分子生物学章节习题(17页).doc

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1、- 20分名词解释 53分 英+汉简答题 35分论述题 1(2)10( + )分A 细胞与大分子1 分泌蛋白的糖基化作用发生在( C )A线粒体 B过氧化物酶体 C内质网 D核2 以下哪一个是核蛋白( B )A角蛋白 B染色质 C组蛋白 D蛋白聚糖3以下哪一个不是多糖( D )A几丁质 B支链淀粉 C黏多糖 D甘油4 跨膜蛋白( B ) A将两个脂双层连接一起 B有胞内和胞外结构域 C完全包埋在膜内 D很容易从膜上去除下来5 名词解释:微体、核蛋白。微体(microbody或cytosome)是一些由单层膜包围的小体。它的大小、形状与溶酶体相似,二者区别在于含有不同的酶。微体内含有氧化酶和过氧

2、化氢酶类。在植物细胞里,还存在另一种过氧化物酶体,进行乙醛酸循环,称为乙醛酸循环体。根据微体内含有的酶的不同可以将微体分为溶酶体、过氧化物酶体和乙醛酸循环体。核蛋白(nuclear protein)是指在细胞质内合成,然后运输到核内起作用的一类蛋白质,由核酸与蛋白质组成。如核糖体、染色质。病毒也是一种核蛋白复合体。6 简答:真核与原核生物核糖体的主要区别?原核生物的核糖体较小,沉降系数为70S,相对分子质量为2.5MDa,由50S(23S rRNA、5S rRNA和31种蛋白质)和30S(16S rRNA和21种蛋白质)两个亚基组成;而真核生物的核糖体体积较大,沉降系数是80S,相对分子质量为

3、3.94.5MDa,由60S(28S rRNA、5.8S rRNA、多种5S rRNA和约33种蛋白质)和40S(18S rRNA和约49种蛋白质)两个亚基组成。典型的原核生物大肠杆菌核糖体是由一个50S大亚基和一个30S小亚基组成的。B 蛋白质结构1 以下哪一个是亚氨基酸( A ) A 脯氨酸 B 羟赖氨酸 C 色氨酸 D 组氨酸2 以下哪一个不是蛋白质的二级结构( C ) A -螺旋 B 三股螺旋 C 双螺旋 D -折叠片3 在等电聚焦电泳中蛋白质按( A )分离 A pH梯度 B 盐梯度 C 密度梯度 D 温度梯度4 Edman降解法( D )对多肽进行测序 A 用一段cDNA测序 B

4、按照质量 C 从C端到N端 D 从N端到C端5 名词解释:抗原决定部位或表位抗原表位(antigenic determinant,AD)是决定抗原性的特殊化学基团,是由58个氨基酸组成的短序列。大多存在于抗原物质的表面,有些存在于抗原物质的内部,须经酶或其他方式处理后才暴露出来。6 简述蛋白质的功能蛋白质具有广泛的功能: 酶可催化绝大多数生化反应,底物的结合取决于特异的非共价相互作用; 当与配体结合时,膜受体蛋白将信号传入细胞内部; 转运和储存,如血红蛋白在血液中转运氧、铁蛋白在肝脏内储存铁; 胶原和角蛋白是重要的结构蛋白,肌动蛋白和肌球蛋白构成有收缩力的肌肉纤维; 酪蛋白和卵清蛋白是为生长提

5、供氨基酸的营养蛋白; 免疫系统依赖抗体蛋白抵御感染; 调节蛋白(如转录因子)具有结合并调节其他分子(如DNA)的功能。7 在蛋白质的四级结构中,维持空间构象稳定的力都有哪些?蛋白质的四级结构(Quaternary structure)是具有三级结构的各条多肽链之间,相互作用所形成的,更为复杂的聚合物的一种结构形式,主要描述蛋白质亚基空间排列,以及亚基之间的连接和相互作用,不涉及亚基内部结构。蛋白质亚基之间主要通过疏水作用、氢键、离子键等作用力形成四级结构,其中最主要的是疏水作用。C 核酸的性质1 DNA中的一段5-AGTCTGACT-3序列等同于RNA中的哪一片段?( A ) A 5-AGUC

