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1、专题强化训练(十八)基因工程和细胞工程(45分钟，100分)非选择题1(2016湖北省武汉市调研考试)生物选修3：现代生物科技专题阅读如下材料，回答问题：材料1：某研究小组对小鼠肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养。材料2：基因敲除是通过一定途径使机体特定基因失活或缺失技术。(1)材料1相关研究属于_工程范畴。制备肝细胞悬浮液时剪碎肝组织，再用_处理，肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%CO2，其主要作用是_。为了防止细胞培养过程中细菌污染，可向培养液中加入适量_。(2)材料2相关研究属于基因工程范畴。将某基因插入到基因表达载体目基因中，使目基因_，通过_技术导入ES细胞中。观察基因敲
2、除后生物体性状_，可以判断目基因是否真正被敲除。医学展望可通过敲除决定某些抗原基因，获得适合人体移植其他动物器官，减弱或消除_。答案：(1)细胞胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)维持培养液pH抗生素(2)失活(或灭活、不能表达)显微注射是否表达(或“表现”)免疫排斥(或排斥反应)2(2016广东省广州市模拟)生物选修3：现代生物科技专题回答利用农杆菌转化法培育转基因植物相关问题：(1)培育转基因植物过程核心步骤是构建基因表达载体，其目是使目基因在受体细胞中_，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目基因表达和发挥作用。(2)构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开_键。(3)组成基因表达载
3、体单体是_。基因表达载体中启动子是_识别和结合部位，这种结合完成后才能驱动目基因通过_(填过程)合成mRNA。(4)用两种限制酶Xba和Sac(两种酶切出黏性末端不同)切割某DNA，获得含目基因片段。若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中何种Ti质粒？_。(5)将受体细胞培养成植株需要应用_技术，该技术理论依据是_。答案：(1)稳定存在(2)磷酸二酯(3)脱氧核苷酸RNA聚合酶转录(4)丙(5)植物组织培养植物细胞全能性3(2016河北省五校质量监测)生物选修3：现代生物科技专题在基因工程中，将目基因导入受体细胞是一个重要环节。(1)如果是将目基因导入植物细胞：采用最多方法是_，其次还有_
4、和_等。(2)如果是将目基因导入动物细胞：最常用方法是_。此方法受体细胞多是_。(3)原核生物作为受体细胞优点是_，最常用原核细胞是_，其转化方法是：先用_处理细胞，使其成为_，再将_溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定_下促进受体细胞吸收DNA分子，完成转化过程。(4)重组DNA导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞依据是_。答案：(1)农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法(2)显微注射法受精卵(3)繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2感受态细胞重组表达载体DNA分子温度(4)标记基因是否表达4(2016河南省八市检测试题)生物选修3：现代生物科技专题如图为动物细胞工程操作流
5、程图。请据图分析回答：(1)将动物组织中细胞分散开来获得单个细胞A和B通常用_来处理。将A、B细胞融合形成C细胞过程常用诱导因素有_。(2)如果该图表示抗乙肝病毒单克隆抗体制备过程，A细胞是骨髓瘤细胞，则B细胞是从小鼠体内获得_，在获得该细胞之前，需要向小鼠注射_。获得D细胞需要经过2次筛选，最终得到_。(3)如果该图表示克隆羊培育过程，过程中涉及生物技术有_(写出两种)。如果D表示所获得克隆动物，则过程中所涉及生物技术有_。答案：(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)PEG、灭活病毒、电激(2)浆细胞灭活乙肝病毒能产生特定抗体杂交瘤细胞(3)动物细胞培养、核移植动物胚胎早期培养、胚胎移植5(2016
