RT-PCR引物设计及注意事项.ppt

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第四讲 RT-PCR引物设计 及注意事项,一、步骤 1.查找目的基因序列,目的序列的选择,TNFalpha用全称,小鼠的TNFalpha序列,大鼠的TNFalpha序列,一、步骤 2.在线设计引物,一、步骤 3.在线验证引物,二、注意事项 1. 找对靶序列(要cDNA，不要gDNA) 2. 引物的位置(5调控区、阅读框、3调控区) 3. 目的片段的长度(定量100-300，定性300-500bp) 4. 注意剪接异构体(P63为例),谢谢！,