《TGXAS-罗汉茶成分含量测定方法一测多评法编制说明.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《TGXAS-罗汉茶成分含量测定方法一测多评法编制说明.docx（31页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、团体标准罗汉茶成分含量测定方法一测多评法（征求意见稿）编制说明一、工程来源根据广西标准化协会关于下达2021年第三十一批团体标准 制修订工程计划的通知（桂标协202189号）精神，本标准由 广西壮族自治区药品监督管理局提出，由广西壮族自治区食品药 品检验所起草的团体标准罗汉茶成分含量测定方法一测多评 法。二、工程背景及目的意义中药材是中医药事业传承和开展的物质基础，是关系国计民 生的战略性资源。近年来，中央和地方在促进中药材保护和开展 方面，陆续出台多项配套政策。早在2015年4月，工业和信息化部 、国家中医药管理局等16个部委出台了中药材保护和开展规划 （2015-2020年），明确指出要构
2、建中药材质量保障体系，提高和 完善中药材标准，完善中药材生产、经营质量管理规范。2016年2 月，国务院印发了中医药开展战略规划纲要（2016-2030年）， 提出的重点任务之一即推进民族药标准建设，提高民族药质量， 加大开发推广力度，促进民族药产业开展。要求健全完善中药质 量标准体系，加强中药质量管理，重点强化中药炮制、中药鉴定 以及道地药材的标准制定与质量管理。2018年12月，农业农 村部、国家药品监督管理局、国家中医药管理局联合发布了关于 印发全国道地药材生产基地建设规划（2018-2025年）的通知（流动相组成的考察：分别考察了甲醇-0. 1%磷酸系统、乙聘- 水系统、乙庸-0. 1
3、%磷酸溶液系统、乙睛-0.1%甲酸系统，结果以 乙睛-0. 1%甲酸溶液系统为含量测定的流动相系统可使各组分峰 形及别离度较好且出峰时间较适中。见图1图4。0.160.140120.10 0080.060040020000.00 2.00 4.00 6CO 800 1000 1200 1400 1600 1800 20 00 22.00 24.00 26 00 288 30 00 3200 34 00 36 00 38 00 40 00 42 00 44 00 46 00 4800 5000 52.00 54.CO 568 5800 6000 6200 64 00 6600 6800 7000
4、 72.00 74.00 7600 73 00 8000 82.00 84.00 8600 88 00 90 00 分律图1甲醇-0.1%磷酸系统0.180.160060040020000 00200400600&81000120014.00160018 00200022 0024.0026 0028 C0 30003200”00360038 00400042.844 004600分即图2乙睛-水系统0-26024022020 0.180160.143 012 aio 008 006004 0020000.002 004.006.008 00100012.0014.00150018.0020.
5、0022 0024.0026.0028 0030.0032.0034 0036.0038.0040 0042.0044.00460048.CO50.00520054 0056.0058 0060.00分仲图3乙睹-0.1%磷酸系统02402200 o.ia-0160140120W008ao60040.020000.00 1 00 2.00 3.00 4.00 5 00 6 00 7.00 8 00 900 WOO 11.00 12.00 13 00 14.00 15 00 1600 17.00 1800 1900 2000 21.00 22.00 23 00 24.8 2500 26 00 2
6、7.00 2800 29 00 3000 31.00 3200 33.00 34 00 3500 3600 37 00 3800 39 00 4000 分铮图4乙睛-0.1%甲酸系统流动相洗脱程序的考察：实验中，摸索了等度洗脱和梯度洗 脱程序，为使分析时间缩短并将各成分到达有效别离，同时结合 实验结果分析，说明等度洗脱可以满足实验需求，等度洗脱条件 为乙月青-0. 1%甲酸(19:81) o(2)供试品溶液制备的考察提取溶剂的考察：分别考察水、甲醇、无水乙醇、50%乙醇四 种溶剂的提取效果。取本品0.25g,精密称定，置具塞锥形瓶中， 分别精密加入上述四种溶剂各50mL,密塞，称定重量，超声处
7、理 (功率360W,频率45kHz) 30min,放冷，再称定重量，用水(甲 醇、无水乙醇、50%乙醇)补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤 液，即得。见表1、图4图8。表1提取溶剂的比拟提取溶剂甲醇无水乙醇5096乙醇水新洛新妇甘(mg/g)1.28050. 36091.25731. 1781落新妇首(mg/g)65. 967534.128652.915845.2189新异落新妇甘mg/g)0. 4807/0. 54630. 7822异落新妇甘(mg/g)5. 57952.27674. 11014. 0949榭皮昔(mg/g)2. 34651.00982. 43751.4747黄杞昔(mg/g
