物工程的主角。 4. 研究微生物学的基本方法有哪些？5. 什么是无菌操作？第一章1. 细菌的基本形状有几种？细菌大小测量的方法及单位是什么？答：球菌、杆菌、螺旋菌、弧菌、螺菌、螺旋体；度量细菌的大小的单位是微米。2. 细菌细胞结构中一般结构和特殊结构分别包括哪些？ 基本：细胞壁、细胞膜、核区、细胞

4、质和内含物 特殊：糖被、鞭毛、菌毛、性毛、芽孢和其他休眠构造、伴孢晶体一般结构：细胞壁、肽聚糖特殊结构：细胞外（糖被、鞭毛、菌毛），细胞内（芽孢）3. 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分是什么？结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。乙醇脱色： G细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂 ，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色； G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和文联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，细胞退成无色。复染: G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色。重要性: 革兰氏染色有着十分重要的理论与实践意义。通过这一染

5、色，几乎可把所有的细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两个大类，因此它是分类鉴定菌种时的重要指标。又由于这两大类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异，因此任何细菌只要通过简单的革兰氏染色，就可提供不少其他重要的生物学特性方面的信息。4. 肽聚糖单体是由哪三部分组成的？青霉素、溶菌酶的作用位点是那个部位？答：双糖单位、四肽尾、肽桥；青霉素和溶菌酶的作用机制是通过与细菌细胞壁的肽聚糖层的作用位点相结合，破坏细菌的细胞壁，细菌胞体内的渗透压很高，而细胞膜又很脆弱，于是细菌就在人体内相对低渗的环境里溶胀，最终破裂。G+菌的肽聚糖层达20到50层，是

6、其细胞壁的主要成分，而且其胞质的渗透压达25-50个大气压；G-菌的肽聚糖层很少，只有几层，最多十几层，其胞质的渗透压只有5到6个大气压。因此，G+菌比G-菌对青霉素和溶菌酶更敏感。5. 何为原生质体、球状体、L-型细菌？a原生质体：指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞。（G+最易形成原生质体 原生质体比正常细菌更易导入外源遗传物质，有利于遗传学基本原理的研究）b球状体：又称原生质球，指还残留了部分细胞壁（尤其是G-细菌外膜层）的原生质体c L型细菌：L型细菌专指那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的

7、细胞壁缺损菌株5.何为糖被，荚膜，芽孢，鞭毛，伴孢晶体？各有何功能？6. 何为糖被、芽孢、芽孢晶体？菌毛、性菌毛及鞭毛的功能是什么？A糖被：包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。b芽孢：某些细菌在其生长发育后期，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造功能: 1.整个生物界中抗逆性最强的生命体，是否能消灭芽孢是衡量各种消毒灭菌手段的最重要的指标2.芽孢是细菌的休眠体，在适宜的条件下可以重新转变成为营养态细胞3.产芽孢细菌的保藏多用其芽孢。产芽孢的细菌多为杆菌，也有一些球菌4.芽孢的有无、形态、大小和着生位置是细菌分类和鉴定中的重要指标5.芽孢与营养细胞相

8、比化学组成存在较大差异，容易在光学显微镜下观察c伴孢晶体：少数芽孢杆菌，在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体功能：不溶于水，对蛋白酶类不敏感，容易溶于碱性溶剂 d.荚膜：包被在单个细菌外的、有固定层次的、层次较厚透明胶状物质e鞭毛：生长在某些细菌表面的长丝状、波曲的蛋白质附属物功能：数目为一至数十条，具有运动功能 菌毛：又称伞毛，纤毛等，常存在于G-致病菌中，是一种长在细菌表面的一些比 鞭毛更细短、中空、直硬且数量较多的细丝。7. 细菌主要通过何种方式繁殖后代？什么是菌落？细菌菌落有何特点？答：1.裂殖（二分裂、三分裂、复分裂），2.芽殖a菌

