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1、-动脉血压的神经体液调节及药物的影响 【目的】 通过观察神经、体液因素及药物等对动脉血压的作用及影响，加深理解动脉血压作为心血管功能活动的综合指标、及其相对恒定的调节原理和重要意义。学习大动物实验的基本方法和技术。 【实验原理】 动脉血压是心血管功能活动的综合指标。正常心、血管的活动在神经、体液因素的调节控制下，保持相对稳定，动脉血压相对恒定。因而通过改变神经、体液因素或施加药物，观察动脉血压的变化，以间接反映诸因素对心、血管功能活动的调节及影响。动脉血压的相对恒定对于保持各组织、器官正常的血液供应和物质代谢是极其重要的，动脉血压的剧烈变化会显著影响各组织、器官的正常活动。当动脉血压大大降低时
2、，会造成组织、器官的血供严重不足，功能障碍，甚至危及生命，此时需要及时救治。 心脏受交感神经和副交感神经（迷走神经）的双重支配。交感神经兴奋通过其末梢释放的去甲肾上腺素（norepinepherine，NE）与心肌细胞膜上的b1受体结合，引起心率加快、心肌收缩力增强，心输出量增加，血压升高。迷走神经兴奋通过其末梢释放的乙酰胆碱（Acetylcholine，Ach）与心肌细胞膜上的M受体结合，引起心率减慢、心房肌收缩力减弱，心输出量减少，血压降低。 绝大多数血管受交感神经支配。交感缩血管神经兴奋通过其末梢释放的NE与血管平滑肌上的a受体结合，引起血管收缩，循环外周阻力增大，血压升高。反之，交感缩
3、血管神经的紧张性降低，血管舒张，循环外周阻力减小，血压下降。 本实验通过切断、刺激支配心、血管的神经以及给药或体液因素等方法，除可直接观察心率、心脏收缩力及缩血管效应外，还可通过观察动脉血压的变化间接了解心、血管活动的变化情况。 【实验器材和药品】 1动物 家兔。 2器材 兔手术台、捕绑固定用绳、哺乳类动物手术器械、纱布、搪瓷碗、盛毛筒、量筒、手术灯、动脉插管、股动脉插管、动脉夹、血压换能器、石蜡油、多道生理记录仪或计算机记录分析系统、心电图记录导线、双凹夹、铁支架、保护电极、电子刺激器、2ml注射器、5ml注射器、20ml注射器、有色丝线、棉线、20%氨基甲酸乙酯、肝素（1000单位/毫升）
4、、5%柠檬酸钠、1：1万肾上腺素、1：1万去甲肾上腺素、生理盐水、1%肝素生理盐水、0.1%多巴胺、1：10万异丙肾上腺素、2.5%妥拉唑林、0.1%普萘洛尔。 【实验步骤和方法】 1实验装置 计算机Biolap98软件系统的使用：打开计算机，显示windows桌面。点击图标“biolap98”，进入BL-310智能型生物信号显示与处理系统。点击“可进行生理、药理、毒理、病理等实验”，进入主画面。点击菜单“输入信号”栏，选择通道1及标导联显示动物心电，通道2显示压力曲线；点击菜单“显示方式”栏，选择双通道显示方式。调节增益至100左右，时间常数为“DC”，滤波用“1kHz”。 如用多道生理记录
5、仪，则打开电源后，校正两个通道的扫描电压，并调节增益至适当位置。打开记录仪，调节描笔的位置，校正描笔的摆动幅度。 电子刺激器的准备 打开电源，选择“连续”刺激方式，波宽为0.5ms，电压为23V，频率为16Hz。将刺激电极连接于刺激器。 检查血压换能器，用石蜡油将其充满，将换能器三通管与动脉插管的导管相连，将换能器导线与计算机或多道生理记录仪相连。 2准备动物 秤重后，用20%氨基甲酸乙酯按每公斤体重1克的剂量从耳缘静脉缓慢注入，动物麻醉的标志为四肢松软，角膜反射消失。麻醉后用绳子将动物背位固定于手术台上，打开手术台底部的电灯保温。剪去颈部手术野的毛以便施行手术。 3手术 沿颈部正中线切开皮肤
6、67厘米，用止血钳沿正中线分离皮下组织及肌肉（胸舌骨肌），暴露出气管。用两把组织钳分别夹住气管两侧的皮肤和肌肉的边缘，并将其拉向两侧，即可见到气管两侧与气管平行的左、右颈总动脉及与其相伴而行的一束神经，这束神经中包括迷走神经、交感神经和减压神经。由于神经被包绕于动脉鞘中，所以应小心分离颈动脉鞘，仔细辨认三条神经。迷走神经最粗，交感神经较细，减压神经最细且常与交感神经紧贴再一起。一般先分离颈总动脉与迷走神经，然后分离减压神经与交感神经。每条神经各分离出23厘米，并在各神经下穿一条不同颜色的丝线以便区别和使用。右侧颈总动脉下穿一条线备用，左侧颈总动脉用于血压测量，在其远心端（头端）和近心端各穿一条