8、)4. 06732.20472. 07102. 46760.350.050.00-0.050.00-0.00S.OO1 0.001.Z. st 3.iA i.i人1 S.OOao.oo分，中25.0030.003S.OO-40.00图5甲醇超声0.20-0.180.1 40.14 三0.1 2-EW 0.1 040.08 三0.060.04 三0.02 三0.000.001 5.0020.00分钟25.0030.0035.0040.00图6无水乙醇超声l.m单一ss1 0.001 5.0020.0025.。30.0035.0040.00分主中图7 50%乙解超声0.260.240.220.20
9、O.1G0.160.140.120.100.080.060.040.020.00si.WE罐 I .3 i.sAni.8 -0.005.001 0.001 5.0020.0025.0030.0035.00-40.00分名中图8 水超声提取方法的考察：考察了不同甲醇的提取方法(超声30min、 加热回流30min)的提取效果，结果超声提取和加热回流提取效果 相当，为使实验方便快捷，选择超声作为实验方法，见表2。表2.提取方法的比拟提取方法超声回流新落新妇昔含量(mg/g)1.28051.3305落新妇昔含量(mg/g)65.967554.8572S.1-st一i.s-IsnnuHHnS曼新异落新
10、妇昔含量（mg/g）0. 48070. 8530异落新妇苜含量（mg/g）5. 57954.3333楣皮昔含量（mg/g）2.34652. 3123黄杞昔含量（mg/g）4.06732.4121落新妇苜总量（mg/g）73.3161.37S.1-st一i.s-IsnnuHHnS曼0.35o.oos.ooi o.ooi s.ooao.oo25.。30.00as.00-40.00分室中图9甲醇超声提取溶剂用量的选择：考察了不同的甲醇用量（25mL、50mL. 100ml）的提取效果，结果当甲醇用量为251nL时，待测成分基本已 提取完全，为减少试剂浪费，应选择甲醇用量为25mL,详见表3。表3 .
11、提取溶剂用量的比拟提取溶剂用量25ml甲醇50ml甲醇100ml甲醇新落新妇甘含量（mg/g）0.93680.87410.8566落新妇昔含量（mg/g）52.169151.754553,2484新异落新妇甘含量（mg/g）0.32920.23810.2438异落新妇甘含量（mg/g）3.94753.91304.0102柳皮昔含量（mg/g）2.10842.10292.0471黄杞甘含量（mg/g）2.43592.11362.4326提取时间的考察：考察了不同甲醇超声时间（15 min、30 min、 45 min、60min）的提取效果，结果当超声提取30 min时，待测成 分即可基本完全提
12、取，为节约时间，应选择提取时间为30 min, 结果见表4。表4 .提取时间的比拟提取时间15分钟30分钟45分钟60分钟新洛新妇甘含量（mg/g）0.71710.83090.86090.8673落新妇甘含量（mg/g）48.533352.413552.534052.0945新异落新妇苜含量(mg/g)0.24260.26100.28060.3019异落新妇昔含量（mg/g）3.55624.03174.13864.1197棚皮昔含量（mg/g）1.87112.10172.11872.1665黄杞甘含量（mg/g）2.29502.38542.40392.2980综上，最终确定供试品溶液的制备方法
13、如下：取本品0.25g, 精密称定，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇25mL,密塞，称 定重量，超声处理（功率360W,频率45KHz） 30min,放冷，再称 定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。3、方法学考察和样品的测定（1）被测溶液的稳定性对同一供试品溶液（样2）,每隔一定时间测定一次，共测定 6次，结果6次测定的新落新妇昔峰面积、落新妇首峰面积、新异 落新妇昔峰面积、异落新妇昔峰面积、榭皮昔峰面积、黄杞昔峰 面积的RSD符合要求（见表5）,试验说明，供试品溶液在24h内稳 定。表5.稳定性实验结果时间新落新妇昔 面积落新妇昔峰 面积新异落新妇 首峰面积异落新妇昔
14、峰面积棚皮昔峰面 积黄杞昔峰面 积稳定性Oh264166158357487396013064542129142684250稳定性4h271163159008997588413793042134371684415稳定性8h271845159007067570813706162144074690257稳定性12h269977157746747475113402202125910680630稳定性16h270117158551587319113363222134044689394稳定性24h269918157970347396813563602126429685562平均峰面积26953115844