9、落：将单个细菌（或其他微生物）细胞或一小堆同种细胞接种到固体培养基表面（有时为内层），当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时，该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆，此即菌落。菌落特点：细菌的菌落有其自己的特征，一般呈现湿润、较光滑、较透明、较粘稠、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位的颜色一致等。其原因是细菌属单细胞生物，一个菌落内无数细胞并没有形态、功能上的分化，细胞间充满着毛细管状态的水。8. 放线菌的菌丝按功能和形态可分为几种类型？通常通过什么方式繁殖后代？ 放线菌：一类主要呈现菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物。可分为：营养菌丝，又称基质菌丝，主要功能是吸收营

10、养物质，有的可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据气生菌丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝在气生菌丝上分化出可产生孢子的孢子丝 分生孢子（最常见） 借孢子 无鞭毛 胞囊孢子 放线菌繁殖方式 有鞭毛 基内菌丝断裂 借菌丝 任何菌丝片段（各种放线菌）9. 放线菌最主要的特征是甚么？菌落有何特点.菌落特点：干燥，不透明，表面呈致密的丝绒状，上有一薄层彩色的“干粉”菌落和培养基的连接紧密，难以挑取，菌落的正反面颜色常不一致，以及在菌落边缘的琼脂平面有变形的现象等等。10. 多种蓝细菌具有哪两种重要的功能？完成这两种功能的场所分别在那个部位？11. 支原体、立克次氏体、衣原体各有何主要特点？支原体：1.

11、细胞很小，直径一般为150300nm，多数250nm左右，故光镜下勉强可见2.细胞膜含甾醇，比其他原核生物的膜更坚韧3.因无细胞壁，故G-且形态易变，对渗透压较敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感4.菌落小，在固体培养基表面呈特有的“油煎蛋”第二章1. 酵母菌通过何种方式产生后代？菌落有何特征？ 芽殖：各属酵母菌都存在 无性 裂殖：在裂殖酵母菌中存在 节孢子 酵母菌的 产生无性孢子 掷孢子 裂殖方式 厚垣孢子 有性（产子囊孢子）酵母菌：一般呈现较湿润、较透明、表面较光滑，容易挑起，菌落质地均匀，正面与反面以及边缘与中央部位的颜色较一致2. 举例说明酵母菌三中生活方式的不同。3. 霉菌的菌丝体可

12、分为哪几种类型？它们可分化出哪些特化构造？ 营养菌丝：假根、匍匐菌丝、吸器、附着胞、附着枝、菌核、菌索、菌环 气生菌丝：（简单子实体）分生孢子头、孢子囊 （复杂子实体）分生孢子器、分生孢子座、 分生孢子盘 （能产生有性孢子）担子、子囊果4. 霉菌的繁殖方式可分为哪两类？分别可产生哪些孢子？无性孢子有：厚垣孢子、节孢子、分生孢子、孢囊孢子、游动孢子、芽孢子、掷孢子。 有性孢子有：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。5. 霉菌的菌落特征是什么？主要代表属有哪些？霉菌：菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的蛛网状，绒毛状，棉絮状或毡，状；菌落与培养基间的连接紧密，不易挑取，菌落的正

13、面与反面的颜色、构造，以及边缘与中心的颜色、构造常不一致等。6. 什么是蕈菌？其最大特征是什么？蕈菌：通常指那些能形成大型肉质子实体的真菌，包括大多数担子菌类和极少数的子囊菌类第三章1. 什么叫营养？什么是营养物？营养：是指生物体从外部环境中摄取对其生命活动必须的能量和物质，以满足正常生长和繁殖需要的一种最基本的生理功能营养物：指具有营养功能的物质，包括非常规物质形式的光辐射能在内 营养物的生理功能：微生物的营养物可为它们的正常生命活动提供结构物质、能量、代谢调节物质和必要的生理环境2. 营养物质包括哪些？各有何功能？ 碳源:一切能满足微生物生长繁殖所需碳元素的营养物氮源:提供微生物生长繁殖所

