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1、专题一、传统发酵技术1、比拟传统发酵技术类型果酒制作果醋制作腐乳泡菜菌种酵母菌乳酸菌（常见种类 ）分类真核生物代谢类型生殖方式相宜：出芽生殖恶劣：孢子生殖发酵条件温度最适繁殖温度：最适发酵温度：氧气前期须要：进展有氧呼吸有利于 ；后期不需（缺氧呈酸性）：无氧条件下进展酒精发酵反响式有氧呼吸：氧气糖源足够时:留意：充气口插至发酵瓶底部;排气口离发酵液一段间隔 将葡萄汁装人发酵瓶，要留大约 的空间毛霉等产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解成 、脂肪酶讲脂肪分解成 反响式：酒精发酵：缺少糖源时：乙醇（ ） 醋酸；反响式：2、 传统发酵技术通常 （是/否）须要严格的灭菌。3、 果酒果醋制作流程：选择葡萄
2、冲洗榨汁酒精发酵果酒醋酸发酵果醋若为自然发酵，不能反复冲洗，防止 。 选择簇新优质的葡萄，是先冲洗再去梗，还是先去枝梗再冲洗？为什么？葡萄酒呈现深红色缘由？ 用带盖子的瓶子制作葡萄酒时，适时拧松、拧紧瓶盖的目的分别是什么？ 运用左侧装置时，充气口排气口的作用分别是？制作果酒、果醋充气口的翻开状况分别为排气后要连接长而弯的胶管（开口向 ） 的缘由？酒精和醋酸发酵过程中，由于分别产生了 和 ，使PH下降。酒精发酵旺盛时，加醋酸菌能否变成醋酸？果汁发酵后酒精的检验:酒精+（酸性） 颜色由（ 色）（ 色）4、腐乳制作原理和流程图:p7让豆腐长出 加 腌制加 装瓶密封腌制选择豆腐的含水量约为 ，过高 ；
3、过低 。白色菌丝，可分为 菌丝（白毛）和 菌丝（腐乳外部的皮儿）。加盐腌制：逐层加盐，随层数加高而 ，接近瓶口外表的盐要 。目的：a析出豆腐中的 ，使豆腐块变硬，以免过早酥烂；b ，避开豆腐块腐败变质。盐的限制：盐浓度过高会 ，浓度过低会 。卤汤由 和 组成。酒的限制：含量一般在 左右。酒精含量过高，使成熟时间 。酒精含量过低 ，导致食物腐败。用 对瓶口灭菌后密封腌制。红方参加了 ；糟方参加了 ；青方不加辅料。4、 泡菜制作原理和流程图:参加调味料装坛密封发酵成品选择簇新原料修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状配置盐水（水：盐= ）经过 煮沸目的：a、 b、出去 。冷却目的：避开温度过高杀死微生
4、物，保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。坛沿注满水保证坛内乳酸菌所需的 环境。泡菜坛要选择透气性差的容器，以创建无氧环境，有利于乳酸菌发酵，防止蔬菜腐烂。5、 膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体安康，绝大局部亚硝酸盐随尿排出。只有在特定的条件下（温度相宜和肯定微生物，如胃中胃酸、硝酸复原菌）才会转变成致癌物 。6、 检测亚硝酸盐的原理和方法p10a、 原理：在 条件下，亚硝酸盐与 发生重氮化反响，与 结合形成玫 色 产物。提取剂：氯化镉、氯化 溶液，用盐酸调整pH至1。作用 。氢氧化铝乳液作用 氢氧化钠溶液 。b、 方法： （将标准显色液与样品处理液进展比拟，以确定显色液中亚硝酸盐的含量）。7
5、、 为什么泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜时怎么形成的？8、 为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中参加少量陈泡菜液，参加陈泡菜液的目的是 。9、 泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。 10、 泡菜腌制中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变更专题二、微生物的培育与应用1、 人们根据微生物对_的不同需求，配制出供其 的养分基质叫培育基。2、 分类物理性质划分：a、液体培育基（不须要加凝固剂）：通常用于扩大培育，增加菌液浓度。通常须要振荡培育，这样微生物生长速度快，缘由是能进步培育液 的含量，同时可以是菌体与培育液充分接触，进步 的利用率。b、固体培育基（须要加凝固剂，常运用 44下凝
