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1、微生物学复习资料绪论1, 名词说明:微生物,微生物学,种,菌株, 品系, 克隆,菌落,菌苔。 微生物: 微生物是形体微小, 单细胞或个体构造简洁多细胞, 甚或无细胞构造,用肉眼看不见或看不清低等生物总称。 微生物学: 微生物学是一门在细胞, 分子或群体水平上探讨微生物形态构造, 生理代谢, 遗传变异, 生态分布和分类进化等生命活动根本规律,并将其应用于工业发酵, 医药卫生, 生物工程和环境爱惜等实践领域科学,其根本任务是开掘, 利用, 改善和爱惜有益微生物,限制, 歼灭或改造有害微生物,为人类社会进步效劳。 种:种是最根本分类单位,它是一大群表型特征高度相像,亲缘关系极其相近,与同属内其它种有
2、着明显差异菌株总称。 菌株品系:表示任何由一个独立别离单细胞繁殖而成纯种群体极其一切后代;事实上是一个微生物到达遗传性纯标记。克隆:假设菌落是由一个单细胞开展而来,那么它就是一个纯种细胞群或克隆。菌落:在适宜培育条件下,微生物在固体培育基外表有时为内部生长繁殖,形成以母细胞为中心一堆肉眼可见, 有确定形态构造子细胞集团,这就是菌落。菌苔:假如将某一纯种大量细胞密集地接种到固体培育基外表,结果长成各“菌落相互连成一片,这就是菌苔。2, 简述微生物学开展史上5个时期特点和代表人物。史前期朦胧阶段约8000年前-1676 特点:人们虽然没有看到微生物,但已经不自觉利用有益微生物, 防止有害微生物。
3、中国古代:初创期-形态学时期1676-1861 特点:这一时期微生物学探讨工作主要是对一些微生物进展形态描述。 代表人物列文虎克:微生物学先驱者奠基期-生理学时期1861-1897 特点:这一时期主要工作是查找各种病原微生物,把微生物学探讨从形态描述推动到生理学探讨新水平,建立了系列微生物学分支学科。代表人物:巴斯德和科赫。开展期生化水平探讨阶段 成熟期分子生物学水平探讨阶段特点:微生物学从一门应用学科开展为前沿根底学科,其探讨工作进入分子水平,而微生物因其不同于高等动植物生物学特性而成为分子生物学探讨主要对象。在应用探讨方面,向着更自觉, 更有效和可认为限制方向开展,与遗传工程, 细胞工程和
4、酶工程严密结合,成为新兴生物工程主角。代表人物J.Watson和F.Crick:分子生物学奠基人3, 微生物共有哪五大共性?其中最根本是哪一个?为什么?五大共性:体积小,面积大;吸取多,转化快;生长旺,繁殖快;适应强,易变异;分布广,种类多。其中最根本是体积小,面积大;缘由:由于微生物是一个如此突出小体积大面积系统,从而赐予它们具有不同于一切大生物五大共性,因为一个小体积大面积系统,必定有一个巨大养分物质吸取面, 代谢废物排泄面和环境信息交换面,并由此而产生其余4个共性。4, 微生物分类学有哪3项详细任务?试加以简述。 3项详细任务:分类, 鉴定和命名 分类任务是解决从个别到一般或从详细到抽象
5、问题,亦即通过收集大量描述有关个体文献资料,经过科学归纳和理性思索,整理成一个科学分类系统鉴定任务与分类恰恰相反,它是一个从一般到特殊或从抽象到详细过程,亦即通过详细视察和描述一个未知纯种微生物各种性状特征,然后查找现成分类系统,以到达对其知类, 辨名目。命名任务是为一个新发觉微生物确定一个新学名,亦即当你详细视察和描述某一详细菌种后,经过细致查找现有权威性分类鉴定手册,发觉这是一个以往从未记载过新种,这时,就得按微生物国际命名法规赐予一个新学名。5, 种以上分类单元分几级? 界,门,纲,目,科,属,种七级6, 何谓三域学说? 20世纪70年头末由美国伊利诺斯高校C.R.Woese等人对大量微
6、生物和其他生物进展16S和18SrRNA寡聚核苷酸测序,并比拟其同源性水平后,提出了一个与以往各种界级分类不同新系统,称为三域学说。三域指细菌域, 古生菌域和真核生物域。7, 何谓G+Cmol% 值?它在微生物分类鉴定中有何应用? 表示DNA分子中鸟嘌呤G和胞嘧啶C所占摩尔百分比值。 应用: 判别种与种之间亲缘关系相近程度;是建立新分类单元时重要指标。第一章 原核微生物形态, 构造和功能1, 名词说明:原核生物,细菌,缺壁细菌,原生质体,芽孢,伴孢晶体,放线菌。原核生物:即广义细菌,指一大类细胞核无核膜包袱,只存在称作核区袒露DNA原始单细胞生物,包括真细菌和古生菌两大类群。细菌:是一类细胞细