14、需氮元素的营养源能源:能为微生物生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能生长因子:调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物无机盐:1.参与微生物中氨基酸和酶的组成 2.调节微生物原生质胶体的状态维持细胞的渗透与平衡 3.酶的激活剂水:1.起到溶剂与运输介质的作用 2.参与细胞内一系列化学反应 3.维持蛋白质、核酸等生物大量分子未定的天然结构 4.热的良好导体 5.通过水合作用与脱水作用控制3. 根据碳源、能源及电子供体的不同可将微生物划分为几种类型？举例说明。4. 营养物质进入细胞的方式有哪几种？各有何特点？ 不通过膜上载体蛋白：单纯扩散运送方式 不耗能：促进扩散 通过

15、膜上载体蛋白 运送前后溶质分子不变：主动运送 耗能 运送前后溶质分子改变：基团移位5. 什么是培养基？配置培养基时应遵循哪些原则？培养基：指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料 原则：尽快配制并立即灭菌6. 培养基按化学成分、物理状态、用途可划分为哪几种类型？化学成分：1.天然培养基2.组合培养基3.半组合培养基 物理状态：1.液体培养基2.固体培养基3.半固体培养基4.脱水培养基 用途：1.基础培养基 2.加富培养基 3.选择营养基 4.鉴别营养基7. 采用什么方法能分离到能分解并利用苯作为碳源和能源物质的细菌纯培养？第四章1. 什么是病毒？有何特点？病毒：是一类有核

16、酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”，其本质是一种只含DNA或RNA的遗传因子，它们能以感染态和非感染态两种状态存在病毒粒子：专指成熟的，结构完整的和有感染性的单个病毒特点：1.形体极其微小，一般都能通过细菌滤器，故必须在电镜下才能观察2.没有细胞构造，其主要成分仅为核酸和蛋白质两种，故又称“分子生物”3.每一种病毒只含一种核酸，不是DNA就是RNA 4.既无产能酶系，也无蛋白质和核酸合成酶系，只能利用宿主活细胞内现成代谢系统合成自身的核酸和蛋白质组分5.以核酸和蛋白质等“元件”的装配实现其大量繁殖6.在离体条件下，能以无生命的生物大分子状态存在，并可长期保持其侵染活力7.对一般

17、抗生素不敏感，但对干扰素敏感8.有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染2. 病毒的大小测量单位是什么？图示病毒的典型构造。nm3. 什么是包涵体、噬菌斑？包涵体：病毒在增殖的过程中，常使寄主细胞内形成一种蛋白质性质的病变结构，在光学显微镜下可见。多为圆形、卵圆形或不定形。一般是由完整的病毒颗粒或尚未装配的病毒亚基聚集而成；少数则是宿主细胞对病毒感染的反应产物，不含病毒粒子噬菌斑：由于噬菌体的作用被溶菌而形成圆形斑，称为噬菌斑。噬菌斑的大小，从肉眼勉强可见的小形斑直到直径1厘米以上的大形斑不等噬菌体：感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，

18、故称为噬菌体。意义：可利用噬菌体进行细菌的流行病学鉴定与分型，以追查传染源。由于噬菌体结构简单、基因数少，是分子生物学与基因工程的良好实验系统4. 什么是烈性噬菌体、温和噬菌体？烈性噬菌体增值过程分那几步？烈性噬菌体：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。 温和性噬菌体：噬菌体侵染宿主后，并不增殖，裂解，而与宿主DNA结合，随宿主DNA复制而复制，此时细胞中找不到形态上可见的噬菌体，这种噬菌体称为温和性噬菌体或溶源噬菌体。5. 什么是一步生长曲线？可分几个时期？各时期有何特点？定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，称作一步生长曲线。

19、因它可反映每种噬菌体的3个最重要的特征参数潜伏期，裂解期和裂解量，故十分重要。6. 什么是溶源简述其特点。溶源性细菌：细胞中含有以原噬菌体状态存在的温和噬菌体基因组的细菌7. 类病毒、拟病毒、朊病毒化学组成分别是什么？类病毒：是一类只含RNA一种成分、专性寄生在活细胞内的分子病原体，目前只在植物体内发现拟病毒：又称类类病毒，壳内类病毒或病毒卫星，是指一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒。拟病毒极其微小，一般仅由裸露的RNA或DNA组成朊病毒：又称“普里昂”或蛋白侵染子，是一类不含核酸的传染性蛋白质分子，因能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的构象变化，因而可使宿主致病8. 病毒有何实

