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1、第九单元 专题1 基因工程与细胞工程2017高考仿真练1(2016重庆模拟)眼虫是一种含有叶绿体原生动物,据此,某同学认为动物细胞与植物细胞之间在理论上是可以实现杂交。他设计了一个具体实验方案,如图:请回答下列有关问题:(1)实验方案中,步骤A为除去细胞壁得到_,常用除去细胞壁药品为_。(2)步骤B为_,受体动物必须接受_处理,以确保其生理状态适合于接受胚胎。(3)诱导融合可以采用一些物理方法,如_等,也可以使用化学药品_来进行诱导。(4)进行动物胚胎细胞培养时,需要用_将组织块或贴壁生长细胞分散成单个细胞。(5)诱导植物材料形成愈伤组织两类关键激素是_。答案(1)原生质体纤维素酶和果胶酶(2
2、)胚胎移植同期发情(3)离心、振动和电激聚乙二醇(4)胰蛋白酶或胶原蛋白酶(5)生长素和细胞分裂素2(2016石家庄质检)细胞工程技术研究,特别是不对称细胞杂交等技术是当前研究热点。请回答下列有关问题:(1)植物组织培养原理是_。将离体器官或组织,首先经过脱分化培养形成_,然后再分化最终形成完整植株。(2)细胞不对称杂交是指将不对等细胞进行融合,如将二倍体甘蓝体细胞与其配子细胞进行融合:首先经_酶作用去除细胞壁,形成_,再经物理或化学方法,促使二者融合,其中常用化学诱导剂为_,融合后符合育种条件植物细胞中有_个染色体组。(3)动物细胞培养液为合成培养基,但该培养基中往往要加入一些_等天然成分。
3、动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2,CO2主要作用是_。答案(1)植物细胞全能性愈伤组织(2)纤维素酶和果胶原生质体聚乙二醇(或PEG)3(3)血清/血浆维持(培养液)pH3(2016江西重点中学协作体联考)(1)凝乳酶是奶酪生产中关键性酶。从牛胃液中分离到凝乳酶以催化能力强而被广泛应用,研究人员运用基因工程技术,将编码该酶基因转移到了微生物细胞中。科学家已经测出该酶氨基酸序列,因此可以通过_方法来获取目基因。获得目基因后,常利用_技术在体外将其大量扩增。构建重组DNA分子(如图所示)最好选用_限制酶,理由是_。工业化生产过程中,最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶,现多采用重组毛霉
4、或重组酵母菌来生产,毛霉或酵母菌作为受体细胞优势是_。研究发现,如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸,其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶现代生物工程技术是_。(2)转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用,但是,胚胎工程只是指对动物_所进行多种显微操作和处理技术。(3)生态工程是实现循环经济最重要手段之一,请写出它遵循基本原理(至少答三项):_。答案(1) 化学合成PCRBamHI和PstI提高重组DNA分子比例(防止自身黏性末端连接,防止目基因与载体反向连接)含有内质网和高尔基体可对蛋白进行加工和修饰蛋白质工程(2)配子或早期胚胎(3)物质循环再生原理、物种多样性
5、原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理4(2016潍坊模拟)人类疾病转基因动物模型常用于致病机理探讨及治疗药物筛选,利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠流程如下图1所示,请据图回答:.(1)卵母细胞除从活体输卵管中采集外,还可从已处死雌鼠_中获取。(2)图中高血压相关基因作为_,质粒作为_,二者需用_切割后连接成重组载体,该过程与质粒上含有_有关。(3)子代大鼠如果_和_,即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达,然后可用其建立高血压转基因动物模型。.上图2是某科学家利用小鼠纤维母细胞等获得单克隆抗体实验研究过程,请据图回答:(1)过程类似于植物组织培养技
