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1、-机能实验设计（一）课题名称：新斯的明对筒箭毒和琥珀胆碱肌松作用的影响（二）选题目的和思路1、实验目的 通过观察新斯的明如何影响筒箭毒和琥珀胆碱对蟾蜍离体腹直肌的肌松作用，分析药物相互作用机制。2、设计思路乙酰胆碱可以激动骨骼肌上的N2胆碱受体，是骨骼肌收缩；筒箭毒为非去极化型N2胆碱受体阻断剂，通过与乙酰胆碱竞争骨骼肌N2胆碱受体，而引起肌松作用。琥珀酰胆碱为去极化型N2胆碱受体阻断剂，产生与乙酰胆碱相似的去极化作用，但不易被胆碱酯酶水解，妨碍了复极化，而引起肌松作用。新斯的明主要可抑制乙酰胆碱酯酶的活性，减少乙酰胆碱的破坏，使乙酰胆碱积累，与非去极化肌松药在神经肌肉接头处竞争受体，从而恢复
2、正常的神经肌肉传递。新斯的明的抗胆碱酶活性使琥珀碱胆碱更难水解，加重其肌松作用。本实验通过新斯的明和琥珀酰胆碱，新斯的明和筒箭毒同时作用于蟾蜍腹直肌而产生的抗肌松作用，探究新斯的明对筒箭毒，琥珀酰胆碱的肌松作用的影响。 （三）实验动物 生长状况，体型相当的蟾蜍60只（来自动物房）（四）实验材料1、试剂（由医学院实验室提供）10-3氯乙酰胆碱溶液，10-3氯化琥珀酰胆碱溶液，2X10-4氯化筒箭毒碱溶液，任氏液，O2。 2、器材（由医学院实验室提供）生物信号处理系统，张力换能器，蛙类手术器械，蛙板，蛙钉，麦氏浴槽，铁支架，双凹夹，培养皿，烧杯，丝线，注射器，滴管等。（五）观察指标蟾蜍腹直肌的活动
3、曲线。（六）实验步骤与方法1、动物处理将60只蟾蜍随机分为6组，为甲A，甲B，甲C，乙A，乙B，乙C。每组10只。2、实验操作对组蟾蜍分别制备离体腹直肌标本。实验装置将张力换能器与生物信号处理系统相连，并通过双凹夹固定在铁支架上，麦氏浴槽内加入常温任氏液。仪器准备生物信号处理系统：信号选择：张力；控制：增益、纸速；滤波：。标本连接将张力换能器一段连接离体腹直肌标本，另一端与通氧气钩连接，使其置于常温任氏液麦氏浴槽内，打开氧气，调整气流使其不影响标本。腹直肌标本的前负荷为左右。给药顺序（） 稳定描记一段正常曲线。加入氯乙酰胆碱溶液，观察腹直肌的曲线，作用明显后立即用任氏液换洗次，待基线稳定。（）
4、 甲组分别加入任氏液，甲组加入氯化琥珀酰胆碱、任氏液，甲组分别加入氯化琥珀酰胆碱、新斯的明。观察腹直肌的活动曲线，作用明显后，记录各组肌张力。（） 乙组分别加入任氏液，乙组加入筒箭毒、任氏液，乙组分别加入筒箭毒、新斯的明。观察腹直肌的活动曲线，作用明显后，记录各组肌张力。（七）实验记录 加入药品后分别记录每组离体腹直肌标本的肌张力。实验记录列表如下：序号号号组12345678910甲A甲B甲C乙A乙B乙C（八）实验数据处理分别计算甲A，甲B，甲C，乙A，乙B，乙C，六组数据的平均数，标准差，标准误。用方差分析的方法分别处理甲B、甲C和甲A，乙B、乙C和乙A数据差异有无统计学意义。从而验证新斯的
5、明对筒箭毒和琥珀碱胆碱肌松作用有无影响。（九）实验注意事项1腹直肌标本对药物的敏感性有个体差异，蟾蜍腹直肌对药物较不敏感，因此给药量可以根据实际情况酌情增减。2.悬挂腹直肌时，相连的线必须垂直。3.加药时不要将药液滴在连线和麦氏浴槽壁上，应直接滴在液面上。4.每支注射器只能用来抽取一种药物，不要相互混淆。5.实验中不能随便改变仪器设置参数及标本的负荷量。6.腹直肌在加药前无自发的节律性收缩。（十）实验结果预期新斯的明可使筒箭毒对腹直肌的肌松作用减弱，其对筒箭毒的肌松作用有拮抗作用。新斯的明对琥珀酰胆碱的肌松作用无显著影响。（十一）实验结果讨论 1.筒箭毒碱能与Ach竞争神经肌肉接头的N胆碱受体
6、，但不激动受体，能竞争性阻断Ach的除极化作用，使骨骼肌松弛。新斯的明可通过抑制胆碱酯酶使Ach聚集，与筒箭毒竞争受体，产生拮抗肌松的作用。2.琥珀酰胆碱的分子结构与Ach相似，能与神经肌肉接头后膜的胆碱受体有较强的亲和力，且在神经肌肉接头处不易被胆碱酯酶分解，因而产生与Ach相似但持久的除极化作用，使神经肌肉接头的N胆碱受体不能对Ach起反应，此时神经肌肉接头的阻滞方式已由除极化转变为非除极化，从而使骨骼肌松弛。新斯的明拮抗胆碱酯酶活性，使琥珀酰胆碱更难水解，加重其肌松作用。（十二）参考文献1、杨宝峰. 药理学M. 人民卫生出版社，第七版 2、刘俊田. 药理学M. 郑州大学出版社3 、林志斌 金有豫. 药理学M. 世界图书出版公司4 、李德复 李永春. 临床药物手册M. 人民卫生出版社 第十版 5、罗建仲. 临床合理用药M. 重庆出版社 -第 5 页-