pcr注意事项(2页).doc

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-pcr注意事项-第 2 页PCR做了很多,根据论坛和自己的经验总结了一下几点,算是抛砖引玉吧,呵呵:1)PCR实验一定要保管好试剂,防止交叉污染,尤其是ddH2O2的交叉使用,极易引起污染(惨痛的教训)!2)NA处理最好用硅烷化塑料管以防粘附在管壁上,所有缓冲液吸头、离心管等用前必须高压处理,常规消耗用品用后作一次性处理,避免反复使用造成污染。3)PCR在超净台内进行,操作前后紫外灯消毒。(不一定需要)4)超净台内设内供PCR用微量离心机、一次性手套、整套移液器和其它必须品;移液品用一次性吸头和活塞的正向排液器,防止移液器基部污染。5)PCR操作应戴手套并勤于更换。5)成套试剂,小量分装,专一保存,防止它用。配制试剂用新器具,用后作一次性处理。6)试剂管用前先瞬时离心(10s),使液体沉于管底,减少污染手套与加样器机会。7)最后加模板DNA(包括在石蜡油后),马上盖好,混匀,瞬时离心(10s),使水相与有机相分开。加入模板且忌喷雾污染,所有非即用管都应盖严。加模板DNA后应更换手套。8)引物稀释时,要首先瞬时离心,以避免粉末状引物在开盖时弹出管外。9)实验设阳性、阴性对照。

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