6、UGACU-3 B 5-UGTCTGUTC-3 C 5-UCAGUCGUA-3 D 5-AGUCAGACU-32 以下哪一个是对A-DNA的正确描述( C ) A是右手反向平行双螺旋,每圈10个碱基,碱基平面与螺旋轴垂直。 B是左手反向平行双螺旋,每圈12个碱基,有交替的嘌呤-嘧啶序列形成。 C是右手反向平行双螺旋,每圈11个碱基,碱基的朝向与螺旋轴有关。 D是球状结构,由单链核酸中形成的短的分子内螺旋构成。3双链DNA变性涉及( B ) A断裂为短的双链片段 B 分开成为单链C DNA骨架分解 D 碱基从戊糖-磷酸骨架上分离下来4 以下哪一个在260 nm波长下具有最大单位质量吸收( B )

7、 A 双链DNA B单核苷酸 C RNA D 蛋白质5 型DNA拓扑异构酶( C ) A 使连接数改变2 B 需要TAP C 将DNA双螺旋中的一条链打断 D 是抗生素类药物的靶向6 简述DNA的A、B、Z型双螺旋结构特点。一般将沃森和克里克提出的双螺旋构型称为B-DNA。B-DNA是DNA在生理状态下的构型。活细胞中极大多数DNA以B-DNA形式存在。但当外界环境条件发生变化时,DNA的构型也会发生变化。当DNA在低温条件下,则以A-DNA形式存在。A-DNA是DNA的脱水构型,它也是右手螺旋。A-DNA比较宽而紧密,大沟深而窄,小沟宽而浅。在体内DNA并不以A构型存在,但细胞内DNA-RN

8、A或RNA-RNA双螺旋结构,却与A-DNA非常相似。还有某些DNA序列可以以左手螺旋的形式存在,称为Z-DNA。当某些DNA序列富含G-C,并且在嘌呤和嘧啶交替出现时,可形成Z-DNA。但Z-DNA不是体内DNA的主要形式。A-DNA、B-DNA和Z-DNA的主要结构特点A-DNAB-DNAZ-DNA螺旋方向右手右手左手直径约2.6nm约2.0nm约1.8nm每一转的碱基对数111012(6个二聚体)每对碱基旋转角度333660(每个二聚体)每对碱基沿螺旋轴上升的距离0.26nm0.34nm0.37nm螺距2.8nm3.4nm4.5nm碱基对相对中心轴的倾斜角度2067大沟窄,深宽,深平坦小

9、沟宽,浅窄,深窄,深糖苷键antiantianti (嘧啶)syn (嘌呤)7 RAN 同DNA相比为何极不稳定?因为RNA是单链结构,而DNA是双链双螺旋结构,有氢键存在,分子内作用力较强,所以更稳定。其次RNA不稳定的主要原因是细胞及外界环境中有很多RNA酶,RNA极容易被降解掉。D 原核与真核生物的染色体结构1 以下哪一个是大肠杆菌和真核生物染色体的共同之处( D ) A DNA是环状的 B DNA被包装成核小体 C DNA位于核中 D DNA是负超螺旋 2 由166bpDNA组蛋白八聚体和组蛋白H1组成的复合体叫做( D ) A 核小体核心 B 螺线管 C 30nm纤维 D 核小体3分

10、裂间期染色体转录发生在什么区域( C ) A 端粒 B 着丝粒 C 常染色质 D 异染色质4 以下关于CpG岛和甲基化的陈述那个是错误的( A ) A CpG岛对DNase有部分抗性 B CpG甲基化是真核生物对CpG突变为TpG的反应 C CpG岛出现在活性基因启动子附近 D CpG甲基化伴随着染色质失活5 以下哪个是高度重复DNA ( C ) A Alu元件 B 组蛋白基因库 C DNA微卫星 D 散在重复DNA 6 名词解释:端粒、卫星DNA、RNA编辑、持家基因、染色小体、核小体核心颗粒。端粒:是形成真核生物线性DNA分子末端的特化的序列,由数以百计的短重复序列构成,这些序列是端粒酶以

11、独立于正常DNA复制的机制合成的。它能保护染色体末端免遭降解。卫星DNA:是一类高度重复序列DNA离心后,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看到在一条主带以外还有一个或多个小的卫星带。这些在卫星带中的DNA即被称为卫星DNA。真核生物基因组中高度重复DNA由一些2bp至2030bp的极短序列,以数千个拷贝的串联方式排列。RNA编辑:指在mRNA水平上改变遗传信息的过程。具体说来,指基因转录产生的mRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置换,基因转录物的序列不与基因编码序列互补,使翻译生成的蛋白质的氨基酸组成,不同于基因序列中的编码信息的现象。持家基因:又称管家基因,是指