6、固，常规培育条件下呈固态）：通常用于分别、计数、鉴定。按化学成分划分：a、自然培育基（化学成分不明确）b、合成培育基（化学成清楚确）按功能（用处）划分：a、选择培育基：添加（或缺少）某种化学物质，作用是多种微生物中选出须要的种类。例：以尿素为唯一氮源的培育基上挑选出尿素分解菌。b、鉴别培育基：添加某种指示剂或化学药剂，用于断定某一微生物的存在。例：大肠杆菌在伊红美蓝培育基上菌落呈现 。3、 培育基成分： 、 、水和 、生长因子（维生素、氨基酸、碱基等）。注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源；异养型微生物通常不能利用CO2作为碳源；蛋白质既可以作碳源，也可以做氮源；不是全
7、部碳源都能作为能源，无机碳不能作为能源；NaHCO3既能供应碳源，又能作为无机盐；无机氮源也能供应能量，如NH3能为硝化细菌供应能量；在供应上述养分物质的根底上，培育基还须要满意微生物对PH、特别养分物质以及氧气的要求，霉菌须要将ph调制酸性，细菌的ph为中性或微碱性。牛肉膏供应的养分成分有 、蛋白胨供应的养分成分有 。（p15）4、 无菌技术概念：泛指在培育微生物的操作中，全部防止杂菌污染的方法。获得纯洁培育物的关键:防止外来杂菌的入侵。5、 无菌技术分类条件结果常用方法应用范围消毒（活体空间）较为温柔的物理或化学方法仅杀死物体外表或内部的局部微生物煮沸消毒法（100，5-6min）日常用品
8、巴氏消毒法（70-75，30min或80，15min。）不耐高温的液体（如可杀死牛奶中微生物并使 不被破坏）化学药剂消毒法用酒精（70）擦拭双手，用氯气消毒水源紫外线消毒法接种室、接种箱、或超净工作台灭菌剧烈的理化因素杀死物体内外全部的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种环（针）、金属用具、试管口和瓶口干热灭菌法（160-170，1-2h）玻璃器皿高压蒸汽灭菌法（气压100Kpa、温度121，15-30min）培育基及容器注：高压蒸汽灭菌时，须加热煮沸锅内的水,彻底排出冷空气，否则会出现压强为气压100Kpa、温度却 121。（p14） 技术除了可以用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外
9、，还能有效避开 自身被微生物感染。（p15旁栏）运用后的培育基丢弃前肯定要进展 处理，以免污染环境。（p15旁栏）6、 常见的培育基类型及适用对象牛肉膏蛋白胨培育基（又称肉汤培育基）以及LB培育基（培育 ）MS培育基（用于 ）麦芽汁琼脂培育基（用于培育 ）伊红美蓝培育基（用于检测 ）马铃薯琼脂培育基，及查氏培育基，分别用于培育真菌，霉菌（p83）7、制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的一般步骤： 注：牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，称取时动作要_，称后刚好_溶化时牛肉膏连同 一同放入烧杯；溶化过程中不断用玻璃棒搅拌，防止 。待培育基冷却至_左右时，在_旁边倒平板。等平板冷却凝固后，将平板_，缘由是既可使培育基
10、外表水分更好的挥发，又可防止皿盖上的 落入培育基，造成污染。在灭菌前, 用牛皮纸包紧锥形瓶的目的灭菌时能避开水蒸汽凝聚时浸湿棉塞；取出培育基锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌污染的作用。8、分别纯化大肠杆菌纯化培育的原理:设法在培育基上得到由_繁殖而来的肉眼可见的菌落（概念）。在无菌条件将微生物接入培育基过程叫做接种。常见的接种方法有： 法和 法（看书理解其具体过程）。微生物的接种还包括斜面接种和 。核心是防止杂菌污染，保证培育物纯度。（p18旁栏）9、答复下列问题a、如图所示接种方法为 ， （能/否）计数需灼烧接种环 次。灼烧接种环后为什么待其冷却才能划线？第二次及其后的划线操作时为何总从上次划
11、线的末端开场划线？怎样检测该平板灭菌是否合格？b、另一种接种方法运用接种工具为 ，其灭菌方法是 ，待酒精燃尽后冷却8-10s。（p19）每克样品的军落数等于C/V*M。另一种计数方法为显微镜干脆计数法。10、菌种保藏a、临时保藏：适用于频繁运用的菌种，需将菌种接种到试管的 上，4冰箱保藏。缺点，保存时间不长，菌种简单被 或 。b、甘油管藏：适用于长期保存的菌种，温度为 。11、挑选菌种原理：人为供应有利于 生长的条件(包括养分、温度、pH等)，同时 其他微生物生长。（p21）启示（根据）：找寻目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到_中去找寻。12、微生物的计数方法：a、显微镜干脆计数：特点：计