20、际作用？第五章1. 在化能异养微生物的生物氧化中，其基质脱氢和产能途径主要有那几条？试比较各途径的主要特点。（从产生的还原力能量来理解）1、EMP途径 特点：基本代谢途径，产能效率低，提供多种中间代谢物作为合成代谢原料，有氧时与TCA环连接，无氧时丙酮酸及其进一步代谢产物乙醛被还原成各种发酵产物，与发酵工业有密切关系。2、HMP途径3、ED途径4、TCA循环 特点：1、为糖、脂、蛋白质三大物质转化中心枢纽。2、循环中的某些中间产物是一些重要物质生物合成的前体；3、生物体提供能量的主要形式；4、为人类利用生物发酵生产所需产品提供主要的代谢途径。如：柠檬酸发酵；Glu发酵等。2. 生物氧化分为哪几

21、种类型？（概念）生物氧化：生物氧化是指发生在活细胞中的一系列产能性氧化反应的总称3. 化能自养菌和光能营养菌能量代谢有何特点？4. 什么是紫膜，有何功能？在膜上呈斑片状（直径约0.5 mm）独立分布，其总面积约占细胞膜的一半，主要由细菌视紫红质组成。 功能：能进行独特光合作用5. 何为生物固氮作用？能固氮的微生物有哪几类？微生物将氮还原为氨的过程称为生物固氮 自生固氮菌共生固氮菌 联合固氮菌 6. 固氮过程需要满足那些条件？ATP 、固氮酶、 镁离子 、 底物N2、厌氧微环境 、还原力H及其载体7. 什么叫次生代谢和次生代谢物？肽聚糖的合成过程分几个阶段？次生代谢是指微生物在生长到稳定期前后，

22、以初级代谢产物为前体，合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质的过程。通过次生代谢途径合成的产物为次生代谢物。 第六章1. 什么是纯培养？纯培养的获得方法有哪些？纯培养(pure culture)微生物学中把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代,称纯培养.平板划线分离法稀释平板法单孢子或单细胞分离法选择性培养基分离法 2. 微生物的生长可通过那些方法测定？（1）个体计数法直接法血球计数板法 涂片染色法 间接法平板菌落数法 薄膜过滤计数法 比浊法（2）重量法（3）生理指标法3. 什么是典型生长曲线？他可分几个时期？各时期有何特点？在生产实践有何指导作用？ 典型生长曲线 ：将少量纯

23、种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中培养。在适宜条件下，其群体就会有规律地生长，定时取样测定细胞含量，以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就可以画出一条有规律的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。 划分的依据：单细胞微生物。 (1)延滞期(停滞期、调整期) 特点：a.生长速率常数为零；b.细胞形态变大或增大；c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃；e.对外界不良条件的反应敏感。 (2) 对数期 特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，代时短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗

24、不良环境的能力强。稳定期 特点：a.生长速率常数为零；b.菌体产量达到最高；c.活菌数相对稳定；d.细胞开始贮存贮藏物；e.芽孢在这个时期形成；f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。 衰亡期 特点：a.细胞形态多样；b.出现细胞自溶现象；c.有次生代谢产物的形成；d.芽孢在此时释放。 3、延滞期有何特点？如何缩短延滞期？特点：a.生长速率常数为零；b.细胞形态变大或增大；c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃；e.对外界不良条件的反应敏感。消除：a. 以对数期的菌体作种子菌 ；b. 适当增大接种量 ：一般采用3%8%的接种量，根据生产上的具体情况而定，最高不超