7、短, 构造简洁, 胞壁坚韧, 多以二分裂方式繁殖和水生性较强原核生物。缺壁细菌:指细胞壁缺乏或缺损细菌。包括原生质体, 球状体, L型细菌和支原体。原生质体:人工条件下用溶菌酶除去细胞壁或用青霉素抑制细胞壁合成后,所留下仅由一层细胞膜包袱圆球状细胞。一般由G+形成。芽孢:某些细菌在生长发育后期,可在细胞内形成一个圆形或椭圆形抗逆性休眠体,称为芽孢又称内生孢子。伴孢晶体:少数芽孢杆菌在形成芽孢同时,会在芽孢旁形成一颗菱形, 方形或不规那么形碱溶性蛋白质晶体,称为伴孢晶体即内毒素。放线菌:是一类呈丝状生长, 菌落呈放射状, 以孢子繁殖陆生性较强革兰氏阳性菌。2, 细菌根本有哪些?细胞壁,细胞膜 ,
8、间体 ,核区 ,核糖体 ,细胞质及其内含物3, 图示细菌细胞构造。见书11页4, 试比拟G+和G-细菌细胞壁异同。 成 分革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细胞肽聚糖磷壁酸类脂质蛋白质含量很高30-95含量较高50一般无20含量很低5200含量较高约20含量较高 5, 简述革兰氏染色法机制并说明此法重要性。 革兰氏染色机制:结晶紫液初染和碘液媒染:在细菌细胞膜内可形成不溶于水结晶紫与碘复合物。乙醇脱色:G细胞壁较厚, 肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂,把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色;G-细胞壁薄, 外膜层类脂含量高, 肽聚糖层薄和文联度差,结晶紫与碘复合物溶出,细胞退成无色。复染: G-
9、细菌呈现红色,而G+细菌那么仍保存最初紫色。重要性: 革兰氏染色有着特别重要理论与实践意义。通过这一染色,几乎可把全部细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两个大类,因此它是分类鉴定菌种时重要指标。又由于这两大类细菌在细胞构造, 成分, 形态, 生理, 生化, 遗传, 免疫, 生态和药物敏感性等方面都呈现出明显差异,因此任何细菌只要通过简洁革兰氏染色,就可供应不少其他重要生物学特性方面信息。6, 渗透调整皮层膨胀学说是如何说明芽孢耐热机制?芽孢耐热在于芽孢衣对多价阳离子和水分渗透很差以及皮层离子强度很高,这就使皮层产生了极高渗透压去夺取芽孢核欣中水分,其结果造成皮层充分膨胀和核心高度失水,正是这种
10、失水核心才赐予了芽孢极强耐热性。7, 简述链霉菌形态构造特点。1基内菌丝:又称养分菌丝,是紧贴固体培育基外表并向培育基里面生长菌丝。色浅, 较细,其主要功能是吸取养分物和排泄代谢产物,一般没有隔膜。有产生色素。2气生菌丝:养分菌丝发育到确定阶段,伸向空间形成气生菌丝,色较深, 直径较粗,直形或弯曲状而分枝,有产生色素。第二章 真核微生物形态, 构造和功能1, 名词说明:真核微生物,酵母菌,生活史,霉菌,无性孢子,有性孢子,子实体。真核微生物:是指一大类有完整细胞核, 构造精致染色体和多种细胞器微生物。酵母菌:非分类名词,一群能发酵糖类单细胞微生物,属真菌类。生活史 :个体经一系列生长, 发育阶
11、段后而产生下一代个体全部过程,就称为该生物生活史或生命周期。霉菌:非分类名词丝状真菌统称,通常指菌丝体兴盛而又不产生大型子实体真菌。无性孢子:不经过两性细胞结合而干脆由菌丝分化形成繁殖性小体。有性孢子:指经过两性细胞结合,经质配, 核配, 减数分裂形成繁殖小体。子实体:是由真菌养分菌丝和生殖菌丝缠结而成具有确定形态产孢构造。2, 简述真菌特点。 不能进展光合作用; 以产生大量孢子进展繁殖; 一般具有兴盛菌丝体; 细胞壁多数含几丁质; 养分方式为异养吸取型; 陆生性较强。3, 简述酵母菌特点。1生活史中,个体主要以单细胞状态存在;2多数营出芽繁殖,也有裂殖;3能发酵糖类产能;4细胞壁常含甘露聚糖
