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1、-PAS (Periodic Acid-Schiff stain)、糖原染色流程-第 3 页PAS染色（Periodic Acid-Schiff stain）操作规程实验目的： PAS染色（Periodic Acid-Schiff stain）又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。糖原的鉴定和黏液的显示外 ，还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞 中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色实验原理：过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。试剂仪器：1） AAF固定液 又称酒精醋酸福尔马林混合固定液，其配方：无水乙醇
2、80 mL，冰醋酸5 mL、甲醛10 mL。2） Carnoy固定液 氯仿300 mL，冰醋酸100mL，95酒精600 mL 2. 染色液 1) 过碘酸酒清夜配法: ：过碘酸08 g，95乙醇70 mL，醋酸钠027 g，水20 mL。待溶解后置于4C冰箱避光保存。保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周. 2) 1N盐酸：量取10mL商品化盐酸加水稀释至120mL3）Schiff氏液冷配法克碱性品红加1N盐酸15ml摇动使溶解（不加热），再加入0.6%偏重亚硫酸钠（钾）85ml，紧盖瓶塞，,在室温中避光处静置12-24小时（本人用12小时），溶液呈草黄色，未加活性炭。然后密封冰箱保存. 置于棕色
3、瓶内保存在冰箱备用，如变为红色，则不能使用。 检测方法：滴加一滴草黄色Schiff氏液到水中，可以马上呈现紫红色或红色。4) 0.5%偏重亚硫酸钠1N盐酸75 mL加10偏重亚硫酸钠(钾)75 mL，再加130 mL蒸馏水混合而成。实验操作程序：新鲜组织编号取材后，投入从AFF液、Camoy固定液或者放人冰箱内低温固定。入无水酒精中脱水、二甲苯透明、浸蜡、包埋。常规切片厚5 tsrn，脱蜡至水。1、入05 一1高碘酸氧化510min，环境温度以不高于20C为宜，室温高时氧化时间适当缩短。2、流水冲洗5 rain，再用蒸馏水浸洗2次；3、Schif氏液(Schif氏液从冰箱取出升至室温使用)避光染色l030 min；4、05偏重亚硫酸钠(钾)浸洗2次，每次12 min，以达到分化的目的；5、流水冲洗510 min，蒸馏水洗；6、Harris苏木精染25min，自来水洗；7、l盐酸酒精分化，再用自来水充分冲洗；8、温水(或者1氨水)返蓝，核染色稍浅为好；9、流水冲洗，常规脱水、二甲苯透明，中性树胶封固。