12、所有细胞中均要表达的一类基因,其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的,它是一类始终保持着低水平的甲基化并且一直处于活性转录状态的基因。染色小体:当核小体核心颗粒上有H1组蛋白结合时,用微球菌核酸酶酶解分离出的DNA片段为166bp,由这个166bp的DNA绕在组蛋白八聚体外面形成两圈超螺旋,并由H1分子在进口处将DNA“锁定”,这样的结构称之为染色小体。核小体核心颗粒加上一个H1分子构成染色小体。核小体核心颗粒:由长度为146bp的DNA区段与各两分子的H2A、H2B、H3和H4组蛋白八聚体组成。7 原核生物与真核生物基因表达主要区别?原核生物真核生物RNA聚合酶RNA聚合酶IRNA聚合酶启动

13、子有有终止子有无前mRNA无有编码蛋白质单/多顺反子单顺反子mRNA两端5端磷酸 3端羟基5甲基帽 3polyA尾RBS有无转录、翻译同时进行在核内转录,胞质内翻译E DNA复制1一个典型的哺乳动物细胞中复制子的数目是( D ) A 40200 B 400 C 10002000 D 500001000002 原核生物中,后随链的引物是被( C )清除的。 A 3-5外切核酸酶 B DNA连接酶 C DNA聚合酶 D DNA聚合酶3 在大肠杆菌复制起始点处的基本起始蛋白是( A ) A DnaA B DnaB C DnaC D DnaE4 如果细胞在R点前缺乏有丝分裂剂,它将进入( D )期 A

14、 G1 B S C G2 D G05 以下哪一个陈述是正确的( A ) A一旦细胞与越过R点,细胞分裂就不可避免 B G1细胞周期蛋白-CDK复合体对Rb的磷酸化是进入S期的关键 C G1细胞周期蛋白-CDK复合体对E2F的磷酸化是进入S期的关键 D 细胞周期蛋白D1和INK4 p16是肿瘤抑制蛋白6 在真核生物中,常染色体优先在( A )复制 A S期早期 B S期中期 C S期晚期 D G 2期7 原核生物的质粒如果含有酵母的( C )就可以在酵母细胞中复制 A ORC B CDR C ARS D RNA8简述原核生物的DNA复制过程。起 始 复制是通过起始的速率来调控的。E.coli的起

15、始位点位于遗传基因座oriC,并与细胞膜相连。oriC包含4个9bp的起始因子DnaA蛋白的结合位点。当DnaB蛋白达到足够量,即形成由3040个分子构成的复合体,每一个分子结合1分子ATP,在其周围的oriC DNA呈缠绕形。该过程需要DNA形成负超螺旋。负超螺旋有助于3个13bp长的富含AT的重复序列的解链,结果有利于DnaB蛋白的结合。DnaB是DNA解旋酶,利用ATP水解的能量结合并解开双链DNA(或RNA),产生的单链泡被单链结合蛋白(SSB)所覆盖,以防止发生断裂及重新复性。DNA引发酶结合到DNA上并合成一段短的RNA引物,从而引发第一个复制叉的先导链的复制,接下来是双向复制。解

16、 旋 亲本链DNA被DNA解旋酶及单链结合蛋白作用而解旋,产生的正超螺旋对于复制叉的不断前进不足,于是被型拓扑异构酶,即DNA旋转酶作用引入负超螺旋而得到不断释放。延 伸 随着新形成的复制叉替代亲本链的后随链,1个包含DnaB解旋酶和DNA引物酶的引发体在后随链上合成多个RNA引物,DNA聚合酶全酶的二聚体延伸前导链及后随链,亚基聚合DNA,亚基校正新生DNA分子,亚基将聚合酶结合于DNA。在每一个单体中的其余亚基各不相同,以保证全酶分别在先导链上和后随链上合成长的或短的DNA片段。一旦后随链的引物被DNA聚合酶延伸,会由DNA聚合酶I的5-3外切核酸酶活性切去,同时用DNA填补缺口,然后DN