25、过1/10。c. 培养基的成分：种子培养基尽量接近发酵培养基 。 4、指数期有何特点？处于该期的微生物有何应用？ 特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，代时短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。 应用：指数期的微生物是研究生理、代谢等的良好材料；是增殖噬菌体的最适菌龄；是发酵生产中用做种子的最佳种龄，通过补加营养物质延长指数期。5、稳定期为何会到来？有何特点？ 形成原因:a.营养物尤其是生长限制因子的耗尽；b.营养物的比例失调；c.有害代谢产物的积累；d.物化条件的变化。 特点:a.生长速率常数为零；b

26、.菌体产量达到最高；c.活菌数相对稳定；d.细胞开始贮存贮藏物；e.芽孢在这个时期形成；f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。4. 什么是连续培养？有何优点？连续培养：在微生物培养的过程中不断的供给新鲜的营养物质，同时排除含菌体及代谢物的发酵液，让 培养的微生物长时间的出于对数生长期，以利于微生物的增殖速度和代谢活动处于某种稳定状态 依据：微生物培养过程中不断补充营养物质和以同样的速度流出培养物5. 试比较恒化器和恒浊器连续培养的不同. 恒浊连续培养：根据培养器内微生物生长密度，并借助光电控制系统来控制培养液流速，以取得密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器。 恒化连续培养 ：使培养液流

27、速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率下进行生长繁殖。是通过控制某一种营养物的浓度，使其始终成为生长限制因子的条件下实现的。6. 根据微生物对温度的要求不同，可将微生物分为哪几类？低温型微生物、中温型微生物、高温型微生物7. 什么是最是温度和最适ph？ 最适温度：某种菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度 对同一种微生物来说，最适生长温度并非一切生理过程的最适温度，也就是说，最适温度并不等于生长得率最高时的培养温度，也不等于发酵速率或累积代谢产物最高的培养温度，更不等于累积某一代谢产物最高时的培养温度最适ph:某种菌分裂代时最短或生长速率最高时的ph8. 根据微生物对氧的需求不同可将

28、微生物分为哪几类？了解图示 专性好氧菌：需氧，在正常大气压下通过呼吸产能 以呼吸为主，兼营发酵产能 好氧菌 兼性厌氧菌 以呼吸为主，兼营厌氧呼吸产能 微好氧菌：需在微量氧（0.010.03巴）下生活 耐氧菌：不需氧，只以发酵产能，氧无毒害 厌氧菌 （专性）厌氧菌：氧有害或致死，以发酵或无氧呼吸产能9. 什么是灭菌、消毒？方法。灭菌（sterilization）：采用强烈的理化因素使物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。如高温。消毒（disinfection）：采用较温和的理化因素，杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌，而对被处理物体基本无害的措施。如75%酒精。比较项目灭

29、菌消毒防腐化疗处理因素强理、化因素理、化因素理、化因素化学治疗剂处理对象任何物体内外生物体表，酒，乳有机质物体内外宿主体内微生物类型一切微生物有关病原菌一切微生物有关病原菌对微生物作用彻底杀灭杀死或抑制抑制或杀死抑制或杀死实例加压蒸汽灭菌，辐射灭菌，化学杀菌剂70%酒精消毒，巴氏消毒法冷藏，干燥，糖渍，盐腌，缺氧，化学防腐剂抗生素，磺胺药，生物药物素10. 常用的消毒剂有哪些？11. 什么为抗代谢药物？碳胺类药物的作用机制是什么？抗代谢物：又称代谢拮抗物或代谢类似物，是指一类在化学结构上与细胞内必要代谢物的结构相似，并可干扰正常代谢活动的化学物质机制： 二氢蝶啶对氨基苯甲酸 二氢叶酸 四氢叶酸

30、 辅酶F磺胺药 核酸合成12. 什么是抗生素？微生物抗药性的原因有哪些？ 抗生素：是一类由微生物或其它生物生命活动过程中合成的次生代谢产物或其人工衍生物13.什么叫连续培养？指出连续培养的依据是什么。 连续培养：在微生物培养的过程中不断的供给新鲜的营养物质，同时排除含菌体及代谢物的发酵液，让 培养的微生物长时间的出于对数生长期，以利于微生物的增殖速度和代谢活动处于某种稳定状态 依据：微生物培养过程中不断补充营养物质和以同样的速度流出培养物第七章原核微生物与真核微生物各有哪些基因重组形式？并掌握其概念和了解一般过程转化：受体菌直接吸收供体菌的DNA片段，并把它整合到自己的基因组中，而获得部分新的