6、江西省宜春中学与新余一中联考)生物选修3：现代生物科技专题如图是单克隆抗体制备流程阶段示意图，请根据示意图回答下列问题。(1)单克隆抗体技术是_技术中最重要用途。将特定抗原注入小鼠体内，其目是使小鼠产生_细胞。(2)骨髓瘤细胞与某些淋巴细胞混合在一起，细胞融合完成后，在培养基中有_种两两融合细胞，融合原理是_，融合方法除了电激外，还可以用化学诱导剂_或灭活_。(3)从图中可以看出，单克隆抗体制备经过了_次筛选，第一次筛选得到细胞是_。答案：(1)动物细胞融合浆(2)三细胞膜具有一定流动性聚乙二醇(PEG)病毒(3)两杂交瘤细胞6(2016广东省七校联考)生物选修3：现代生物科技专题科学家利用基
7、因工程和细胞核移植技术培育了绿色荧光蛋白转基因克隆猪。其基本流程是：首先从荧光水母中获取目基因，然后与有关载体重组，并将其导入猪胎儿成纤维细胞，经培养后再将成纤维细胞核移植入去核卵母细胞中，最后培养出转基因克隆猪。请回答有关问题：(1)科学家从荧光水母细胞中获取绿色荧光蛋白基因所运用酶称为_，并用_该种酶作用于运载体，才能有利于重组载体构建。(2)基因工程中，将重组载体导入猪胎儿成纤维细胞常用方法是_。(3)作为核移植受体细胞去核卵母细胞一般处在_期，常通过_(物理方法)进行激活，使其完成细胞分裂和发育进程。(4)培养重组细胞时，将细胞所需营养物质按其种类、数量严格配制而成培养基称为合成培养基
8、，但通常在培养基中还需要加入适量_等天然成分。(5)重组细胞培养至一定阶段还可通过_方法，从而最终一次获得多个转基因猪。最后这个过程现阶段必须通过胚胎移植才能实现，其实质是_。答案：(1)限制酶同种(2)显微注射法(3)M中(减数第二次分裂中)电脉冲(或电激)(4)血清(或血浆)(5)胚胎分割、胚胎移植早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置转移7(2016江西省南昌市模拟卷)生物选修3：现代生物科技专题如图为某生物一种多肽酶基因内部和周围DNA组成情况。其中标出了转录起始部位( ini)和终止部位(ter)，翻译起始密码子对应序列(sta)第一个碱基位置，终止密码子对应序列(sto)第一个碱基位
9、置，以及基因中内含子界限()(距离以kb表示，但未按比例画出)。(1)转录起始部位称为_，是一段有特殊结构DNA片段，位于基因首端，它是RNA聚合酶_部位。(2)该基因来自_(填“基因组文库”或“cDNA文库”)，该文库包括该生物_(填“全部”或“部分”)基因。(3)翻译时与密码子发生碱基互补配对是_上反密码子，该物质主要功能是_。(4)基因工程在原则上只能产生_蛋白质。蛋白质工程以蛋白质分子_及其与生物功能关系作为基础。答案：(1)启动子识别与结合(2)基因组文库全部(3)转运RNA识别并转运氨基酸(4)自然界已有结构规律8(2016广东省广州市综合测试)生物选修3：现代生物科技专题如图一是
10、培养小鼠胚胎成纤维细胞(MEF细胞)示意图，图二是在用MEF细胞制成饲养层上培养胚胎干细胞(ES细胞)示意图。(1)图一所示，制备细胞悬液时，常用_酶来消化剪碎组织块。配制培养液时，通常需要在合成培养基基础上添加_等一些天然成分。当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象称为细胞_。(2)ES细胞是由_中分离出来一类细胞，ES细胞在功能上具有发育_。(3) MEF细胞能够分泌某些蛋白质，其合成到分泌至细胞外过程是：核糖体_囊泡_囊泡，再通过_方式分泌到细胞外。在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞作用是_。(4)在治疗性克隆过程中，细胞核取自患者细胞，这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生_反应。答案：(1)胰蛋白血清、血浆接触抑制(2)早期胚胎(或原始性腺)全能性(3)内质网高尔基体胞吐抑制ES细胞分化(4)免疫排斥