12、;5喜在含糖量较高, 酸度较大水生环境中生长。4, 图示酵母菌细胞构造,并指出其细胞壁构造特点。细胞构造: 见书48页细胞壁构造特点:1化学组成:三明治状“酵母纤维素:分三层,外层为甘露糖,内层为葡聚糖,其间夹有一层蛋白质分子。芽痕四周有少许几丁质。2原生质体制备:用蜗牛消化酶水解细胞壁。注:其构造特点可能不完善5, 简述酵母菌繁殖方式,图示酿酒酵母生活史 并说明各阶段特点。生活史:见书51页5, 简述酵母菌繁殖方式繁殖方式:无性繁殖:芽殖 裂殖 产生掷孢子等无性孢子 有性繁殖产生子囊及子囊孢子各阶段特点:子囊孢子发芽产生单倍体养分细胞单倍体养分细胞出芽繁殖异性养分细胞接合,质配核配,形成二倍
13、体细胞二倍体养分细胞不进展核分裂,出芽繁殖二倍体细胞变成子囊,减数分裂,形成4子囊孢子子囊破壁后释放出单倍体子囊孢子6, 霉菌有性和无性孢子主要有哪些?无性孢子有:厚垣孢子, 节孢子, 分生孢子, 孢囊孢子, 游动孢子, 芽孢子, 掷孢子。有性孢子有:卵孢子, 接合孢子, 子囊孢子, 担孢子。7, 细菌, 放线菌, 酵母菌, 霉菌四大类微生物菌落有何不同?为什么?菌落 细菌 酵母菌 放线菌 霉菌含水形态 很湿或较湿 较湿 枯燥或较枯燥 枯燥外观形态 小而突起或 大而突起 小而严密 大而疏松大而平坦 大而致密菌落透亮度:透亮或稍透亮 稍透亮 不透亮 不透亮菌落与培育基结合程度:不结合 不结合 坚
14、固结合 较坚固结合菌落颜色 多样 单调,一般呈乳脂或矿烛色,少数红色或黑色 特别多样 特别多样菌落正反面颜色差异 一样 一样 一般不同 一般不同菌落边缘 一般看不到细胞 可见球状,卵圆状或假丝状细胞 有时可见细菌状细胞 可见粗丝状细胞气味 一般有臭味 多带酒香味 带有泥腥味 往往有霉味缘由:因为细菌, 放线菌, 酵母菌和霉菌形态和生理类型不尽一样,所以在其菌落形态,构造等特征上也有各自特点。8, 试比拟细菌, 放线菌, 酵母菌和霉菌细胞壁成分 异同,并探讨它们原生质体制备方法。细胞壁成分异同细菌分为G+和G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量较高,而G-不含磷壁酸;G+类脂质一般无
15、,而G-含量较高;G+不含蛋白质,G-含量较高。放线菌为G-,其细胞壁具有G-所具有特点。酵母菌和霉菌为真菌,酵母菌细胞壁外层为甘露聚糖,内层为葡聚糖;而霉菌细胞壁成分为几丁质, 蛋白质, 葡聚糖。原生质体制备方法:G+菌原生质体获得:青霉素, 溶菌酶G-菌原生质体获得:EDTA鳌合剂处理,溶菌酶放线菌原生质体获得:青霉素, 溶菌酶霉菌原生质体获得:纤维素酶酵母菌原生质体获得:蜗牛消化酶13, 什么叫锁状联合?其生理意义如何?锁状联合: 担子菌亚门中多数担子菌双核菌丝,在进展细胞分裂时,于菌丝分隔处形成一个侧生喙状构造称锁状联合。生理意义:保证了双核菌丝在进展细胞分裂时,每节每个细胞都能含有两
16、个异质遗传型不同核,为进展有性生殖,通过核配形成担子打下根底。锁状联合是双核菌丝鉴定标准,但凡产生锁状联合菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门明显特征之一。14, 霉菌养分菌丝和气生菌丝各有何特点?它们分别可分化出哪些特化构造?1) 养分菌丝体:伸入培育基吸取养分; 2) 气生菌丝体:向空中生成,形成繁殖器官。养分菌丝特化构造:假根吸器附着枝附着胞菌核菌索匍匐菌丝菌环和菌网气生菌丝特化构造:子实体第三章 病毒和亚病毒1, 名词说明:病毒,真病毒,亚病毒,噬菌斑,烈性噬菌体,温顺噬菌体,溶原菌,溶原性。 病毒:是超显微,无细胞构造,专性活细胞内寄生,在活细胞外具一般化学大分子特征,一旦进入