12、数菌体本身；不能区分死菌与活菌；b、稀释涂布平板法（间接计数），又叫活菌计数法：该接种方法用于计数时结果通常偏 ，缘由是 。（p22）涂布平板前须要对培育液进展屡次稀释（梯度稀释）的缘由是：聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞。注：计数时一般选用菌落数为 的平板进展计数；同一稀释度加到 或以上的平皿中，经涂布培育后计算出菌落平均数，进步计数精确度；每克样品的菌落数等于C/V*M（C代表某一稀释度下平板上生长的 数，V代表涂布平板时所用的稀释液的 (ml)，M代表稀释 ）。c、滤膜法测定细菌的数目（大肠杆菌为例）：方法：将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培育基上培育。结果：在该培育基上计数
13、出现黑色菌落的数目即计算出大肠杆菌的数量（p26旁栏）13、土壤中分解尿素的细菌的分别和计数流程：土壤取样制备培育基样品的稀释取样涂布微生物的培育与视察菌落鉴定计数注： 具有微生物的自然培育就之称，绝大多数微生物生活在间隔 地表 cm的土壤层；菌落特征包含菌落的 、大小，隆起程度和 等，可作为菌种鉴定的重要根据；（p24）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在运用前都要灭菌。制备选择培育基（尿素为唯一 ）时还要制备牛肉膏蛋白胨培育基作比照的缘由用来推断选择培育基是否起到了选择作用,即一样的菌液，在牛肉膏蛋白胨培育基上生长的菌落数目应明显 （填多于或少于）选择培育基上的数目；尿素分解菌的鉴定原理 酶
14、催化尿素分解成 （反响式：CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2）培育基碱性增加 指示剂变红脲酶阳性。14、纤维素是一种由 首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质，是 细胞壁重要组成成分。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 酶(外切酶)、 酶(内切酶)和 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。15、挑选纤维素分解菌的方法是_。挑选原理是：刚果红可以与纤维素形成 色复合物，当纤维素被 分解后，复合物无法形成，出现以 为中心的 ，我们可以通过 来挑选纤维素分解菌。（p28）16、试验流程：土壤取样选择培育梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培
15、育基上（鉴别培育基）选择产生透亮圈的菌落（纯化）进一步鉴定注：土壤取样时树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶、还可以将 埋在土壤里（埋入土壤10cm经30d左右的腐烂时间）等，将其埋在土壤中的作用使纤维素分解菌相对集中，事实上是人工设置纤维素分解菌生存的相宜环境；选择培育目的是增加纤维素分解菌的 ，以确保可以从样品中分别到 （p29），该过程用到的选择培育基为 体培育基；鉴别纤维素分解菌方法有两种：先培育微生物再参加刚果红，缺点操作繁琐，是刚果红会使菌落之间发生 在倒平板时参加刚果红，优点操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是a.产生淀粉酶的微生物也产生模糊透亮圈b.有些微生物能降解色
16、素，形成明显的透亮圈；进一步鉴定时，为了确定分别得到的是纤维素分解菌，还须要进展 试验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进展定量测定。（p30）专题六、植物有效成分的提取1、 植物芳香油的特点：挥发性强，易溶于有机溶剂化学本质:主要为 化合物及其衍生物植物芳香油的常用提取方法：蒸馏、压榨、萃取，采纳哪种方法要根据 来确定。2、 水蒸气蒸馏法：分类（根据原料放置位置）：水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏原理：利用水蒸气将 较强的植物芳香油携带出来，形成 ，冷却后，油水混合物又重新分出 。适用范围：挥发性强，化学性质稳定3、 压榨法：适用范围