17、A连接酶将后随链上的片段连成一体。终止和分离 E.coli的两个复制叉在与复制起始点成180的复制终点相遇,相互连锁的子链在DNA拓扑异构酶(一种型DNA拓扑异构酶)的作用下相分离。9 名词解释:特许因子。特许因子:DNA复制起始所必须的,并在作用后失活的特定蛋白,只有在有丝分裂期核膜解体时才能进入核内,防止了复制完成前的再次起始。F DNA损伤、修复与重组1 异常重组又被称为( B ) A 位点特异性重组 B 转座 C 同源重组 D 转移损伤DNA合成2 在患有( C )的个体中缺乏对紫外线诱导DNA损伤的切除修复A 患遗传型结肠癌B Crohn氏症C 典型的DNA修复酶缺乏病D DNA修复

18、酶缺乏病的变型3 名词解释:异常重组。异常重组(转座作用):完全不依赖于序列间的同源性,而使一段较短的DNA序列(如转座子或转座元件)转移进细胞基因组的几乎任何位置,但在形成重组分子时往往是依赖于DNA复制而完成重组的过程。G 基因操作1 细菌培养物中某种质粒的存在通常用( B )来确定 A 蓝白颜色筛选 B 在抗生素存在下生长 C 一种限制酶降解 D 琼脂凝胶电泳2 碱性磷酸酶( D ) A将双联DNA片段连接起来 B 在DNA的5端加上一个磷酸基团 C 切断双联DNA D 从DNA的5端脱去一个磷酸基团3 转化是( A ) A 细菌吸收一个质粒 B 细菌表达一个基团 C 细菌吸收一个噬菌体

19、 D 从细菌中分离一个质粒4 T4 DNA连接酶( A ) A需要ATP B将具有相邻3-磷酸和5-羟基的双链DNA片段连接 C需要NADH D将单链DNA连接起来5 在琼脂糖凝胶电泳中( D ) A DNA向负极移动 B超螺旋质粒泳动的比其带切口的异构体慢 C 大分子比小分子泳动快 D溴化乙锭被用来显色DNA6 名词解释:黏末端、亚克隆、回文序列、单克隆、cDNA文库黏末端:含有单链末端的限制性内切核酸酶酶解产物被称为黏末端,具有突出末端,其特性在于它们可通过单链末端的碱基配对,与其他任何具有相同突出序列的末端结合。亚克隆:将已克隆的DNA片段从一载体向另一载体的转移的过程。回文序列:双链D

20、NA中的一段倒置重复序列,当该序列的双链被打开后,可形成发夹结构,这段序列被称为回文序列。单克隆:带有重组DNA的宿主细胞的增殖构成了一群具有遗传一致性的个体,称为单克隆。cDNA文库:以mRNA为模板,经反转录酶催化,在体外反转录成cDNA,与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体)连接后转化受体菌,则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增,这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合,称为该细胞的cDNA文库。7 作为载体所具有的三大特点? 具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点,能够在宿主细胞中独立复制,并稳定地保存; 具有多种单一的限制酶切位点; 具有合适的选择性标记,分子量小,以

21、提高其装载能力。H 克隆载体1 蓝白筛选被用于( D ) A 检测细菌中某一质粒的存在 B 提示一个克隆化DNA片段的性质 C 表示一个克隆化基因 D 检测质粒中某一插入片段的存在2 多克隆位点( B ) A 含有许多拷贝的克隆化基因 B 是对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性 C 是对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性 D 含有许多拷贝的同一种限制酶切位点3 噬菌体对大肠杆菌的感染一般用( C )检测 A 细菌对某种抗生素的抗性 B 单菌落在琼脂平板上的生长 C 琼脂平板上产生裂解细菌区域 D 细菌DNA的限制性消化4 哪一个载体适用于150kbDNA片段的克隆( C ) A 质粒 B 噬菌体

22、 C BAC D YAC5 要在植物中表达一个外源基因,应该选用哪个载体( D ) A杆状病毒载体 B 反转录病毒载体 C Yep载体 D T-DNA载体6 名词解释:cos位点cos位点:当噬菌体DNA进入细菌细胞后,便迅速通过黏性末端配对形成双链环状的DNA分子,这种黏性末端结合形成双链的区域称为cos位点。7 质粒、噬菌体、黏粒、BAC、YAC载体最大可分别容纳多大DNA片段?优缺点各是什么?载体插入的片段大小上限(kb)优点缺点质粒10具有合适的选择性标记,分子量小,并稳定地保存可能在DNA的纯化过程中发生链的断裂噬菌体23无需体外包装,转染的效率比质粒的转化效率高,可通过溶原反应整合