17、宿主细胞又具有生命特征。 真病毒:至少含有核酸和蛋白质两种组分病毒亚病毒:凡在核酸和蛋白质两种成分中,只含其中之一分子病原体称为亚病毒 噬菌斑:当一个噬菌体感染一个敏感细胞后,隔不久即释放出一群子代噬菌体,在固体培育基中,它们通过琼脂层扩散又侵染四周宿主细胞,并引起它们裂解,如此经过屡次重复,就出现了一个由多数噬菌体粒子构成群体噬菌斑,它是透亮不长菌小圆斑,每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成。 烈性噬菌体:凡在短时间内能连续完成吸附, 侵入, 增殖, 成熟, 裂解这五个阶段而实现其繁殖噬菌体,称为烈性噬菌体。 温顺性噬菌体:噬菌体侵染宿主后,并不增殖,裂解,而与宿主DNA结合,随宿主DNA复制
18、而复制,此时细胞中找不到形态上可见噬菌体,这种噬菌体称为温顺性噬菌体或溶源噬菌体。 溶原菌:含有温顺性噬菌体细菌称为溶源性细菌。 溶源性噬菌体附着或整合在宿主染色体上,一道复制。 2, 病毒粒有哪几种对称体制?每种对称又有几类特殊外形?螺旋对称型TMV 呈直杆状,中空 二十面体对称腺病毒外形呈典型二十面体 复合对称T偶数噬菌体呈蝌蚪状3, 什么叫烈性噬菌体?简述其裂解性生活史。 烈性噬菌体:凡在短时间内能连续完成吸附, 侵入, 增殖, 成熟, 裂解这五个阶段而实现其繁殖噬菌体,称为烈性噬菌体。 吸附 噬菌体尾丝散开,固着于特异性受点上。 侵入 尾鞘收缩,尾管推出并插入到细胞壁和膜中,头部核酸注
19、入到宿主细胞中,而蛋白质衣壳留在细胞壁外。 增殖 增殖过程包括核酸复制和蛋白质生物合成。注入细胞核酸操纵宿主细胞代谢机构,以寄主个体及细胞降解物和培育基介质为原料,大量复制噬菌体核酸,并合成蛋白质外壳。 成熟装配寄主细胞合成噬菌体壳体(T4噬菌体包括头部, 尾部),并组装成完整噬菌体粒子。 裂解释放子代噬菌体成熟后,脂肪酶和溶菌酶促进宿主细胞裂解,从而释放出大量子代噬菌体。什么是效价?试简述噬菌体效价双层平板法。效价表示每毫升试样中所含有具有侵染性噬菌体粒子数。双层平板法主要步骤:预先分别配制含2%和1%琼脂底层培育基和上层培育基。先用底层培育基在培育皿上浇一层平板,待凝固后,再把预先溶化并冷
20、却到45以下,加有较浓敏感宿主和确定体积待测噬菌体样品上层培育基,在试管中摇匀后,立刻倒在底层培育基上铺平待凝,然后在37下保温。一般经10余h 后即可对噬菌斑计数。4, 什么是一步生长曲线?它可分几期?各期有何特点? 一步生长曲线 : 定量描述烈性噬菌体增殖规律试验曲线称作一步生长曲线或一级生长曲线。潜藏期从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新噬菌体最短时间。又可分为隐晦期和胞内累积期。裂解期从被感染第一个细胞裂解至最终一个细胞裂解完毕所阅历时间。平稳期指被感染宿主已全部裂解,溶液中噬菌体数到达最高点后时期。 裂解量每个被感染细菌释放新噬菌体平均数第四章 微生物养分和培育基1, 名词说明:自
21、养微生物,异养微生物,养分,养分物,C/N,氨基酸自养型生物,氨基酸异养型生物,生长因子,大量元素,微量元素,培育基。 自养微生物:以二氧化碳作为主要或唯一碳源,以无机氮化物作为氮源,通过细菌光合作用或化能合成作用获得能量微生物。 异养微生物:以有机物为碳源,光或有机物分解为能源微生物。 养分:指生物体从外部环境摄取其生命活动所必需能量和物质,以满足其生长和繁殖须要一种生理功能 。 养分物:能为机体生命活动供应构造物质, 能量, 代谢调整物质和良好生理环境物质称为养分物。 C/N比:所谓C/N是指在微生物培育基中所含碳源中碳原子摩尔数与氮源中氮原子摩尔数之比。 氨基酸自养型生物:不须要氨基酸作
22、为氮源,它们能把非氨基酸类简洁氮源自行合成所须要一切氨基酸。 氨基酸异养型生物:须要从外界吸取现成氨基酸作氮源。 生长因子:一类对微生物正常代谢必不行少且又不能从简洁碳, 氮源自行合成所需极微量有机物。 大量元素:但凡生长所需浓度在10-310-4mol/L范围内元素,可称为大量元素,包括P, S, K, Mg, Ca, Na和Fe等。 微量元素:但凡生长所需浓度在10-610-8mol/L范围内元素,那么称为微量元素,包括Cu, Zn, Mn, Mo, 和Co等。 培育基:是一种人工配制适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用混合养料,它具备微生物所需六大养分元素,且其间比例适宜。 2, 指出四大