7、线备用。 4插动脉插管 插管前先用肝素生理盐水注满插管，检查插管有无破裂，插管尖端是否光滑，不光滑时要用砂纸磨搽。再次钝性分离左颈总动脉，尽可能长的向头端分离，然后结扎动脉头端。用动脉夹（与动脉垂直并处于水平位置）夹住动脉的近心端，在尽可能长的靠远心端处用眼科剪将动脉剪开一斜口，约剪开管径的一半，然后将动脉插管向心脏方向插入动脉，用已穿好的线结扎紧插入动脉的插管，并将同一结扎线固定于插管壁。在插管的适当位置固定插管并使其与动脉的走向一致，以防止插管刺破动脉。 向耳缘静脉内注射肝素以抗凝，每公斤体重1000单位。注射后一分钟左右即可打开、移去动脉夹，此时即可见血液冲入动脉插管，同时在显示器上可见
8、有压力波动图象，打开记录仪可记出压力搏动曲线。 5心室搏动观察装置 将带有小旗的针灸针于胸骨柄下缘左侧垂直刺入，直至小旗随心室搏动而摇动为止，表明针尖已刺入心室肌。 6心电引导 将心电引导线与针灸针相连接，然后将针灸针刺入动物各肢体末端并固定，在显示器上可观察到心电图象，作为心率、心律的观察指标。 【观察项目】 1观察描记正常血压曲线 从正常血压曲线上可见到三级波：一级波即心跳波，是由于心脏舒缩而引起的血压波动，与心率及其节律一致。二级波即呼吸波，是由于呼吸时肺的张缩而引起的血压波动，与呼吸周期及其节律一致。一般一个呼吸波中有35个心跳波。三级波，不很明显，有时可清楚看到，其原因不完全清楚，可
9、能是由于血管运动中枢紧张性活动的周期性变化所致。三级波历时最长，有数个呼吸波组成。 2观察心率及心室收缩强度 从心电图上可准确观察和记数心率。心室收缩强度可通过观察针灸针上小旗的摆动幅度进行估计（可设一个数值为正常强度，实验时与其比较，给出大概的变化值）。 3用动脉夹夹闭右颈总动脉15秒钟，同时观察、记录血压及心率的变化。 4用保护电极、以适当强度和频率刺激右侧减压神经，同时观察、记录血压、心率及心室收缩强度的变化。然后用两条线在减压神经中部结扎，再于两结扎间剪断。用上述同样电刺激分别刺激减压神经的中枢端和末梢端，同时观察、记录上述各指标的变化。 5先在手术灯下观察两耳血管网的密度及血管扩张程
10、度，再结扎右侧交感神经，并于结扎线的末梢端（近心端）剪断，稍待片刻后再观察两耳血管网的密度及血管扩张程度的变化。然后用上述电流刺激交感神经头侧端，同时观察右耳血管网的密度及血管扩张程度的变化。 6用两条线在右侧迷走神经中部结扎，并于两结扎间剪断，用上述电流分别刺激近心端和头侧端，观察、记录血压、心率及心室收缩强度的变化。 7从耳缘静脉注入1：1万的肾上腺素0.3毫升，观察、记录血压、心率及心室收缩强度的变化。待完全恢复后，静脉注射1：1万的去甲肾上腺素0.3毫升，并进行同样观察。 8从耳缘静脉注入0.1%多巴胺0.5ml/kg，观察血压变化。待血压恢复正常后，再注入同样剂量的多巴胺，随即注入2
11、.5%妥拉唑林0.3ml/kg，观察血压、心率及心室收缩强度的变化。 9从耳缘静脉注入1：10万异丙肾上腺素0.5ml/kg，观察血压、心率及心室收缩强度的变化。待血压等指标恢复正常后，再注入同样剂量的异丙肾上腺素，随即注入0.1%普萘洛尔0.5ml/kg，并进行同样观察。 10股动脉插管和放血 在后肢腹股沟部切开皮肤35厘米，用血管钳分离皮下组织及筋膜，可看到股神经、股静脉和股动脉，股动脉的位置在中间偏后，恰被股神经和股静脉所遮盖。小心分离出股动脉约23厘米，穿线备用。用两个动脉夹分别夹闭末梢端和近心端，在两个动脉夹之间剪一斜口，向近心端方向插入股动脉插管，并结扎固定；插管所连导管的末端置于量杯中，为防止血液凝固，可在量杯中加入少许5%柠檬酸钠或肝素。待准备就绪，松开近心端动脉夹（不要移去）开始放血，同时密切观察血压变化，当血压降至原水平的50%上下或出现休克现象时，即停止放血，同时观察、记录血压、心率和心室收缩强度的变化。随即以较快速度从耳缘静脉输入所收集的血液，并进行同样的观察。 【注意事项】 1. 麻醉药注射速度要缓慢，不能过量。 2. 避免损伤动、静脉，严防出血。如发现出血现象，应立即止血。 3. 每项实验必须在各观察指标处于正常水平的基础上进行，实验后也必须等待各指标完全恢复后，才能开始下一项实验。 -第 5 页-