23、到宿主基因组包装过程复杂,效率不稳定,用途没有质粒广泛黏粒45包含质粒的复制起点、选择性标记以及噬菌体cos位点,在氨苄青霉素的选择压力下扩增噬菌体颗粒包装过程复杂,效率不稳定BAC载体350稳定、容易转化、在大肠杆菌宿主中生长迅速、应用标准质粒小量制备技术拷贝数小,制备难度大YAC载体1000对巨大基因组的大规模结构进行作图时很有效克隆的片段在增殖中会丢失部分DNAI 基因文库与筛选1 以下关于基因组文库陈述哪两个是错误的( A E ) A 基因组文库是用cDNA制备的 B 包括某种生物所有基因的基因组文库,必定是代表性文库 C 若要含有某种生物的所有基因,基因子文库就必须含有最少的重组子

24、D DNA必须先被切成适合用于所用的载体的大小 E 真核生物DNA的基因组文库通常用质粒载体2 以下对cDNA克隆步骤的描述哪一个是正确的( A ) A mRNA的反转录,第二链合成,cDNA末端修饰,连接到载体上 B mRNA制备,用反转录酶合成cDNA,用末端转移酶合成第二链,连接到载体上 C 用RNA聚合酶合成mRNA,mRNA的反转录,第二链合成,连接到质粒上 D 双链cDNA合成,限制酶消化,加接头,连接到载体上3 以下哪一种方法对于筛选文库是无效的( D ) A 用核酸探针对菌落和(或)噬菌体溶出的DNA进行杂交 B 用目标蛋白的抗体筛选表达文库 C 从其生物活性的表达文库中筛选克

25、隆 D 用抗体作探针对菌落和(或)噬菌体溶出的DNA进行杂交4 什么是基因组文库?一个生物体的基因组DNA用限制性内切酶部分酶切后,将酶切片段插入到载体DNA分子中,所有这些插入了基因组DNA片段的载体分子的集合体,将包含这个生物体的整个基因组,也就是构成了这个生物体的基因组文库。5 简述菌落及噬菌斑杂交原理。把基因组中含有特定碱基序列的噬菌体,通过与RNA或DNA杂交,再从多数噬菌体的噬菌斑中选出的方法。将在琼脂培养基上形成的噬菌体的噬菌斑,拓印移于硝酸纤维素滤纸上,再用碱处理将噬菌体粒子破坏使DNA变性,然后使之固定于硝酸纤维素滤纸上,再与用放射性同位素标记的特定的RNA或DNA片段进行杂

26、交,通过放射自显影法来识别含有所需DNA序列的噬菌体的噬菌斑,然后根据其在硝酸纤维素滤纸上的位置,从原来的琼脂培养基对应位置处中选出与其对应的噬菌斑。包括转移,结合,杂交,检测,鉴别。J 克隆DNA的分析与应用1一个线性DNA片段的一端被100%标记且有3个EcoRI位点,如果该片段被EcoRI部分消化并得到所有可能产生的片段,将会有多少片段被标记,多少片段未被标记?( A ) A 4, 6 B 4, 4 C 3, 5 D 3, 3酶切片段:被标记:A AB ABC ABCD;未被标记:B BC BCD C CD D2以下关于PCR的陈述哪一个是错误的?( D ) A PCR循环包括模板变性,

27、引物退火和核苷酸聚合 B PCR要用热稳定的DNA聚合物 C 理想的PCR引物要长度和G+C含量都相似 D PCR条件的优化通常包括镁离子浓度的变化和聚合温度的变化 E 如果PCR的效率达到100%,那么在n个循环之后目标分子将被扩增2n倍3以下关于基因作图技术的陈述哪两个是正确的( C D ) A S1核酸酶作图法确定的是基因中的非转录区 B 引物延伸法确定的是基因中的非转录区 C 凝胶阻滞法可以显示蛋白能否与某一DNA片段结合并阻滞该片段通过琼脂糖凝胶的迁移 D DNaseI足迹法确定蛋白结合到某一DNA片段中的哪一个区域 E 基因启动子中DNA序列的功能可以通过将其连接到报道基因下游并分

