《威尼德方波与指数波电穿孔仪：电穿孔与基因导入方波与指数波相关实验总结.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《威尼德方波与指数波电穿孔仪：电穿孔与基因导入方波与指数波相关实验总结.docx（3页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、威尼德电穿孔仪：电穿孔与基因导入方波与指数波相关实验总结致力于生产命科学仪器的研发和生产COMMlTKD TO THfMiO PRODUCTION 0 IIFF $CK W lN$TRVM(NT$致力于生产命科学仪器的研发和生产COMMlTKD TO THfMiO PRODUCTION 0 IIFF $CK W lN$TRVM(NT$威尼德双波全能型电穿孔仪Gene Pulser X2高压脉冲电穿孔仪是功能强大的将核酸、 蛋白质以及其它分子导入多种细胞的高效技术。通过高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的 通透性，从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核甘酸、DNA与RNA、蛋白、 糖类、染
2、料以及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对于其它物理和化学转化方法, 是一种有价值和有效的替代方法。广泛用于植物、动物和微生物的各类细胞电穿孔1方波方波脉冲是指电压瞬间升至预设电压，保持电压放电，然后瞬间终止放电。一般哺乳动 物细胞电转染时选择方波脉冲，有较高的转染效率和细胞存活率。选择方波时，有以下参数 要进行考虑：场强、脉冲长度、脉冲个数以及脉冲间隔。方波-主要用于电转哺乳动物细胞和组织，也可用于细胞融合场强：两电极间的电压大小，用Kv/cm表示，场强改变一般通过调整脉冲电压或电极 间距来实现。细胞类型、场强范围、细菌/酵母3-24 kV/cm、哺乳动物细胞、0.25-3 kV/cm
3、、 植物3-12 kV/cm脉冲长度：单个脉冲持续的时间，脉冲长度与细胞膜穿孔保持开放的时间紧密相关， 如时间太长那么导致孔径无法恢复；如时间太短那么外源物质无法通过细胞膜。脉冲个数和间隔：是指脉冲的个数以及每两个脉冲之间的间隔。有时为到达优化的分子传递效果，我们可以采用多脉冲。2指数衰减波传递效果，我们可以采用多脉冲。2指数衰减波指数递减波脉冲是先对电容充电，然后让电容完全放电，其电压变化呈指数递减。一般 这种波形的脉冲电转染适用于细菌、酵母菌、昆虫细胞。选择指数衰减波时，有以下参数要 进行考虑：场强、电容、电阻、时间常数。指数衰减波-主要用于电转细菌，酵母，植物（有细胞壁的细胞），有时候对
4、一些哺乳动 物细胞也适用场强：同方波。电容：容纳电场的能力，用uF表示，释放能量的大小可通过调节电阻来实现。一般我 们采用高电压，低电容或低电压，高电容。时间常数：指数衰减波的脉冲长度，用RC表示，为电阻与电容的乘积。指数衰减波时 间常数越大，衰减的越慢，反之那么越快。电阻：阻碍电流的能力，有时又内部电阻和外部电阻之分，如BTX电路那么是内部样品 电阻与外部设置电阻进行并联，通过调整外部电阻进而来调节总电阻，进而调节脉冲时间。Part 3 方波与指数衰减波之间如何转换？如果你查阅文献，只发现有指数衰减波的参数，而你想尝试方波，那怎么办呢？接下来 让我们看看这两种波形如何转换吧。从指数衰减波转换为方波：保持电压/电极间隙/脉冲时间/脉冲间隔不变；无需设置电容和电阻参数脉冲长度为指数衰减波时间常数的一半从方波转换为指数衰减波：保持电压/电极间隙不变通过调整电阻和电容使时间常数为方波脉冲长度的2倍，注意：这些转换都是理论上的，通常方波对哺乳动物细胞更有效，指数衰减波对细菌/ 酵母更有效。