23、类微生物最适生长pH范围及常用培育基名称。细菌PH 7476牛肉膏蛋白胨培育基;真菌自然PH马铃薯培育基;霉菌PH 7072察氏培育基;放线菌PH 7476高氏一号培育基。3, 指出微生物六大养分要素。 一碳源二氮源三能源四生长因子五无机盐六水 4, 试比拟细胞膜运输养分物质四种方式。比拟工程 单纯扩散 促进扩散 主动运输 基因移位 特异载体蛋白无慢由浓至稀内外相等无特异性不须要不变 无无竞争性无H2O, CO2, O2甘油, 乙醇, 少数氨基酸, 盐类, 代谢抑制剂有快由浓至稀内外相等特异性不须要不变有有竞争性有SO42+, PO43+, 糖真核生物有快由稀至浓内部浓度高得多特异性须要不变有
24、有竞争性有无快由稀至浓内部浓度高得多特异性须要变更有有竞争性有运输速度溶质运输方向平衡时内外浓度运输分子能量消耗运输前后溶质分子载体饱和效应与溶质类似物运输抑制剂运输对象举例氨基酸, 乳糖等糖类, Na+, Ca2+等无机离子葡萄糖, 果糖, 甘露糖, 嘌呤, 核苷, 脂肪酸等5, 什么是鉴别性培育基?试以EMB培育基为例,分析其鉴别作用原理。 鉴别性培育基:培育基中参加能于某一菌无色代谢产物发生显色反响指示剂,从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相像它种菌落相区分培育基就称鉴别性培育基。 EMB作用原理 其中伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培育革兰氏阴性细菌。在低酸度时,这两种染
25、料结合形成沉淀,起着产酸指示剂作用。因此试样中多种肠道细菌会在EMB培育基上产生相互易区分特征菌落,因而易于识别。尤其是大肠杆菌,因其猛烈分解乳搪而产生大量混合酸,菌体带H+故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美蓝结合,所以菌落染上深紫色,从菌落外表反射光中还可看到绿色金属闪光: 6, 什么是单功能养分物, 双功能养分物, 多功能养分物?单功能养分物:一种养分物有一种养分要素功能,该养分物称为单功能养分物。双功能养分物:一种养分物有两种养分要素功能,该养分物称为双功能养分物。多功能养分物:一种养分物常有两种以上养分要素功能,该养分物称为多功能养分物。7, 试述培育基种类。 按对培育基成分了解来分:
26、 (1)自然培育基 (2)组合培育基 按培育基外观物理状态来分 (1)固体培育基 (2)半固体培育基 液体培育基 (4)脱水培育基 按培育基功能来分 (1)种子培育基 (2)发酵培育基 (3)根底培育基 (4)选择性培育基第五章微生物新陈代谢1, 名词说明:新陈代谢,生物氧化,呼吸,无氧呼吸,发酵,氧化磷酸化,光合磷酸化,底物水平磷酸化,Stickland反响。 新陈代谢:是指发生在活细胞中各种分解代谢与合成代谢总和。其中,分解代谢是指困难有机物分子通过分解代谢酶系催化,产生简洁分子, 腺苷三磷酸(ATP)形式能量或复原力(或称复原当量,以H表示)作用;合成代谢那么与分解代谢相反,是指在合成代
27、谢酶系催化下,由简洁小分子, ATP形式能量与H形式复原力一起合成大分子过程。 生物氧化:生物氧化是指发生在活细胞中一系列产能性氧化反响总称。 呼吸:呼吸是指底物按常规方式脱氢后,经完整呼吸链递氢,最终由分子氧承受氢并产生水和释放能量(ATP)生物氧化方式。呼吸必需在有氧条件下进展,因此又叫有氧呼吸。 无氧呼吸:无氧呼吸又称厌氧呼吸,是一类呼吸链末端氢受体为外源无机氧化物少数为有机氧化物生物氧化。 发酵:无氧条件下,底物脱氢后产生复原力不经呼吸链而干脆传递给某一中间代谢物低效产能反响。 氧化磷酸化:又称电子传递磷酸化,是指呼吸链递氢或电子和受氢过程与磷酸化反响相偶联并产生ATP作用。 光合磷酸