28、析其表达来确定4关于诱变技术的陈述哪一个是错误的( A ) A 外切酶将DNA的一条链从5凹端按5-3方向切除 B 外切酶将DNA的一条链从3凹端按3-5方向切除 C 在PCR中可以用诱变引物来引入碱基变化 D 可以用诱变引物、单链模板和DNA聚合酶来引入碱基变化 E 可用限制酶产生缺失突变5关于基因克隆的陈述哪一个是错误的( B ) A 可以用克隆来大量表达重组蛋白 B DNA足迹法被用于检测与DNA结合的蛋白 C 被克隆的基因可被用于检测致病基因的携带者 D 基因治疗是通过将正确的基因导入病人体内以纠正原有的错误 E 遗传修饰生物已被用来生产临床上有重要用途的蛋白6 简述PCR原理、特点P

29、CR的基本原理是以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板序列的两端相互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成,不断重复这一过程,即可使目的DNA片段得到扩增。因为新合成的DNA也可以作为模板,因而PCR可使DNA的合成量呈指数增长。包括变性,引物退火,延伸三步。特点:灵活,时间短,高效,专一性强。灵敏度高,简便,纯度要求低。7 简述几种PCR派生技术复合PCR:PCR可用于扩增同一反应中多个DNA片段,用多套引物。反向PCR:先用限制性内切酶消化DNA,然后用连接酶连接环化,一对背对背的引物可用于从已知序列区域扩增该圆环以获

30、得5到3侧翼区直到连接的限制位点。cDNA末端快速扩增:RACE(rapid-amplification of cDNA ends)是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段,通过往两端延伸扩增从而获得完整的3端和5端。PCR诱变:将特异突变引入到一特定DNA片段中。定量PCR:在扩增前的样品中加入已知数量的相似DNA片段,如含有短的缺失的DNA片段,两种产物的比例取决于加入的缺失片段数量,并可算出目标分子的数量。不对称PCR:只有一条链被扩增。K 原核生物的转录1以下关于转录的陈述哪两个是正确的( B D ) A RNA合成按3-5方向进行的 B RNA聚合酶按5-3方向沿DNA有义链移

31、动 C RNA聚合酶按5-3方向沿DNA模板链移动 D转录所得到的RNA与模板链互补 E RNA聚合酶将核苷酸添加到正在生成的RNA链的5端 F RNA聚合酶将脱氧核苷酸添加到正在生成的RNA链的5端2以下关于大肠杆菌RNA聚合酶的陈述哪一个是错误的( B ) A 全酶包括因子 B 核心酶包括因子 C 需要Mg2+才有活性 D 需要Zn2+才有活性3以下哪个陈述是不正确的( C ) A大肠杆菌RNA聚合酶有两个亚基 B大肠杆菌RNA聚合酶有一个亚基 C大肠杆菌有一个因子 D大肠杆菌RNA聚合酶亚基被利福平抑制 E利迪链菌素可抑制转录延伸 F发夹结构是聚阴离子,它可与亚基结合4以下关于大肠杆菌转

32、录的陈述哪一个是正确的?( E ) A -10序列通常正好位于转录其实点上游10bp处 B 起始核苷酸通常是G C -35和-10序列间的间隔序列是保守的 D 转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 E -35和-10序列的距离对于转录效率非常重要5以下关于大肠杆菌转录的陈述哪一个是正确的?( B ) A RNA聚合酶的核心酶与DNA的结合是非特异,不稳定的 B 因子大大提高了聚合酶对正确启动子位点的亲和力 C 几乎所有RNA起始位点都由一个嘌呤残基组成,而且A比G出现的频率高 D 所有启动子都被负超螺旋所抑制 E 终止子通常是A-U发夹结构6名词解释:有义链、反义链、闭合复合物、开放复合物有

33、义链(编码链):两条DNA链中有一条无转录功能的链,称为有义链。DNA双链在转录过程中与转录形成的mRNA序列相同(T对应U)的那条单链叫做有义链。反义链(模板链):基因的DNA双链中,转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链。闭合复合物:聚合酶与处于碱基配对状态的启动子DNA所形成的最初的复合物。开放复合物:DNA的初始解旋导致DNA与聚合酶形成开放复合物。7举例说明原核生物的转录过程。转录是指以双链DNA为模板合成单链RNA。RNA的合成沿5-3方向进行,其序列与DNA有义链(编码链)相一致。起 始 转录的起始涉及RNA聚合酶与双链DNA的结合。RNA聚合酶的核心酶为2,负责