15、0377457713482132132328685751.3RSD1.02%0. 33%1.43%1.96%0. 32%0. 52%(2)精密度试验对同一供试品溶液(样2),按正文拟订的色谱条件，连续测 定6次。结果新落新妇苔、落新妇昔、新异落新妇昔、异落新妇昔、 柳皮昔、黄杞昔峰面积的RSD符合要求。详见表6试验说明，本法 的精密度较好。表6 .仪器精密度测定结果样品编号新落新妇甘 面积落新妇昔峰 面积新异落新妇 昔峰面积异落新妇昔 峰面积榔皮昔峰面 积黄杞昔峰面 积重复性1264166158357487306213064542129142684250重复性22664351587111975
16、35713514352138206688389重复性3268696158808847342813570572130355690363重复性4271876158859357445713208012136236682756重复性5271968159017477492713548962140595680860重复性6271163159008997301613793042134371684415平均峰面积269051158793897404113449912134818685172RSD1.20%0. 15%1.36%1.98%0.21%0. 52%(3)重复性试验取同一批供试品，取约0.25g,精密
17、称定，按2 (1)拟定的色 谱条件平行测定6份，分别计算新落新妇苔、落新妇苔、新异落新 妇昔、异落新妇昔、榭皮昔、黄杞昔含量，结果6份供试品溶液的 新落新妇昔、落新妇昔、新异落新妇苔、异落新妇甘、柳皮甘、 黄杞昔含量的RSD均符合要求(见表7),试验说明，本法重复性 较好。表7.重复性实验结果房口新落新妇昔编号含量(mg/g)新异落新妇落新妇昔含-人曰异落新妇昔含棚皮昔含量 黄杞昔含量昔含量量(mg/g)量(mg/g)(mg/g)(mg/g)(mg/g)11.146257.98570.32164.87486.37602.686121.162256.58330. 32094.77586.2555
18、2. 596631. 152855. 64250. 32824. 89766. 20342. 557141. 198054.44760. 32844. 63106.05302.542651.102255. 56820.31354.80066.18042.519461.174255. 06670. 32354.67676.16402.5003平均值1.155955. 88230. 32274.77616. 20542.5670RSI)2. 77%2. 23%1. 70%2. 22%1.72%2.61%(4)准确度(加样回收率)测定取新落新妇昔含量(1. 1285mg/g)、落新妇昔含量 (56.
19、 4082mg/g),新异落新妇昔含量(0. 3224mg/g)、异落新妇昔含 量(4. 8008mg/g)、柳皮苔含量(6. 2481mg/g)、黄杞昔含量(2. 5968 mg/g)的本品适量，粉碎过四号筛，平行称取6份，每份约0. 125g, 精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入加样回收混合对照品溶液(新落新妇昔5.929 ug/mL、落新妇昔240. 994 u g/矶、新异落新 妇昔1.217 ug/mL、异落新妇昔20. 683 口 g/mL、柳皮苔31. 869 口 g/mL、黄杞昔10. 822u g/mL) 25mL,密塞，称定重量，超声处理(功 率360W,频率45kHz)3
20、0min,放冷，再称定重量，用甲醇补足减失 的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按2 (1)拟定的色谱条件测定，计算加样回收率，结果新落 新妇昔平均回收率为97. 34%, RSD=2. 81% (n=6)；落新妇昔平均 回收率为94. 93%, RSD=2. 10% (n=6)；新异落新妇昔平均回收率 为96. 97%, RSD=1. 79% (n=6)；异落新妇昔平均回收率为96. 95%, RSD=2. 51%(n=6)；柳皮昔平均回收率为97. 21%, RSD=2. 83%(n=6)； 黄杞昔平均回收率为97. 60%, RSD=2. 01% (n=6)。均符合定量分 析的要求(见表
21、8),试验说明，本法回收率较好。表8.加样回收率试验结果名称 序号 取样量(g) 原有量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率 平均 RSD 新落新妇昔1- 1257214187 o, 1482-284596-26% 97.34% 2.81% 20, 125090. 14116 6 28669S. 19% (5)线性关系考察30.125340. 141450. 280593. 82%40.125370. 141480. 286998. 18%50.125330. 141430. 288198. 94%60.125020. 141080. 287398. 65%10.125727. 0