17、：易焦糊和含油量高的原料提取，如柑橘，柠檬，其不宜采纳水中蒸馏缘由是 。4、 萃取法：不适于蒸馏法的原料，可以考虑运用此方法。是将粉粹、枯燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂当中的方法。局限性：有机溶剂必需事先 ，除去杂质，否则会影响芳香油的 。（p73）5、 玫瑰精油的提取：玫瑰精油性质：化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一起蒸馏；方法：水蒸气蒸馏法试验流程：鲜玫瑰花+清水（比例： ）水蒸气蒸馏油水混合物分别油层(+NaCl)除水（+无水Na2SO4）（过滤）玫瑰精油注：a、参加NaCl作用：增加乳浊液中盐浓度，促进油水分层。b、用 工具分别油层和水层。关于蒸馏
18、装置：a、安装仪器时一般按自下而上，从左到右的依次，拆卸仪器的依次与安装时相反。保证冷凝管下进上出。b、蒸馏开场时，先通冷水后加热；蒸馏完毕时，先撤热源后停顿通水。6、橘皮精油的提取：性质：无色透亮，具有橘香味，主要成分是 。试验流程：石灰水浸泡漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油注：a、石灰水浸泡的作用 。b、浸泡后用 漂洗的目的是 。c、为了使橘皮油 ，要分别参加相当于橘皮质量0.25%NaHCO3和5%的Na2SO4，并调整PH至7-8。（p75）d、关于两次过滤：初次过滤：先用 过滤去除 ，然后 进一步去除质量较小的残留固体物。再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮油分别出来。此时的橘皮精油还含有少
19、量的水和果蜡，需在5 10 下静置57 d，让杂质沉淀。再次过滤：1、用吸管吸出上层澄清的油层，其余局部 过滤。7、胡萝卜素的提取概念：胡萝卜素是从胡萝卜中提取出的 色物质，包括多种构造类似物。种类：划分根据为双键数目，分为、三类，最主要的组成成分是 。功能：一分子的-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官可被氧化成两分子的 用处：a治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病；b广泛地用作 ；c使 细胞复原成正常细胞。性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于 等有机溶剂。提取方法：a从 中提取；b从大面积养殖的 中获得；c利用微生物发酵消费。8、萃取剂的选择：（1）萃取剂
20、的分类：水溶性有机溶剂：乙醇、丙酮；水不溶性有机溶剂：石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳。（2）萃取剂的选择原则：具有 的沸点，可以充分 胡萝卜素，且不与水混溶；还要考虑萃取效率、对人的毒性、是否易燃，有机溶剂是否能从产品中完全除去，会不会影响产品质量等问题。综合分析以上原则，本试验最好选用 作为萃取剂。（3）影响萃取的因素及解决方法影响因素解决方法萃取剂的性质（主要）选择沸点高、水不溶性、无毒的有机溶剂萃取剂的运用量（主要）试验探究最适用量原料颗粒的大小、严密程度将胡萝卜粉碎含水量将粉碎的胡萝卜枯燥萃取温度适当进步萃取温度萃取时间延长萃取时间9、试验流程：胡萝卜 粉碎 枯燥 萃取 过滤 浓
21、缩 胡萝卜素（1） 枯燥时温度不能 ，时间不能 ，否则会导致胡萝卜素分解。（2） 萃取时水浴加热缘由 ，烧瓶需安装 装置，目的是 。（3） 过滤：过滤 ，除去固体物质；（4） 浓缩：按上图A所示安装蒸馏装置，对萃取液进展浓缩，以挥发掉 ，最终留在蒸馏烧瓶中的是 （填石油醚或胡萝卜素）10、胡萝卜素的鉴定 鉴定方法： 法。 鉴定缘由：不同色素在 中的 不同，随层析液在 上的扩散速度不同，通过比拟萃取样品和标准样品层析的结果，可以推断萃取样品的纯度。 鉴定步骤： 量做基线：在1830滤纸下端距底边 处做一基线，在基线上取A、B、C、 D四点。 比照点样：A、D点点标准样品，B、C点点萃取样品 枯燥
22、层析：吹干滤纸上的溶剂，放入色谱容器中层析 比照视察：比照视察样品色素点与标准色素点的异同注:a层析时没有选择干净的滤纸，导致试验现象不明显。为了防止操作过程中对滤纸的污染，应尽量避开用手干脆接触滤纸，可以戴手套进展操作；b点样时点样圆点太大（直径大于2mm），导致最终在滤纸上形成一条线，无法分辨被提取的色素。点样圆点的直径应为2mm；c将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时不能将滤纸两边互相接触，避开由于毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的挪动加快，溶剂前沿不齐，影响结果；d层析液不行没及样品原点，以免 ，使鉴定失败；e没有设置标准样品作比照。萃取液中是否提取到胡萝卜素，可通过与标准样品中的-胡萝卜素作比照
