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1、烟台南山学院动物学实验指导手册（本科）动物学实验指导手册一、 教学目的通过实验课程的学习，学生掌握动物学实验的一些基本操作技能；学会动物的培养、观察、解剖及绘制生物图的方法和技能；动物体物质的提取方法。获得必要的感性认识，验证和巩固所学的动物学知识；培养独立思考、独立准备和进行实验的实践能力，增强分析与处理实验数据的能力；养成细致观察、认真记录实验现象的好习惯，逐步形成严谨的科学态度。为环境保护、食品生产有关行业的工作奠定必要的动物学技能和知识储备。二、教学要求学会观察动物的形态结构的方法，掌握以对虾为代表的节肢动物形态和内部结构的解剖以及甲壳素的提取操作方法。掌握鲫鱼内部结构解剖、鳞片结构的
2、观察和鱼胶提取方法。学生完成实验后，应撰写实验报告，要求简明扼要地叙述实验目的、原理以及操作方法，写明实验操作的关键环节；对实验结果进行思考与分析；讨论实验中出现的问题；认真完成每次实验课中的思考题。三、教学方法讲解法、演示法、实验法、讨论、讲解到位，不过多参与实验过程，让学生充分发挥主观作用。每个学生都动手、动脑进行实验，切实提高操作技能，保证实验效果。指导学生学会查阅动物学相关文献资料，能正确动物形态结构图和书写合格的实验报告，形成独立分析解决问题、改进实验方案的能力。四、教学报告内容及要求实验报告应包括以下内容：实验日期和实验者、实验题目、实验目的、实验材料、仪器和药品、实验方法和步骤、
3、实验数据记录与处理、实验结果、思考题。实验记录应及时、准确、如实、详尽、清楚。在记录中，应要求学生实事求是，尊重事实。即使实验得到的结果不理想，也不能修改数据，应通过分析和讨论找出原因和解决的办法，养成实事求是和严谨的科学态度。实验报告以说明为主，所使用的资料应是通过实验所观察到的现象和所获得的数据，应是客观、真实、确切的，表达务必准确简明。五、考核方式实验教学是理论与实践的有机结合，要求所有学生积极参与，动手操作，记录相关的实验操作过程及实验结果，并整理好实验报告。实验教学考核方法分为出勤、实验操作和实验报告三部分。六、教材及主要参考资料教材：动物学实验指导 第一版，程红 陈茂生 编著,清华
4、大学出版社. 2005年参考书：1. 简明脊椎动物组织与胚胎学王平等编著北京大学出版社，2004年 2.舒黎明，陈国宝，李永振.南沙群岛珊瑚礁区7种鲈总科鱼类鳞片年轮特征J.南方水产，2005,1(1):21-26.3. 陈璐.骨骼肌显微结构及超微结构与猪肉嫩度的关系D. 南京师范大学，2008年.4. 简明脊椎动物组织与胚胎学，王平等编著北京大学出版社，2004年.七、教学纪律、安全和注意事项1.学生必须按时上课，不得迟到或早退。2.进入实验室后，应保持安静，不得高声喧哗和打闹。3.实验前必须认真预习实验内容。4.实验过程中要注意安全，遵守操作规程，节约水、电、药品和其他的材料。5.实验中要
5、细心操作、观察，认真记录各种实验数据，不允许抄袭他人数据，不得擅自离开操作岗位。6.实验完毕后，应及时切断电源、关闭水阀和气阀，将所有仪器设备恢复原位并清扫实验场地，经指导教师同意后，方可离开实验室。 目 录实验一 对虾结构的解剖观察与虾壳素的提取1实验二 鲫鱼结构的解剖观察与鱼胶的提取5 实验一 对虾结构的解剖观察与虾壳素的提取一、实验目的1.掌握鳌虾或琵琶虾的形态，结构。了解甲壳动物在形态结构上的主要特征。2.通过形态结构观察培养动手实践观察能力和分析解决问题能力。二、实验材料和器具 鳌虾或琵琶虾，解剖剪、解剖刀，镊子，解剖盘，放大镜。1.0 mol/L盐酸、EDTA饱和溶液、1 molL
6、 NaOH、40的 NaOH、索氏提取器、pH试纸、玻璃棒、烧杯、蒸馏水、滤纸。三、操作与观察（一）对虾结构的解剖观察 1. 外部形态的观察 观察身体分部，外骨骼。身体附肢数量、的形态结构位置（注意各附肢部位和功能的不同而具有不同，观察时，左手持虾，使其腹部向上。然后右手持镊子，由身体后部向前依次将虾左侧附肢摘下，按原来顺序排列在硬纸上。用镊子钳住附肢基部，垂直拔下，注意附肢完整性，不要损伤内部器官）头胸部：参考附图，按顺序将附肢排列在硬纸上。头部： 复眼，小触角，大触角，大颚，小颚胸部： 腹部 2.内部结构 先将头胸甲左侧下半部小心地用剪刀除去，再轻轻地将头胸甲全部除去，最后自后向前沿着背部