28、化:由光照引起电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP过程成为光合磷酸化。 底物水平磷酸化:是指在生物氧化过程中产生一些含有高能磷酸键化合物,并且这些高能磷酸化合物高能磷酸键键能可以干脆偶联ATP合成。 Stickland反响 :以一种氨基酸作氢供体和以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能独特发酵类型,称为stickland反响。stickland反响产能效率很低,每分子氨基酸仅产1个ATP。 2, 试述生物氧化形式, 过程, 功能及类型。 形式:某物质与氧结合, 脱氢或失去电子 过程:一般包括三个环节:底物脱氢或脱电子作用该底物称作电子供体或供氢体氢或电子传递需中间传递体,如NAD, FAD
29、等最终氢受体承受氢或电子最终电子受体或最终氢受体 功能:产能ATP, 产复原力H和产小分子中间复原产物。 类型:呼吸, 无氧呼吸, 发酵3, 在化能异养微生物生物氧化中,其基质脱氢和产能途径主要有哪几条?试比拟各途径主要特点。 脱氢和产能途径:EMP, HMP, ED, TCA 特点:EMP当葡萄糖转化成1.6-二磷酸果糖后,在果糖二磷酸醛缩酶作用下,裂解为两个3化合物,再由此转化为2分子丙酮酸。 HMP当葡萄糖经一次磷酸化脱氢生成6-磷酸葡萄糖酸后,在6-磷酸葡萄糖酸脱酶作用下,再次脱氢降解为1分子CO2和1分子磷酸戊糖。 ED 是少数EMP途径不完整细菌所特有利用葡萄糖替代途径。一分子葡萄
30、糖经ED途径可生成两个丙酮酸并净生成一个ATP, 一个NADH+H+和一个NADPH+H+。 TCA(1)氧虽不干脆参加其中反响,但必需在有氧条件下运转;(2)丙酮酸在进入三羧酸循环之先要脱羧生成乙酰CoA,乙酰CoA和草酰乙酸缩合成柠檬酸再进入三羧酸循环。(3)循环结果是乙酰CoA被彻底氧化成CO2和H2O,每氧化1分子乙酰CoA可产生12分子ATP,草酰乙酸参加反响而本身并不消耗。(4)产能效率极高;(5)TCA位于一切分解代谢和合成代谢中枢纽地位。4, 试述EMP途径在微生物生命活动中重要性。 供应ATP形式能量和NADH2形式复原力;是连接其它几个重要代谢途径桥梁,包括TCA, HMP
31、和ED途径等;为生物合成供应多种中间代谢物;通过逆向反响可进展多糖合成。5, 试述HMP途径在微生物生命活动中重要性。供应合成原料;产复原力;作为固定CO2中介;扩大碳源利用范围;连接EMP途径。6, 试述TCA循环在微生物产能和发酵生产中重要性。 TCA位于一切分解代谢和合成代谢中枢纽地位,产能效率极高,不仅可为微生物生物合成供应各种碳架原料,而且还与人类发酵生产严密相关。7, 在微生物能量代谢中ATP产生途径有哪几条? EMP, HMP, ED, TCA, 呼吸, 无氧呼吸, 发酵8, 试比拟呼吸, 无氧呼吸, 发酵异同点。产能呼吸无氧呼吸发酵环境条件有氧无氧无氧终电子受体来源环境,外源性
32、环境,外源性胞内, 内源性性质分子氧化合物通常为无机物代谢中间物能进展代谢产能方式微生物专性好氧微生物, 兼性好氧微生物, 微嗜氧微生物专性厌氧微生物, 兼性好氧微生物兼性好氧微生物, 耐氧厌氧微生物, 专性厌氧微生物10, 细菌酒精发酵途径如何?它与酵母菌酒精发酵有何不同?细菌酒精发酵有何优缺点?细菌酒精发酵途径ED, 酵母菌酒精发酵EMP a.优点:代谢速率高;产物转化率高;菌体生成少;代谢副产物少;发酵温度高;不必定期供氧;细菌为原核生物,易于用基因工程改造菌种;厌氧发酵,设备简洁。b.缺点:生长pH为5,较易染菌;细菌耐乙醇力较酵母菌为低细菌7%乙醇,酵母菌耐8-10%乙醇;底物范围窄