23、予以确认。专题四、酶的讨论与应用（一）、果胶和果胶酶以及影响酶活性的因素1.果胶(1)成分：由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物。(2)特点：不溶于水。(3)作用：是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一。2.果胶酶(1)种类：多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。(2)作用瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更简单。把果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变得澄清。3.酶的活性与影响酶活性的因素(1)酶的活性概念：酶催化肯定化学反响的实力。表示方法：用在肯定条件下，酶所催化的某一化学反响的反响速度来表示。酶反响速度的表示方法：单位时间内、单位体积中反响物的削减量或产物的增加量。
24、(2)影响酶活性的因素：温度、pH和酶的抑制剂等。4.酶的用量酶用量过多，会导致酶的奢侈；酶用量过少，会限制酶促反响的速度。因此要得到相宜的酶用量，需通过设计试验进展探究。5、(1)从果胶是植物细胞壁以及胞间层的成分方面思索，果胶对果汁消费有哪些不利影响？答案果胶会影响出汁率；果胶还会使果汁浑浊。(2)果胶酶是否特指分解果胶的一种酶？该酶的化学本质是什么？答案否，果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶酯酶、果胶分解酶等果胶酶的化学本质是蛋白质。(3)果胶酶的作用原理：果胶酶能分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使得浑浊的果汁变得澄清，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。6、影响
25、酶活性的因素：影响酶促反响速度的外界因素有温度、pH、酶抑制剂、酶的用量、底物浓度等。注：温度、pH和酶抑制剂能通过变更酶的构造而影响酶的活性，但酶的用量和底物浓度只影响反响速度，并不影响酶的活性。（二）、讨论加酶洗衣粉的洗涤效果1.加酶洗衣粉(1)概念：指含有 的洗衣粉。(2)种类:酶制剂的种类：常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶。应用最广泛、效果最明显的是 和 。根据参加洗衣粉中酶制剂的不同，将其分为两种类型：单一型加酶洗衣粉和复合型加酶洗衣粉。前者是只参加一种酶制剂的洗衣粉，又分为蛋白酶洗衣粉、脂肪酶洗衣粉、淀粉酶洗衣粉等。后者是参加了多种酶制剂的洗衣粉。(3)影响洗涤
26、效果的因素：温度、酸碱度和外表活性剂。2.消费方法:利用基因工程的方法消费出可以耐酸、耐碱、忍受外表活性剂和较高温度的酶。3.优点:加酶洗衣粉降低了外表活性剂和三聚磷酸钠用量，使洗涤剂朝低磷、无磷的方向开展，削减了对环境的污染。4、答复下列问题（1）从酶的特性角度分析含蛋白酶的洗衣粉能否洗涤羊毛、蚕丝类衣物。答案:不能。因为羊毛、蚕丝类衣物的主要成分是蛋白质，蛋白酶能分解蛋白质而损坏衣物。（2）从影响酶活性因素的角度，分析不同条件下的加酶洗衣粉的洗涤效果是否肯定大于一般洗衣粉。答案:不肯定。酶活性受温度、pH等影响，在低温等不利于酶活性发挥的条件下，加酶洗衣粉的洗涤效果不肯定好于一般洗衣粉。（
27、3）酶能干脆添加到洗衣粉中吗？为什么？科学家是如何解决这一难题的？答案不能；因为洗衣粉中的外表活性物质会降低酶的活性；将基因工程消费出的酶用特别水溶性物质包袱起来，与洗衣粉的其他成分隔分开来。注：a运用加酶洗衣粉时，必需留意洗涤用水的温度。碱性蛋白酶在3550 时活性最强，在低温下或70 以上就会失效。b添加了碱性蛋白酶的洗衣粉可以分解人体皮肤外表蛋白质，而使人患过敏性皮炎、湿疹等，因此，应避开与这类洗衣粉长时间接触。5、一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果的区分(1)比照试验：同种污渍(2)自变量：洗衣粉的种类。(3)无关变量：水温、水量、水质、洗衣粉的用量、衣物的材质和大小、洗涤方式