22、916312.818295. 07%20.125097. 056112.657393. 05%30.125347. 070212.65392. 70%落新妇苜40.125377.071896. 024912.907896. 93%94. 93%2. 10%50.125337. 0696312.880496. 48%60. 125027. 0521512.797795. 38%10.125720. 040530. 0796. 87%20.125090. 040330. 069896. 79%30.125340. 040410. 070498. 49%新异落新妇苜40.125370. 040420
23、. 03040. 070297. 82%96. 97%1. 79%50.125330. 040410. 069996. 96%60.125020. 040310. 069294. 93%10.125720. 603551. 112998. 55%20.125090. 600531.077992. 42%30.125340. 601731. 111198.58%异落新妇昔40.125370. 601870.51701. 110798. 49%96. 95%2. 51%50.125330. 601681. 105597. 48%60.125020. 600191.097396. 18%10. 12
24、5720. 78551.549695. 99%20. 125090. 781571.527993. 26%30.125340. 783131.551996. 28%柳皮昔40. 125370. 783320. 79611.580599. 87%97.21%2. 83%50.125330. 783071.571898. 78%60.125020. 781131.574299. 08%10.125720. 326470. 597896. 59%20.125090. 324830. 594996.21%30. 125340. 325480. 600197. 79%黄杞昔40.125370. 3255
25、60.28100.60398. 80%97. 60%2.01%50.125330. 325460. 602698. 67%60.125020. 324650. 598697. 52%色谱条件应符合以下要求:色谱柱：C18柱，柱长250inni,内径4. 6mm,粒径5um； 固定相：十八烷基硅烷键合硅胶； 流动相：乙月青-0. 1%甲酸（体积比为19:81）； 流速：1. OmL/min； 检测波长：254nH1、291nm； 柱温:30； 进样量：10uL； 理论板数：22000。精密称取落新妇昔对照品n.04mg、新落新妇昔对照品 11.04mg,异落新妇昔对照品10. 64mg、新异落新
26、妇昔10. 26mg、黄 杞昔10.67mg、柳皮昔11.64咽，分别置20mL量瓶中，加甲醇使溶 解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液储藏液。精密量取新异落新妇昔对照品储藏液1mL置于25mL量瓶，加甲 醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。分别精密量取新落新妇昔、异落新妇昔、柳皮昔、黄杞昔对 照品储藏液140uL、1.00mL, 2.00mL. 400 uL.新异落新妇昔对 照品溶液1. 00mL,精密称定落新妇昔对照品9. 283mg置20mL量瓶 中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为线性溶液（1）；分别精密量取新落新妇昔、异落新妇昔对照品储藏液400 uL、 1600 uL,新异落新妇昔对照
27、品溶液4000 口 L、分别精密称定落 新妇昔、榭皮昔、黄杞昔对照品12. 9nmg、1.623mg、1. 652mg置 10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为线性溶液（2）。精密吸取线性溶液(1) 2、5、10、15 11L,线性溶液(2) 10、 15 口1,注入液相色谱仪，按以上拟定的色谱条件进行测定。以对 照品进样量为横坐标(x),峰面积积分值为纵坐标(y)绘制标 准曲线，回归方程为：新落新妇昔回归方程：y=2000000x-7674. 5 (n=6,R=0. 9998) 落新妇昔回归方程：y=2000000x+339798 (n=6, R=0. 9999) 新异落新妇昔回归方程
28、：y=2000000x-3808 (n=6,R=0. 9997) 异落新妇昔回归方程：y=3000000x+6176. 4 (n=6, R=l. 0000) 楣皮昔回归方程:y=3000000x+89677(n=6,R=0. 9999) 黄杞昔回归方程：y=2000000x-7038. 8 (n=6,R=l. 0000)结果说明：新落新妇昔在进样量为0.0070.311 Rg范围内 时，落新妇昔在进样量为0.87118. 184ug范围内时，新异落新 妇昔在进样量为0.0020. 119ug范围内时，异落新妇昔在进样量 为。0521.251 Pg范围内时,为皮昔在进样量为0. 1052. 20