33、葡萄糖, 果糖。11, 青霉素为何只能抑制代谢旺盛细菌?其制菌机制如何?缘由:青霉素抑制肽聚糖合成过程,形成裂开细胞壁,代谢旺盛细菌才存在肽聚糖合成,因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制:青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间转肽作用。12, 如何运用代谢调控理论使微生物合成比自身需求量更多有用代谢产物?举例说明。应用养分缺陷型菌株解除正常反响调整。如赖氨酸发酵, 肌苷酸生产;应用抗反响调整突变株解除反响调整。如黄色短杆菌抗氨基羟基戊酸菌株能累积苏氨酸;限制细胞膜渗透性。如在谷氨酸发酵生产中只要把生物素浓度限制在亚适量状况下,才能分泌出大量谷氨酸,第六章微生物生长及其限制1, 名词说明:
34、生长产量常数Y,最适生长温度,巴氏消毒法,抗生素,抗代谢药物,选择毒力,生长限制因子,MIC。 生长产量常数Y:指菌体产量与限制性养分物消耗比例关系。 最适生长温度:某菌分裂代时最短或生长速率最高时培育温度。 巴氏消毒法:用较低温度处理牛乳或其他液态食品,杀死其中可能存在无芽孢病原菌而又不损害养分与风味消毒方法。 抗生素:抗生素是生物在其生命活动中产生一种次生代谢产物或其人工衍生物,能对他种生物生命活动产生抑制作用或致死作用。 抗代谢药物:又称代谢拮抗物, 代谢类似物,是指在构造上与生物体所必需代谢物相像,可以与正常代谢途径中特定酶发生竞争性反响,从而阻碍酶功能, 干扰代谢正常进展物质。 选择
35、毒力:抗生素对人体及动, 植物组织毒力,一般远小于它对致病毒毒力,这称为抗生素选择毒力。 生长限制因子:但凡处于较低浓度范围内,可影响生长速率和菌体产量养分物,就称生长限制因子。 MIC:最小抑菌浓度,表示某药物对某菌最小抑菌浓度,常以g/ml或/ml来表示。2, 什么是典型生长曲线?它可分几期?划分依据是什么?各期特点如何? 典型生长曲线 :将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积液体培育基中培育。在适宜条件下,其群体就会有规律地生长,定时取样测定细胞含量,以细胞数目对数值作纵坐标,以培育时间作横坐标,就可以画出一条有规律曲线,这就是微生物典型生长曲线。 划分依据:单细胞微生物。 (1)延滞期(停
36、滞期, 调整期) 特点:a.生长速率常数为零;b.细胞形态变大或增大;c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活泼;e.对外界不良条件反响敏感。 (2) 对数期 特点:此时菌体细胞生长速率常数R最大,分裂快,代时短,细胞进展平衡生长,菌体内酶系活泼,代谢旺盛,菌体数目以几何级数增加,群体形态与生理特征最一样,抗不良环境实力强。稳定期 特点:a.生长速率常数为零;b.菌体产量到达最高;c.活菌数相对稳定;d.细胞开场贮存贮藏物;e.芽孢在这个时期形成;f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。 衰亡期 特点:a.细胞形态多样;b.出现细胞自溶现象;c.有次生代谢产物形成;
37、d.芽孢在此时释放。 3, 延滞期有何特点?如何缩短延滞期?特点:a.生长速率常数为零;b.细胞形态变大或增大;c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活泼;e.对外界不良条件反响敏感。消退:a. 以对数期菌体作种子菌 ;b. 适当增大接种量 :一般接受3%8%接种量,依据生产上详细状况而定,最高不超过1/10。c. 培育基成分:种子培育基尽量接近发酵培育基 。 4, 指数期有何特点?处于该期微生物有何应用? 特点:此时菌体细胞生长速率常数R最大,分裂快,代时短,细胞进展平衡生长,菌体内酶系活泼,代谢旺盛,菌体数目以几何级数增加,群体形态与生理特征最一样,抗不良环境