31、遗传性状的现象，称为转化。转导：通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体为媒介，把供体细胞的DNA片段携带到受体细胞中，通过交换与整合，从而使后者获得前者部分遗传性状的现象，称为转导。 接合：供体菌（“雄”）通过其性菌毛与受体菌（“雌”）相接触，将前者部分DNA传递给后者，通过交换、整合，从而使后者获得供体菌的遗传性状的现象.真核微生物的基因重组有性杂交(sexual hybridization)： 有性杂交指性细胞间的接合和随之发生的染色体重组，并产生新的遗传型后代的一种育种技术。 准性杂交(parasexual reproduction)：有一类不产生有性孢子的丝状真菌，不经过减数裂就能导致低频率基因

32、重组并产生重组子生殖过程称为准性生殖。 1. 什么是基因工程？有哪些基本操作步骤？ 基因工程：利用分子生物学的理论与技术，设计、改造和重建基因组，使生物体出现新表型的技术。步骤：获得目的基因选择基因载体体外重组外源基因导入受体细胞筛选和鉴定应用2. 什么叫菌种衰退？如何区别衰退和杂菌污染？菌种衰退:生产菌株生产性状的劣化或遗传研究菌株遗传标记的丢失称为菌种衰退。 原因: 1、自发突变2、通过诱变获得的高产菌株本身不纯3、培养、保藏条件 1、自发突变 菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。2、通过诱变获得的高产菌株本身不纯高产突变只发生在一个核上，随着核的分离，原来未变异的低产性状逐渐恢复。单核

33、微生物由于高产突变只发生在一条DNA链上，也往往发生分离回复的现象。3、培养、保藏条件可以通过对自发突变率的影响来表现，也可在不改变基因现的情况下表。3. 何谓菌种复壮，如何复壮？（1）从衰退的菌种群体中把少数个体再找出来，重新获得具有原有典型性状的菌种。（a）纯种分离；（b）通过寄主体进行复壮；（2）有意识地利用微生物会发生自发突变的特性，在日常的菌种维护工作中不断筛选“正变”个体。4. 简述菌种保藏的原理及常用保藏方法？原理：人为地创造合适的环境条件，使微生物的代谢处于不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。方法：斜面保藏法菌种管置4冰箱保藏，定时传代 石蜡油封藏法：橡皮塞取代棉塞、加石蜡油。沙

34、土管保藏法将菌种置于土壤、细纱干燥材料上保藏。适用于放线菌、芽孢菌和某些真菌保藏，保藏时间几至几十年。真空冷冻干燥法加有保护剂的菌悬液在冻结状态下予以真空干燥。第八章1. 决定传染结局的三因素是什么？病原体、宿主的免疫力、环境的因素2. 外毒素与内毒素有何不同？3. 什么是免疫、类毒素？免疫：经典的概念是指机体免除传染性疾病的能力。现代免疫概念认为，免疫是机体识别和排除抗原性异物的一种保护性功能，在正常条件下，它对机体有利，在异常情况下，也可损害机体。类毒素（toxoid）：用0.3-0.4%甲醛处理，使其毒性完全丧失，但仍保持抗原性的外毒素，常用来预防注射。4. 什么是干扰素？其作用机制是什

35、么？由干扰素诱导剂作用于活细胞后，产生的一种具有高活性、广谱抗病毒等功能的糖蛋白。这种蛋白质再作用于其他细胞时，使其他细胞获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的免疫力。5. 什么是抗原？有何特性？决定抗原的因素有哪些？抗原：抗原是一类能刺激人或动物产生抗体或致敏淋巴细胞，并能与这些产物在体内或体外发生特异性反应的物质。条件：异物性：指抗原的理化性质与其所刺激的机体的自身物质间的差异程度。具有一定的化学组成与结构的大分子物质；特异性由抗原决定簇决定。 抗原的特性： 免疫原性或抗原性 免疫反应性或反应原性因素：相对分子质量大、分子结构复杂、异物性抗原特异性由抗原决定簇来决定6. 什么是抗体？分几类？各有何特

