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1、-DNA的粗提取与鉴定学案-第 5 页DNA的粗提取与鉴定使用说明与学法指导1、 根据学习目标,全体同学要积极主动,参考导学练等辅导资料认真预习并完成导学案,小组长搞好督促与检查,确保每位同学都能认真及时预习。2、 结合导学案中的问题提示,认真研读教材,回答相关问题,解答完有关题目。3、 要求每个同学都要认真预习,勾画课本,找出不明白的问题用红笔画出来。4、 学科班长在晚自习后将导学案收齐后,要统计好没有交上的同学的名字。【学习目标导航】1、 说出DNA的物理和化学性质。2、 概述 DNA的粗提取和鉴定的原理。3、 尝试对动物或植物组织的DNA进行粗提取。4、 培养学生协作意识和合作能力。【学
2、习重点与难点】DNA提取方法与注意事项基础知识整理:一、 DNA的物理和化学性质1、 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的_溶液中溶解度不同,DNA在物质的量浓度为_的溶液中溶解度最低。DNA不溶于_溶液,但细胞中某些蛋白质则溶于该物质,利用这一原理可以将DNA和蛋白质进一步分离。2、 DNA遇_会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。3用猪的血液代替鸡血不行的原理是:_ 4实验成功的关键:_ 二、实验设计:1、实验中共有三次过滤。第1、3次要用其滤液,使用纱布为_层,第二次要用其滤出的黏稠物,使用的纱布为_层。2、实验中有6次搅拌。除最后一次搅拌外,前5次搅拌_,且第一次快速搅拌,
3、其余各步搅拌都要不停地轻轻搅拌,玻璃棒插入_,进行第2、3、5次时,玻璃棒不要_,进行步骤7时,玻璃棒插入烧杯溶液的中间。3、实验中两次使用蒸馏水。步骤1中加入蒸馏水是为了_,使血细胞吸水膨胀破裂,要充分搅拌不应少于5min。步骤3中加入蒸馏水是为了使氯化钠的物质的量浓度达到DNA溶解度的最低点_,即稀释氯化钠溶液。4、实验中三次加入氯化钠溶液。在步骤2、5中加入的质量浓度为_,在步骤8中加入的质量浓度为_,目的一样都是为了DNA的溶解。5、用冷酒精浓缩和沉淀DNA时所用的95酒精,必须经过_后才能使用,冷酒精与含DNA的氯化钠溶液体积比是_。如果用冷酒精处理后,悬浮于溶液中的丝状物较少,可将
4、混合液放于冰箱中再冷却几分钟,然后再用玻璃棒卷起丝状物。6、盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制的。由于玻璃_,DNA中的磷酸基_而被吸附于玻璃表面,故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。一、单项选择题1下列图示中能反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是 ( )2下列关于基因、DNA和染色体的叙述,正确的是 ( ) ADNA只存在于染色体上 B每个染色体总是只含有一个DNA分子C一个DNA分子含有一个基因 D不同基因中脱氧核苷酸序列不同3对真核细胞的基因的叙述不正确的是 ( )A没有调控基因 B有RNA聚合酶结合位点C能控制合成RNA聚合酶 D并不是所有区域都可
5、以编码蛋白质4在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于 ( )A前者用来溶解血细胞,后者用来溶解DNAB前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释NaCl溶液C前者用来分离细胞核与细胞质,后者用来提取DNAD前者使DNA从核中分离出来,后者使DNA析出5制备鸡血细胞液的过程中,要除去上清液的主要原因是 ( )A上清液中存在有毒物质B上清液中的某些成分能与DNA结合成复合物CDNA分子不存在于上清液中D上清液中水分含量高,影响DNA的提取6在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取含杂质较少的DNA时必须用 ( )A0.14 mol/L的N
6、aCl溶液B玻璃棒充分搅拌直至丝状物溶解C经充分预冷的95的酒精溶液7科学家利用“同位素标记法”弄清了许多化学反应的详细过程。下列说法正确的是( )A用15N标记核苷酸弄清了分裂期染色体形态和数目的变化规律B用18O标记H2O和CO2有力地证明了CO2是光合作用的原料C用14C标记CO2最终探明了CO2中碳元素在光合作用中的转移途径D用35S标记噬菌体的DNA并以此侵染细菌证明了DNA是遗传物质8有人从某种哺乳动物体内提取出一种成熟细胞,经化学分析,细胞中不含有DNA而含有红色含铁的蛋白质,请分析最可能发生在该细胞中的生理活动是 ( )ADNAmRNA蛋白质C丙酮酸+H2OCO2+H+ATP9