38、实力强。 应用:指数期微生物是探讨生理, 代谢等良好材料;是增殖噬菌体最适菌龄;是发酵生产中用做种子最正确种龄,通过补加养分物质延长指数期。5, 稳定期为何会到来?有何特点? 形成缘由:a.养分物尤其是生长限制因子耗尽;b.养分物比例失调;c.有害代谢产物积累;d.物化条件变更。 特点:a.生长速率常数为零;b.菌体产量到达最高;c.活菌数相对稳定;d.细胞开场贮存贮藏物;e.芽孢在这个时期形成;f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。 6, 什么叫连续培育?有何优点?为何连续时间是有限? 连续培育:指微生物接种到培育基里以后整个生长期间,微生物能持续地以比拟恒定生长速率常数进展生长,从而导致微
39、生物生长过程能“不断地进展下去一种培育方法。 优点:高效, 低耗, 利于自控, 产品质量稳定。 菌种易于退化;简洁污染;养分物利用率低于分批培育。 因此连续时间是有限。7, 微生物培育过程中pH变更规律如何?如何调整? 微生物生命活动过程中会自动地变更外界环境pH,其中发生pH变更有变酸和变碱两种过程,在一般微生物培育中往往以变酸占优势,因此,随着培育时间延长,培育基pH会慢慢下降。变更还与培育基组分尤其是碳氮比有很大关系,碳氮比高培育基经培育后pH会明显下降;相反,碳氮比低培育基经培育后,其pH常会明显上升。 措施:分为“治标和“治本两大类,前者指依据外表现象而进展干脆, 刚好, 快速但不许
40、久外表化调整,后者指依据内在机制而接受间接, 缓效但可发挥许久作用调整。8, 比拟灭菌, 消毒, 防腐和化疗异同,并举例。比拟工程灭菌消毒防腐化疗处理因素强理, 化因素理, 化因素生物体表,理, 化因素化学治疗剂处理对象任何物体内外酒, 乳等有机质物体内外宿主体内微生物类型一切微生物有关病原菌一切微生物有关病原菌对微生物作用彻底杀灭杀死或抑制抑制或杀死抑制或杀死实 例加压蒸气灭菌,辐射灭菌,化学杀菌剂70酒精消毒,巴氏消毒法冷藏,枯燥,糖渍,盐腌,缺氧,化学防腐剂抗生素,磺胺药,生物药物素 9, 试述微生物生长繁殖测定方法。 一, 测生长量一干脆法1, 测体积2, 测干重二间接法1, 比浊法2
41、, 生理指标法 二, 计繁殖数1, 干脆计数法全数血球计数板法 2, 间接计数法活菌数稀释平板菌落计数法10, 试述高温灭菌方法。1, 干热灭菌法1原理:干热可使破坏细胞膜破坏, 蛋白质变性和原生质枯燥,并可使各种细胞成分发生氧化变质。2应用范围:1烘箱内热空气灭菌法150170,12hr:金属器械, 洗净玻璃器皿。2火焰灼烧法:接种环, 接种针等。2, 湿热灭菌: 即以100以上加压蒸气进展灭菌。1一样温度及一样作用时间下,湿热灭菌法比干热灭菌法更有效:湿热空气穿透力强,能破坏维持蛋白质空间构造和稳定性氢键,能加速其变性。2种类: 1)常压法a.巴氏消毒法: 用较低温度处理牛乳或其他液态食品
42、,杀死其中可能存在无芽孢病原菌而又不损害养分与风味消毒方法。a)低温维持法(LTH):要求保持30min;b)高温瞬时法(HTST):要求维持至少15s; b.煮沸消毒法:a)适用范围:一般用于饮用水消毒。b)条件:100下数分钟。c.间隙灭菌法:又称丁达尔灭菌法或分段灭菌法。a) 适用范围:适用于不耐热培育基灭菌。b) 条件:80一100下蒸煮1560分钟,三天。2)加压法:a.常规加压法a) 适用范围:适合于一切微生物学试验室, 医疗保健机构或发酵工厂中对培育基及多种器材, 物料灭菌。b) 条件:121(压力为lkgcm2),时间维持1520分钟,也可接受在较低温度(115,即cm2下维持
43、35分钟方法。b.连续加压灭菌法:在发酵行业里也称“连消法。a) 适用范围:在大规模发酵工厂中作。培育基灭菌用。主要操作是将培育基在发酵罐外连绵起伏地进展加热, 维持和冷却,然后才进入发酵罐。b) 条件:在135140下处理5一l 5秒钟11, 请说明养分物质浓度变更对微生物生长速度和最终菌体产量影响。 微生物生长所须要养分物质,只有在浓度适当条件下才能表现出良好作用。浓度太低,不能满足微生物生长须要;浓度太高反而会抑制微生物生长,最终导致菌体产量。12, 试比拟恒浊器和恒化器。装置 限制对象 培育基 培育基流速 生长速率 产物 应用范围 恒浊器 菌体密度内限制 无限制生长因子 不恒定 最高 大量菌体及与菌体相平行代谢产物 生产为主 恒化器