28、和时间等。6、探究运用加酶洗衣粉的最适温度(1)比照试验：不同温度的试验组之间形成互相比照。(2)自变量：温度。(3)设置温度梯度时要考虑实际生活中的具体状况。7、添加不同种类的酶的洗衣粉的洗涤效果的区分(1)比照试验同种污渍不同种类的洗衣粉同种洗衣粉不同污渍(2)自变量：洗衣粉的种类和污渍的种类。8、洗涤效果的推断比拟污染物的残留状况，如已消逝、颜色变浅、面积缩小等。一样时间内比拟污渍的洗涤状况，如污渍颜色变浅的程度、面积缩小的范围等；一样污渍时也可比拟彻底去除所须要的时间的长短。（三）固定化酶和固定化细胞技术1、固定化酶的应用实例消费高果糖浆(1)反响原理：葡萄糖果糖。(2)消费过程（p4
29、9图片）2、固定化酶和固定化细胞技术(1)概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在肯定空间内的技术。(2)方法及适用范围化学结合法：多适用于酶的固定化(3)优点固定化酶：酶既能与反响物接触，又能与产物分别，酶不会进入产物中，从而进步产品质量；可以反复利用，降低本钱。固定化细胞：与固定化酶技术相比，固定化细胞制备的本钱更低，操作更简单。3、固定化酶和固定化细胞的原理(1)根据教材“高果糖浆的消费”分析固定化酶根据的原理与其优点分别是什么？答案：将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既能与反响物接触，又能与产物分别；同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。(2)固定化细胞多采纳哪种方法？该方法的原理与优
30、点是什么？答案：包埋法。包埋法的原理是：将微生物细胞包埋在不溶于水的多孔性载体中。与固定化酶技术相比拟，该方法本钱更低，操作更简单。(3)固定化细胞与固定化酶所固定的酶种类有何区分？答案固定化细胞中含有多种酶，能催化一系列生化反响，而固定化酶中只含有一种酶，只能催化一种生化反响。(4)假如反响物是大分子，能否采纳固定化细胞技术？为什么？答案不能。因为大分子难以通过细胞膜进入细胞，不能与细胞内的酶接触而发生反响，因此不能用固定化细胞技术，应当用固定化酶技术。(5)固定化酶和固定化细胞活性的维持须要的条件有何异同？答案都须要相宜的温度和pH等影响酶活性的条件，但固定化细胞还须要供应溶解氧和养分物质
31、。注：固定化酶和固定化细胞：在实际应用中，酶更适用化学结合法和物理吸附法固定，缘由是酶分子小，简单被多孔性物质吸附，更合适与化学物质结合，但简单从包埋材料中漏出。细胞体积大难以吸附或结合，因此多采纳包埋法固定。4、制备固定化酵母细胞(1)固定方法：包埋法。(2)常用载体：一些不溶于水的多孔性载体，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。(3)试验操作酵母细胞的 配制0.05 mol/L的CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 固定化酵母细胞5、用固定化酵母细胞发酵将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗23次 将150 mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到锥
32、形瓶中 参加固定好的酵母细胞(凝胶珠) 置于25 下发酵24 h 视察是否有气泡产生，闻闻是否有酒味注：a海藻酸钠浓度过高不易形成凝胶珠（不呈圆形或椭圆形）；浓度过低细胞简单漏出，形成的凝胶珠内包埋的细胞过少（凝胶珠颜色过浅、呈白色）。b配制海藻酸钠时小火或连续加热并不断搅拌的目的是防止加热过程中海藻酸钠焦糊。c要等海藻酸钠溶液冷却后才能参加酵母细胞的缘由是固定的酵母细胞必需保持活性才能发挥作用，冷却后参加酵母细胞的缘由是防止高温杀死酵母细胞。d利用固定的酵母细胞发酵产生酒精时，当视察到产生很多气泡，同时闻到酒味，则证明试验获得胜利。e参加酵母细胞的海藻酸钠溶液缓慢“滴入”CaCl2溶液中，使