7、水溶性染色剂PI能与核酸结合而使细胞核着色。细胞浸泡于一定浓度的PI中,仅有死亡细胞的核会被染色,活细胞则不着色;但将PI注射到活细胞中,则细胞核会着色。产生上述现象的原因是 ( )A死细胞与活细胞的核酸结构不同B死细胞与活细胞的核酸含量不同C活细胞能分解PID活细胞的细胞膜阻止PI进入10在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,有两次DNA的沉淀析出,其依据的原理是( )DNA在氯化钠的物质的量浓度为时溶解度最低DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出A两次都是B两次都是C第一次是,第二次是D第一次是,第二次是二、多项选择题11下列叙述中哪些能表明基因与染色体的平行行为 ( )A. DNA
8、主要分布在染色体上,是染色体的主要化学组成之一B.在细胞分裂中,基因和染色体都能进行复制和保持连续性D.配子形成时,非同源染色体上的非等位基因间的分离和重组互不干扰12下列关于DNA的叙述中,正确的是 ( )A人的卵原细胞含有人体的全部遗传信息 B同种生物个体之间DNA完全相同C一个DNA分子可控制许多性状 D病毒的遗传物质是DNA13下列关于生物学实验的描述正确的是 ( )A观察细胞质流动时,换用高倍镜后视野变暗,这时应该使用较大光圈或换凹面镜采光B观察洋葱根尖细胞有丝分裂时,在高倍镜的视野中可以看到一个细胞从分裂前期到中期的变化CDNA粗提取与鉴定实验中,第二次加蒸馏水是为了稀释NaCl溶
9、液,以便DNA析出D在叶绿体中色素的提取和分离实验中,加入CaCO3,是为了研磨充分14下列属于基因的功能是 ( )A携带遗传信息 B携带密码C能转录信使RNA D能控制蛋白质的合成三非选择题15. 关于“DNA的粗提取和物理性状观察”实验:实验材料选用鸡血球液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血球液中含有较高含量的 。在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是 ,通过图B所示的步骤取得滤液,再在溶液中加入2摩尔升NaCl溶液的目的是 ,图中C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是 。 为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可滴加 溶液,结果丝状物被染成蓝色。16某科研小组对禽流感病毒遗传物质进行了如下实验:
10、实验原理:略。实验目的:探究禽流感病毒的遗传物质是DNA还是RNA。材料用具:显微注射器、禽流感病毒的核酸提取物、活鸡胚、DNA酶、RNA酶等。实验步骤:第一步:取等量活鸡胚二组,用显微注射技术,分别向二组活鸡胚细胞中注射有关物质。第二步:在适宜条件下培养。第三步:分别从培养后的鸡胚中抽取样品,检测是否产生禽流感病毒。请将与实验相关的内容填入下表:注射的物质实验现象预测(有无禽流感病毒产生)相关判断(禽流感病毒的遗传物质)第一组如果 ,如果 ,则 是遗传物质;则 是遗传物质。第二组如果 ,如果 ,则 是遗传物质;则 是遗传物质。17在“DNA粗提取”实验中,为得到含DNA的黏稠物,某同学进行了
11、如下操作,最后所得含DNA的黏稠物极少,导致下一步实验无法进行。请指出该同学的实验操作上的错误并改正。在新鲜家鸽血中加入适量的柠檬酸钠,经离心后,除去血浆留下血细胞备用。取510mL血细胞放入50mL的塑料烧杯中,并立即注入20 mL0.015mol/L的氯化钠溶液,快速搅拌5min后经滤纸过滤,取得其滤液。 滤液中加入40 mL2mol/L的氯化钠溶液,并用玻璃棒沿一个方向快速搅拌1min。 上述溶液中缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌边加蒸馏水,直到溶液中丝状物出现为止,再进行过滤而滤得含DNA的黏稠物。_ _,_ _,_ _。课后反思:_答案:基础知识:1、NaCl 0
12、.14mol/L 冷酒精 2、二苯胺(沸水浴)3、哺乳动物成熟的细胞中无细胞核、4、能否提取到较纯净的DNA丝状物实验设计:1 、12 多 2、均朝一个方向 位置不同 直插杯底 4、2mol/L 0.015mol/L 5、充分预冷 2:1 6、表面带电荷 也带电荷 合作探究:1234567CDABDAC891011121314BDCBDACACACD15 DNA 使血球破裂;使滤液中的DNA溶入浓盐溶液,使DNA析出 二苯胺16第一组核酸提取物+DNA酶有无RNADNA第二组核酸提取物+RNA酶)有无DNARNA17 0.015mol/L的氯化钠溶液应改为蒸馏水; 滤纸应改为纱布; 直到溶液中丝状物出现为止应改为直到溶液中丝状物不再增加为止