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1、三、噬菌体侵染细菌的实验三、噬菌体侵染细菌的实验(一)实验者:赫尔希和蔡斯(一)实验者:赫尔希和蔡斯 1952年年(二)实验材料:(二)实验材料:T2噬菌体噬菌体1、成分:蛋白质和、成分:蛋白质和DNA2、生活方式:寄生、生活方式:寄生3、侵染过程:吸附、侵染过程:吸附注入注入-合成合成-组装组装-释放释放大肠杆菌大肠杆菌提供四种脱氧核苷酸。提供四种脱氧核苷酸。大肠杆菌大肠杆菌提供提供氨基酸氨基酸(1)谁提供模板)谁提供模板DNA?噬菌体噬菌体(2)谁提供了合成)谁提供了合成DNA和蛋白质的原料?和蛋白质的原料?(3)谁提供场所?)谁提供场所? 大肠杆菌大肠杆菌(三)研究思路:(三)研究思路:
2、设法把设法把DNA和蛋白质分开,然后和蛋白质分开,然后单独、直接观察单独、直接观察DNA和蛋白质的作用。和蛋白质的作用。(四)研究技术方法:(四)研究技术方法:同位素标记法。同位素标记法。(一一)、标记噬菌体方法:、标记噬菌体方法:同位素标记同位素标记(示踪示踪)法法返回返回v标记大肠杆标记大肠杆菌菌大肠杆大肠杆菌菌 + 含含35s s的的培养基培养基 含含 35s的大肠杆的大肠杆菌菌大肠杆大肠杆菌菌 + 含含32p的的培养基培养基 含含32p的大肠杆的大肠杆菌菌v标记标记T2噬菌体噬菌体T2噬菌体噬菌体+含含35s的大肠杆的大肠杆菌菌 含含35sT2的噬菌体的噬菌体T2噬菌体噬菌体+含含32
3、p的大肠杆的大肠杆菌菌 含含32pT2的噬菌体的噬菌体离心离心离心离心标记细菌标记细菌标记噬菌体标记噬菌体噬菌体侵染细菌(短时间保温)噬菌体侵染细菌(短时间保温)搅拌离心搅拌离心观察放射性的分布观察放射性的分布“保温保温”:为噬菌体培养提供适宜:为噬菌体培养提供适宜的恒定的温度,以保证酶的活性。的恒定的温度,以保证酶的活性。 搅拌的目的:使吸附在搅拌的目的:使吸附在细菌上的噬菌体颗粒与细菌上的噬菌体颗粒与细菌分离细菌分离离心的目的:让上清液中离心的目的:让上清液中析出重量较轻的噬菌体颗析出重量较轻的噬菌体颗粒,而离心管的沉淀物中粒,而离心管的沉淀物中留下被感染的大肠杆菌。留下被感染的大肠杆菌。
4、 内部无内部无DNADNA的噬菌体外壳的噬菌体外壳三、三、 噬菌体侵染细菌的实验噬菌体侵染细菌的实验实验过程实验过程 噬菌体侵染细菌时噬菌体侵染细菌时, , _进入细菌的进入细菌的细胞中,而细胞中,而_ _ 仍留在外面。因仍留在外面。因此此, , 子代噬菌体的各种性状是通过亲代子代噬菌体的各种性状是通过亲代的的_ _ 遗传给后代的遗传给后代的, ,因此因此_ _ 才是真才是真正的遗传物质。正的遗传物质。赫尔希和蔡斯噬菌体侵染细菌的实验表明:DNADNADNA蛋白质外壳蛋白质外壳第二组第二组实验实验实验结果及结论:实验结果及结论:第一组第一组 实验实验亲代亲代噬菌体噬菌体32P标标记记DNA35
5、S标记标记蛋白质蛋白质大肠杆大肠杆菌菌内内有有32P标标记记DNA无无35S标标记蛋白质记蛋白质子代子代噬菌体噬菌体DNA有有32P标记标记外壳蛋白外壳蛋白质无质无35S实验实验结论结论DNA分分子是遗子是遗传物质传物质结论:结论:噬菌体侵染细菌时,进入噬菌体侵染细菌时,进入到细菌的细胞中,而蛋白质的外壳仍留到细菌的细胞中,而蛋白质的外壳仍留在外面。因此,子代噬菌体的各种性状在外面。因此,子代噬菌体的各种性状,是通过亲代的传递的。,是通过亲代的传递的。才是真正的遗传物质。才是真正的遗传物质。如下图甲、乙为两种不同的病毒,经人工重建形成“杂种病毒丙”,用丙病毒侵染植物细胞,在植物细胞内增殖后产生的新一代病毒是A、B、C、D中的 ( )ACBDD