29、211 g范围内时，黄杞昔在进样量为0. 020-2. 319 口 g范围内时进样量 与峰面积呈良好线性关系，结果详见表9,标准曲线见图10。表9.标准曲线测定结果农农发2018） 4号），明确提出要坚持标准引领，以中药产品标 准为源头，建立健全道地药材生产标准。2020年12月，广西壮族 自治区人民政府办公厅关于印发促进全区中药材壮瑶药材产业 高质量开展实施方案的通知（桂政办发2020） 98号），明确指 出要构建中药材壮瑶药材质量保障体系，从源头上保障中药材壮 瑶药材质量，制定完善中药材壮瑶药材标准体系，助推中药材壮 瑶药材“走出去二成分名称标准曲线溶液进样量(四)峰面积平均回归方程相关系
30、数r (n=6)线性10. 00714506. 5线性20.01834924. 5新落新妇甘线性3线性40. 0360. 05471480102770y=2000000x-7674.50. 9998线性50. 207445073.5线性60. 311678051.5线性10. 8712488241.5线性22. 1785582842落新妇昔线性3线性44. 3576. 53511149774.516632725y=2000000x+3397980.9999线性512. 12230864789线性618.18445240420新异落新妇昔线性10. 0025247y=2000000x-38080
31、. 9997罗汉茶为胡桃科黄杞属植物黄杞Engelhardtia roxburghian a Wall.的干燥叶，收载于广西壮族自治区壮药质量标准、广 西中药材标准，为广西桂平市民间常用草药，具有清热解诲，生 津解渴，解暑利湿的功效，用于脾胃湿滞、胸腹胀闷、感冒发热 、温热泄泻、痛气腹痛。罗汉茶在广西地区多处于野生状态，主 要沿西江流域分布，生长于山沟谷地、路旁、干旱贫瘠薄地等， 适应性较广。广西地处岭南亚热带地区是壮族的主要聚居地，动 、植物资源十分丰富。主产或特产于壮族地区的壮药资源是壮族 人民在长期的生产、生活实践及与疾病作斗争的过程中逐步认识 和应用的传统药物，具有独特的民族性、地域性
32、、传统性，也是 我国独特的卫生资源，具有广阔的开发前景。近几年，国家政策持续利好，中医药产业得到良好的开展， 创新实力也在逐步增强。2021年，是“十四五”时期的开局之年， 国家也陆续出台一系列政策推动中医药高质量开展。2021年1月， 国务院办公厅印发关于加快中医药特色开展的假设干政策措施 （国办发20213号）提出实施道地中药材提升工程。2021年7 月1日，新版广西壮族自治区中医药条例正式施行，条例线性20. 0059956. 5线性30.01018596. 5线性40.01528364线性50. 080190175线性60. 119288791.5线性10. 052154601.5线性
33、20. 130345608.5异落新妇甘线性3线性40. 2610. 3916956971051555y=3000000x+6176.41.0000线性50. 8342255711.5线性61.2513343139.5线性10. 105372517线性20. 264848702.5榔皮昔线性3线性40. 5270. 79117112072493268y=3000000x+896770.9999线性51.4684465011线性62. 2026657119线性10. 02042114.5线性20. 050104391.5黄杞昔线性3线性40. 1000. 150222606334099.5y=2
34、000000x-7038.81.0000线性51.5463535895. 5线性62. 3195300953. 5(6)专属性试验取溶剂甲醇，按标准拟定方法测定，结果在291nm和254nm检 测波长下，在与新落新妇昔、落新妇昔、新异落新妇苔、异落新 妇昔、柳皮昔、黄杞昔相应的保存时间无吸收峰，说明阴性无干 扰，本法专属性好。4、一测多评方法的研究(1)相对校对因子的计算与色谱峰定位为了保证校正系数的稳定可靠，对可能引起校正系数波动的 影响因素如校准曲线、不同型号的仪器、不同色谱柱、不同柱温、 不同体积流量、不同的检测波长进行考察，并进行校准曲线的计 算。标准曲线的影响：取上述线性溶液（1）
35、2、5、10、15、20、 30ul,线性溶液（2） 2、3、5、10、15 口1分别进样分析，分别 计算各质量浓度水平下新落新妇昔（1）、新异落新妇昔（3）、异 落新妇甘（4）、榭皮昔（5）、黄杞昔（6）与落新妇昔（2）间 的相对校正因子fsi （f21、f23、f24、f25、f26）和相对保存时 间Rsi （R21、 R23、 R24、 R25、 R26）。表10.各质量浓度水平各成分相对校正因子、相对保存时间计算结果新落新妇昔新异落新妇昔异落新妇昔柳皮昔黄杞昔fsi1.27801.21500. 94240.81981. 1603Rsi0.91011. 18901.27451.46321
36、. 6336不同品牌仪器的影响：采用不同品牌的分析仪器，以绘制标 准曲线的混合对照品溶液进样分析，计算各成分的相对校正因子 fsi和相对保存时间Rsi。分别考察了4种不同品牌的高效液相色谱仪(1.仪(1.Agilent 1100； 2. Agilentl260； 3. Waters2690； 4、安Ultimate 3000),结果如下:表11.不同品牌仪器条件下各成分相对校正因子表12.不同品牌仪器条件下各成分相对保存时间新落新妇昔新异落新妇昔异落新妇昔糕皮甘黄杞昔waters26951.27801.21500. 94240.81981. 1603安捷伦12601.25591. 18420.