7、中央剪开，小心除去甲壳。 呼吸器官：用剪刀剪去虾头胸部右侧鳃盖，即可看到呼吸器官-鳃。结合已摘下的左侧附肢上鳃的着生情况，原位用镊子稍分离并同时观察鳃腔内着生在颚足和歩足基部的足鳃，体壁与附肢间关节膜上的关节鳃，颚足基部的肢鳃。肌肉：类型？循环系统：开管式，主要观察心脏和动脉 心脏-心孔 动脉 生殖系统：摘除心脏，可看到虾的生殖腺。 雄性：精巢，位置？ 雌性：卵巢，位置？颜色？消化系统：移去生殖腺，观察消化器官。排泄：剪去胃、肝脏，观察触角腺。位置？颜色？神经系统：除保留食管外，将其他内脏器官全部除去，小心地沿着中线剪开胸部底壁，便可看到身体腹面正中线处的白色索状结构。仔细观察神经节、神经管。
8、（二）虾壳素的提取 1.工艺路线：虾壳-脱钙-脱蛋白-甲壳素脱乙酰 -壳聚糖2.操作新鲜虾壳洗净，70烘干，粉碎脱钙取 4份粉碎的虾壳粉，每份5 g，浸泡于 100mL 1.0 molL的盐酸溶液中，常温下处理18h后过滤。（可用EDTA浸泡，比较脱钙效果）脱蛋白处理取经脱钙处理后的烘干的滤渣，在 60 下，用 1 molL的氢氧化钠溶液 100mL按料液 比 1：50回流 8h，进行脱蛋白质处理。洗涤至中性，干燥得到白色片状甲壳素。 脱乙酰处理，进一步制得壳多糖 将 4 g脱钙、脱蛋白质处理后的滤渣用 120 mL 40的 NaOH（料液比1:30）90下处理 6h。洗涤干燥，制得壳多糖。四
9、、实验作业与思考：1.完成实验报告，绘出虾外形图，注明各部分结构名称。2.甲壳纲的主要特点。3.甲壳类具有哪些适应水生生活的形态结构和生理特征。4.搜集信息，扩大了解甲壳的开发和应用。实验二 鲫鱼结构的解剖观察与鱼胶的提取一、实验目的1. 通过对鲫鱼的外形与内脏结构的解剖与观察，熟悉鱼纲动物的形态、结构。2. 掌握鱼的解剖方法。3. 通过鱼鳞片的观察，初步判断鱼的年龄。4. 掌握鱼胶提取的操作方法和技能。二、实验材料与器具 鲫鱼、显微镜、解剖工具、解剖盘，载玻片、吸管、电热套、离心机、烧瓶、4NaOH、5硼酸(H3BO3）、0.2 mol/L的 EDTA三、操作与观察（一）形态结构的观察1.
10、外形 头部 口 鼻孔- 鼻腔 （ 鼻腔和口腔相通？） 眼 鳃盖 - 鳃盖膜- 鳃孔 躯干部和尾部 鳞片鳞式？ 侧线 鱼鳍鳍式？2. 内部解剖剪开体壁时不要插入太深，上翘，以免损伤内脏。如何解剖？解剖后观察次序。A 原位观察 B.生殖系统 生殖腺 生殖导管观察完毕，移去左侧生殖腺，观察消化器官。C.消化系统 口腔 咽 （鲤鱼出现咽喉齿） 食管 肠 泄殖腔消化腺：肝胰腺 胆囊（观察胆管与肠的联系） 观察完，移去消化管及肝胰腺 D.鱼鳔（与食管的联系？） 观察完毕，移去鱼鳔，观察排泄器官。E. 排泄系统肾脏、输尿管 膀胱F.循环系统 观察心脏 G.鳃 观察鳃弓、鳃耙、鳃片H.神经系统 脑-沿着长轴方
11、向向前剪开头部背面骨骼，小心地移去背部骨骼，用棉球吸取脑脊液，脑显露出来，从背面观察：端脑嗅脑、大脑中脑间脑小脑延脑鲫鱼脑中哪部分发达，与鱼生活有何联系？（二）鳞片的观察 每个鱼鳞片样品中筛选完整无破损的鳞片56片，放置于培养皿中，用4苛性碱(NaOH)溶液、5硼酸(H3BO3）或淡氨水浸泡数小时，取出用清水冲洗。用牙刷和纱布去除表面粘液，擦干。在显微镜下（4*10）进行年轮鉴定及鳞片各个区域的年轮特征。（三）鱼胶的提取1.鱼鳞的脱钙 将鱼鳞样品用水洗净后 自然晾干，用浓度为 0.2 mol/L的 EDTA脱钙。料液比为 1：50(g:ml)，温度为 25，时间为4 h，搅拌速度为30 rpm
12、。脱钙完成后，用蒸馏水清洗 3-4次以除去 EDTA残留物。2.胶原蛋白提取 水提法提取：称取脱钙后的鱼鳞于250 mL圆底烧瓶中，根据试验设计的料液比加入相应体积的蒸馏水。提取条件：温度70C、料液比1：40(g:ml)，提取时间20 min。然后用离心机离心15min，转速为 2000 rpm。取上层清液 ，蒸干，编号，密封置于冰箱冷藏。 或酶解法提取称取脱钙后的鱼鳞，采用胃蛋白酶按试验条件：温度 25C、酶与底物比3、酶解时间2 h、pH 3，在此条件下提取的胶原蛋白。3.胶原蛋白含量测定（了解） 用对二甲氨基苯甲醛比色法测定提取物羟脯氨酸含量，从而确定其胶原蛋白的含量。胶原蛋白含量的计算公式为: X=CV/(m1 000) F11.1。式 中:表示提取样品中胶原蛋白的含量(mg/g)；C表示羟脯氨酸浓度(g/mL)；V表示所配制溶液的体积(mL)； F表示稀释倍数；11.1为水产品胶原蛋白水解为羟脯氨酸的系数。四、实验作业与思考1.绘出鲫鱼的形态和内部结构解剖图，注明各部分的名称。2.鱼胶的提取工艺上有哪些方面需要进一步完善？3.从网络收集信息，扩大鱼胶的开发和应用方面的了解。8