34、转录延伸。因子对于转录的正确起始是必需的。核心酶加上因子组成了全酶。它们结合到待转录序列上游的启动子部位。聚合酶通过沿着DNA链滑动,并与启动子形成闭合复合物来识别启动子的-35和-10序列。为使模板链能与碱基配对,DNA双螺旋必须局部解旋。解旋从RNA聚合酶结合的启动子部位开始,然后从一特定的起始位点的核苷酸处起始RNA链的合成。RNA的合成无需引物。RNA链以GTP或ATP开始,接着继续链其余部分的合成。延 伸 起始成功后,聚合酶释放出因子。RNA聚合酶沿5-3方向延伸正在伸长的RNA链,同时沿着反义DNA链(模板链)的3-5方向移动,酶移动时局部解旋DNA,使两条DNA链分开暴露出模板链

35、,这段始终保持的解旋区称为转录泡。聚合酶在转录泡的前方解旋DNA,而在其后方复旋DNA。每加一个核苷酸到RNA链上RNA-DNA双螺旋转一次。终 止 基因3端自身互补的序列会在RNA中形成发夹结构作为终止子。发夹的茎部通常(G+C)含量较高,使其稳定性增强,从而使聚合酶在此停顿。有些基因的终止序列需要一个辅助的蛋白质因子才能有效地终止转录。是一个六聚体蛋白质,在有单链DNA存在时可水解ATP,沿新生RNA链向转录复合物移动,能使RNA聚合酶在依懒性终止子处终止转录。L 原核生物的转录调控1以下陈述哪两个是正确的?( A E ) A 含有5-GGATCGATCC-3序列的双链DNA序列是一个回文

36、结构 B 含有5-GGATCCTAGG-3序列的双链DNA序列是一个回文结构 C Lac阻抑蛋白抑制聚合酶与lac启动子的结合 D lac操纵子直接被乳糖诱导 E Lac阻抑蛋白与异乳糖的结合降低了它与lac启动子的亲和力 F IPTG是lac启动子对的天然诱导剂2以下关于色氨酸操纵子的陈述哪一个是正确的( F ) A 色氨酸操纵子的RNA产物很稳定 B Trp阻抑蛋白是色氨酸操纵子的产物 C Trp阻抑蛋白和Lac阻抑蛋白一样,是相同亚基的四聚体 D 色氨酸激活色氨酸操纵子的表达 E 色氨酸操纵子只被色氨酸阻抑蛋白所调控 F Trp阻抑蛋白与色氨酸结合3以下对于色氨酸操纵子的弱化作用的陈述哪

37、两个是正确的( B F ) A 弱化作用是rho依赖性的 B 弱化序列的缺失会导致色氨酸启动子转录的基本和激活水平的上升 C 弱化子位于色氨酸操纵序列的上游 D 弱化作用不需要转录和翻译的密切结合 E 当色氨酸缺乏时,核糖体在前导肽上两个色氨酸密码子之间的暂停导致弱化作用 F 当色氨酸缺乏时,一种叫做反终子的发夹结构阻止了终止发夹的形成,导致trpE基因的转录通读4以下关于因子的陈述哪两个是错误的( D F ) A 缺乏因子亚基的大肠杆菌RNA聚合酶核心酶不能从启动子处起始转录 B 不同的因子识别不同系列的启动子 C 因子识别-10和-35启动子元件 D 大肠杆菌热休克启动子有不同的-35和-

38、10序列且与17种不同的热休克因子结合 E B.subtilis的孢子形成受多种因子调节 F T7噬菌体表达它自己的因子,而不是编码它自己的RNA聚合酶5 名词解释:弱化子弱化子:原核生物操纵子中能显著减弱甚至终止转录作用的一段核苷酸序列,该区域能形成不同的二级结构,利用原核微生物转录与翻译的偶联机制对转录进行调节。在操纵基因和trpE基因编码序列之间一段序列的缺失将导致基本转录水平和活化后的转录水平的上升,该位点称为弱化子。6 色氨酸操纵子弱化作用的机理?色氨酸操纵子RNA的前导序列含有4个序列互补区,能形成不同的碱基配对的RNA结构。它们被称为1、2、3和4。弱化子发夹结构是序列3和序列4