37、 94950. 77811. 1054安捷伦11001.30641.21160. 97560. 78651. 1377戴安 Ultimate30001.27771. 13840. 97800. 82451. 1422平均fsi1.27951.18730. 96140. 80221. 1364rsd1.62%2. 98%1.88%2. 91%2.01%新落新妇昔新异落新妇昔异落新妇昔榭皮昔黄杞昔waters e26950.91011. 18901.27451.46321.6336安捷伦12600.90781. 19091.27521.46481. 6407安捷伦uoo0. 90711. 1959
38、1.28391.48091.6467戴安 Ultimate30000.90901. 18791.27231.45941.6315平均Rsi0.90851. 19091.27651.46711.6381rsd0. 14%0. 30%0. 40%0. 65%0.42%不同色谱柱的影响：采用不同品牌的色谱柱，以绘制标准曲 线的混合对照品溶液进样分析，计算各成分的相对校正因子fsi和 相对保存时间Rsi。分别考察了三种不同品牌的气相色谱柱(色谱 柱：1. Agilent 5 TC-C18(2) (250X4. 6mm)色谱柱；2. phenomenex SuperLu C18 (250X4. 6mm)
39、色谱柱；3. CAPCELL MGIII (250X 4.6mm)色谱柱)，结果如下：表13.不同色谱柱条件下各相对成分校正因子新落新妇苜新异落新妇首异落新妇苜榭皮昔黄杞昔phenomenex1.27801.21500. 94240.81981.1603Agilent 51. 20831.20250. 96600.81931. 1434CAPCELL MGIII1.26921. 18090. 96890. 80851. 1482平均fsi1.25181. 19950. 95910.81591. 1506rsd3. 03%1.44%1. 51%0. 78%0. 76%表14.不同色谱柱条件下各成
40、分相对保存时间rsd0.32%4.00%4.20%1.33%1.59%新落新妇昔新异落新妇首异落新妇首棚皮昔黄杞昔phenomenex0.91011. 18901.27451.46321.6336Agilent 50. 90871. 28081.37931.43911.6053CAPCELL MGIII0. 90451.20531.29601.47761.6571平均Rsi0. 90781.22501.31661.46001.6320M 0.40IT iIT iIT i93。盛贺M0.300.200.100.000.002.004.006.008.0010.0012.0014.0016.001
41、8.0020.0022.0024.0026.0028.0030.0032.0034.00分钟图11 phenomenex SuperLu C18 色谱图1.601.401.201.00 0.800.600.400.200.003寸STttnroB N6.0T如墨 ZOLoTttnE 部城咻 Z900二灿忠虚,庭 ME二扣E髓瞿0.002.004.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.0030.00分钟图 12 Ag i I ent 5 TC-C18 色谱图0.800.700.700.700.600.50N 0.400.300.20O.1O1 siI* IM0.000.002 004.006.008 0010 0012.0014.0016.00分评18.0020.0022.0024 0026 0028.0030.00图13 CAPCELL MG III C18 色谱图不同柱温的影响：采用phenomenex SuperLu C18色谱柱(250 X4.6mm),以绘制标准