33、刚形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右，CaCl2溶液作用是凝胶形成稳定的构造(CaCl2浓度不宜过大，否则凝胶珠机械强度过大，通透性降低。)f将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗23次缘由：洗去凝胶珠外表多于的CaCl2溶液专题五：血红蛋白的提取和分别一、关于血红蛋白 血红蛋白是 动物红细胞的主要组成成分，负责血液中 的运输。 血液由 组成，其中 细胞最多。在红细胞的组成中，除水分以外，约90%是血红蛋白。血红蛋白由四条肽链组成，包括两条a-肽链和两条-肽链。其中每条肽链环绕一个 基团，此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。血红蛋白因含有 而呈现红色。二、关于蛋白质的分别 不
34、同的蛋白质，其分子的 、所带电荷 、 、吸附性质和对其他分子的 等特性存在差异，可利用这些差异来分别不同种类的蛋白质。 1、凝胶色谱法 凝胶色谱法也称做安排色谱法，是根据相对 分别蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微小的 球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖。在小球体内部有很多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较 的蛋白质简单进入凝胶内部的通道，路程较 ，挪动速度较慢:而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部挪动，路程较 ，挪动速度较 。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别。思索1、有局部小分子蛋白质没有进
35、入凝胶内，在凝胶外挪动，导致分别的蛋白质 。若须要得到纯度更高的蛋白质，可用凝胶色谱法进展 。 2、电泳 电泳是指 。很多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在肯定的pH下，这些基团会带上 ，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷 的电极挪动。电泳利用了待分别样品中各种分子 以及 ，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分别。 电泳和 电泳是两种常用的电泳方法。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于 以及 等因素。思索1、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率只取决于它的分子大小，其原理是？分析:SDS的作用:SDS能使蛋自质发生
36、完全变性，解聚成 ；SDS能与各种蛋白质(肽链)形成 ，SDS所带负电荷的量大大超过蛋白质(多肽)分子所带的电荷，因此可掩盖不同种蛋白质间的 ，使电泳迁移率完全取决于 。思索2、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳还可以测定蛋白质得分子量，其原理是分析:运用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定样品蛋白的分子量时，可选用一组 的标准蛋白同时进展电泳，根据标准蛋白的电冰区带位置，经过肯定得换算，可以测定未知蛋白质的分子量。思索3、SDS-聚内烯酰胶凝胶电泳测定的结果是 (整个血红蛋白/单条肽链)的分子量。思索4、丙烯酰胶和双丙烯酰胶具有很强的神经毒性并可通过皮肤汲取，因此，操作时须要戴上 ，而且在 内进展。思索5
37、、人们用人的红细胞为材料提取血红蛋白，而不是用鸡的红细胞提取，缘由是分析:人的红细胞无细胞核， ，便于提取血红蛋白。思索6、采血容器中要预先参加柠檬酸钠，目的是防止 。思索7、洗涤红细胞的目的是 。思索8、从红细胞中释放血红蛋白时，加甲苯的作用是 。思索9、红细胞裂开之后，经高速离心，溶液分为4层，从上往下分别是 。思索10、如何除掉脂溶性沉淀 。思索11、如何除掉甲苯 。思索12、“红细胞的洗涤”时用到 （低速/高速)离芯就能将红细胞与其他物质分开，因为红细胞与其他物质的密度差异 ，而“分别血红蛋白溶液”时用到 (低速/高速)离心，因为血红蛋白和其他成分的密度 。思索13、对血红蛋白溶液进展粗分别的方法是 ，具体操作是:取1mL的血红蛋白溶液装入 中，将透析袋放入盛有300mL的物质的浓度为20mmol/L的 中(PH7.0)，透析12h。思索14、透析袋一般是用 (又称玻璃纸)制成的，透析袋能使小分子自由进出，而将大分子血红蛋白保存在袋内，透析可以去除样品中 ，或用于 。思索15商品凝胶是枯燥的颗粒，运用前需干脆