39、配对的产物(3 : 4结构)。大肠杆菌中,弱化作用依赖于转录和翻译的紧密偶联,即翻译可以在mRNA转录的同时进行。由于色氨酸(色氨酸操纵子编码的酶的最终合成产物)是翻译过程中所必需的,因此细胞对它的含量很敏感,它决定了在mRNA中终止子发夹结构(3 : 4)是否形成。在色氨酸操纵子转录进行的过程中,RNA聚合酶在序列2的末端停滞直到核糖体开始翻译前导肽。在色氨酸含量很高的情况下,核糖体迅速在两个色氨酸密码子(UGG)处插入色氨酸,这样翻译可直达前导肽末端。当RNA聚合酶到达其终止序列时,核糖体封闭了序列2,于是3 : 4发夹得以形成,转录可能终止。M 真核生物的转录1以下对于真核生物RNA聚合

40、酶I、和的陈述哪一个是错误的?( F ) A RNA聚合酶对-鹅膏蕈碱非常敏感 B RNA聚合酶存在于核质中 C RNA聚合酶转录tRNA基因 D真核细胞含有除RNA聚合酶I、和之外的其他RNA聚合酶 E 每一种RNA聚合酶除含有与大肠杆菌RNA聚合酶同源的亚基歪,还有一种聚合酶所特有的其他亚基 F RNA聚合酶的羧基末端含有一段称为羧基末端区(CTD)的只有7个氨基酸的短序列,它可能被磷酸化2以下对于RNA聚合酶I基因的陈述哪两个是正确的?( A F ) A RNA聚合酶I转录核糖体RNA基因 B人细胞含有40簇5个拷贝的tRNA基因 C 18S、5.8S和28SrRNA是分开转录的 D R

41、NA聚合酶I的转录发生在核质中 E RNA聚合酶I的转录发生在胞质中 F rRNA基因簇被称为核仁组织区域3 以下对于RNA聚合酶I转录的陈述哪一个是错误的?( A ) A在RNA聚合酶I启动子中,核心元件是上游调控元件(UCE)下游的1000个碱基 B上游结合因子(UBF)与UCE和RNA聚合酶I启动子狠心元件的上游部分结合 C 选择性因子SL1是使UBF-DNA复合体稳定 D SL1包含几个亚基,包括TATA结合蛋白TBP4 以下对于RNA聚合酶基因的陈述哪两个是正确的?( B E ) A tRNA基因的转录调控区位于转录起始位点上游 B tRNA基因编码区中的高度保守序列也是启动子序列

42、C TBP是TFC的亚基之一 D TFB自身就是一个序列特异性转录因子 E人类基因组内有2000个拷贝的单基因簇的5S rRNA基因5 以下哪个陈述是正确的?( C ) A RNA聚合酶只转录编码蛋白的基因 B TATA框对转录效率有影响,但对转录起始位点的定位没有影响 C TBP与TATA框结合 D增强子通常位于转录起始位点的上游100-200碱基处6 以下对于一般转录因子的陈述哪一个是错误的( D ) A TFD结合TATA框 B TFD是由TBP和TAF组成的多蛋白复合体 C TBP是RNA聚合酶I、和转录中的共同因子 D TFB使TFD-DNA复合体稳定 E RNA聚合酶结合后,TFE

43、、TFH和TFJ与转录复合体结合 F TFH导致CTD磷酸化7 名词解释:真核生物启动子、增强子、TATA框启动子:启动子是基因的一个组成部分,控制基因表达(转录)的起始时间和表达的程度。启动子本身并不控制基因活动,而是通过与转录因子结合而控制基因活动的。增强子:真核生物启动子的转录可被远离转录起始位点数千个碱基的调控元件所增强,这一调控元件被称为增强子,指增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列。TATA框:是构成真核生物启动子的元件之一。它大约在多数真核生物基因转录起始点上游2535bp处,有7bp的保守序列,其顺序为5-TATA(A/T)A(A/T)-3。RNA聚合酶与TATA框牢固结合之后才能开始转录。8

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