36、性？抗体：抗体是高等动物体在抗原物质的刺激下，由浆细胞所产生的一类能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。免疫球蛋白的种类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgEIgG:人体内主要的抗传染抗体，也是唯一通过胎盘的抗体，对新生儿抗感染起重要作用。IgM:可激活补体，在有补体系统参与下可破坏肿瘤细胞，有调节浆细胞产生抗体的作用。IgA:局抗感染，是血液中和粘膜分泌物中的抗体，对保护呼吸道和消化道粘膜起重要作用。可从初乳中获得。IgD:在识别抗原激发B细胞和调节免疫应答中起重要作用。IgE:能与人组织中的肥大细胞和血流中的嗜碱性粒细胞结合，当特异性抗原再次进入人体后，结合在细胞上的IgE又能与抗原结

37、合，促使细胞脱颗粒，释放组织胺，引起超敏反应。7. 抗体与抗原反应的一般规律是什么？特异性可逆性定比性阶段性条件依赖性8. 什么是补体？有何特性？补体：补体是存在于正常人体或动物血清中的一组非特异性血清蛋白，主要是球蛋白，是一类能被任何抗原与抗体的复合物所激活的原。 功能：溶解细胞膜杀灭病毒促进吞噬细胞的吞噬释放组胺等9. 什么是补体结合试验？其基本原理是什么？补体结合试验(complement fixation,CFT)：是一种有补体参与，并以绵羊红细胞和溶血素是否发生溶血反应作指示的一种高灵敏度的抗原与抗体反应。其中共有2个系统和5种成分参与反应。10. 什么是单克隆抗体？生物制品、疫苗。

38、单克隆抗体：由一纯系B淋巴细胞克隆经分化、增殖后的浆细胞所产生的单一成分、单一特异性的免疫球蛋白分子。生物制品（biologics)：在人工免疫中，可作为预防、治疗和诊断用的来自生物体的各种制剂。疫苗（vaccine):由病原微生物本身加工制成的，用于预防传染病的抗原制剂。设计从土壤中分离产抗生素放线菌的方案 11.什么叫石炭酸系数？ 指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率12.什么是鉴别性培养基？试以EMB培养基为例，分析其鉴别作用的原理。 鉴别性培养基：培养基中加入能于某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相

39、似的它种菌落相区分的培养基就称鉴别性培养基。 EMB作用原理 其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。在低酸度时，这两种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。因此试样中的多种肠道细菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落，因而易于辨认。尤其是大肠杆菌，因其强烈分解乳搪而产生大量的混合酸，菌体带H+故可染上酸性染料伊红，又因伊红与美蓝结合，所以菌落染上深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光：13.检验饮用水的质量时，为什么要选用大肠菌群数作为主要指标？我国卫生部门对此有何规定？1)由水传播的最重要的传染病是痢疾、霍乱和伤寒，它们都是肠道传染病

40、。肠道病原菌都是通过粪便污染水源而传播的，因此防治饮用水传染病的关键是要严防水源被粪便污染。2)水中存在病原菌可能性很小，直接检测困难，因此需要选择一种指示菌作为卫生指标； 生理习性与肠道病原菌类似， 即在外界的生存时间基本一致；（代表性）3)作为卫生指标的指示细菌必须符合： 在粪便中的数量比病原菌多， 不 会漏检；（灵敏性） 检验技术较简单;（操作方便）4) 比较理想的指示菌是大肠杆菌；但大肠杆菌的检测容易受一些形态和理化特性相似的细菌的干扰；选择大肠菌群（coliform)作为指示菌。我国卫生部门对饮用水的卫生标准为：每ml水细菌总数不超过100个，大肠菌群数每升水不超过3个。 14.三个证明DNA是遗传物质的经典实验经典转化实验噬菌体感染实验植物病毒重建实验