6、术中_过程,过程实质是_。(2)过程中需用到生物诱导方法是_。(3)处需要筛选,其目是_。答案.(1)卵巢(2)目基因运载体同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)限制酶切割位点(3)检测到体内有相关蛋白出现高血压.(1)脱分化基因选择性表达(2)灭活病毒(3)筛选出能产生特异性抗体杂交瘤细胞5研究人员利用生物工程技术,探究猪基因在不同组织细胞中特异性表达。该工程技术基本流程如下图(EGFP基因控制合成增强型绿色荧光蛋白;过程表示表达载体2导入各组织细胞)。请据图回答下列问题:(1)对获取bmp15基因常采用_法以扩增数量。过程中,需利用_限制酶处理表达载体1。(2)构建表达载体2上bmp15启动
7、子功能是_,EGFP基因作为标记基因,其作用是_。(3)对获取猪肌肉组织常用_处理,使之分散成单个肌肉细胞。(4)培养受体细胞过程中需要通入一定浓度_以维持培养液pH值。将肌肉组织消化后初次培养称为_。(5)在实验结果基础上,提取猪肌肉细胞mRNA与_进行分子杂交,可研究基因特异性表达原因。据图推测,基因在_细胞中特异性表达。答案(1)PCR(多聚酶链式反应)Xho和Hind (2)驱动bmp15基因转录鉴别筛选含有bmp15基因受体细胞(3)胰蛋白酶或胶原蛋白酶(4)二氧化碳原代培养(5)EGFP基因探针猪卵巢6科研人员培育出了比普通大豆铁含量高60%转基因大豆,改良了大豆营养品质。如图为培
8、育转基因大豆过程部分示意图。潮霉素可破坏各种细胞中核糖体功能。请回答:(1)基因工程基本操作程序主要包括四个步骤,图中A步骤是_,用到载体是_质粒。(2)获取到铁蛋白基因后常用_技术进行扩增,该技术用到酶_。(3)为筛选出含重组质粒愈伤组织,应在培养基1中添加适量_。目基因进入受体细胞(如愈伤组织细胞)内,并在受体细胞内维持稳定和表达过程,称为_。(4)培养基2中发生过程为_。检测培育转基因大豆目是否达到,需要检测转基因大豆_。答案(1)基因表达载体构建T2(2)PCRTaqDNA聚合酶(3)潮霉素转化(4)再分化种子含铁量7(2016河南普通高中模拟)白血病是由于造血干细胞增殖分化异常而引起
9、恶性增殖性疾病。目前治疗白血病主要方法是骨髓移植,但骨髓配型成功率较低,大大限制了白血病治疗。随着基因工程日渐兴起,迎来了基因治疗白血病曙光。请回答下列相关问题:(1)骨髓移植必须进行骨髓配型实验,原因是_。目前,临床上通常通过使用_来提高造血干细胞移植成活率。(2)造血干细胞移植之前先要进行培养。动物细胞培养一般分为_和_两个阶段。对于培养环境条件,除需要适宜温度、无菌无毒等以外,还要向培养液中通入氧气和二氧化碳,通入氧气目是_,通入二氧化碳目是_;对于所用培养液,应定期更换,其目是_。(3)在进行细胞移植前,有时需对移植细胞进行基因改造。要了解基因改造是否成功,可在分子水平上检测是否翻译成
10、了相应蛋白质,常用方法是_。(4)上述使用正常细胞,通常为_代以内,以保持细胞正常二倍体核型。(5)哺乳动物胚胎干细胞是从_中分离出来一类细胞,可以在体外被诱导_形成新组织细胞,这使科学家进一步培育人造骨髓成为可能。答案(1)防止发生过强免疫排斥反应免疫抑制剂(2)原代培养传代培养保证细胞能够进行有氧呼吸维持培养液pH清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害(3)抗原抗体杂交法(4)10(5)早期胚胎或原始性腺分化8(2016东北三省四市联考)下图是某实验室做通过动物纤维母细胞等获得单克隆抗体实验研究,据图回答相关问题。(1)过程实施前需将诱导基因与_相连接构建_,导入小鼠成纤维细胞时一般采用_法导入,此步骤中用到工具酶有_。(2)过程实质是_。甲细胞是_细胞,乙细胞是_细胞。(3)过程一般用_诱导,丙细胞特点是_。答案(1)载体基因表达载体显微注射限制酶、DNA连接酶(2)基因选择性表达骨髓瘤B(淋巴)(3)灭活病毒(聚乙二醇)既能迅速大量繁殖,又能产生专一抗体